L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Assay >98.5% (HPLC) Fabriek

Metode van ontleding van L-4-Nitrofenylalanien Metiel Ester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Beskrywing: Plaas ongeveer 2 g monster in 'n skoon en droë petri-bak en let op die voorkoms van die monster.Rapportering: Rapporteer die waarneming
Identifikasie: Vergelyk die retensietyd van die hoofpiek in die chromatogram van die toetspreparaat met die retensietyd van die hoofpiek in die chromatogram van sisteemgeskiktheidsbereiding soos verkry in chromatografiese suiwerheid deur HPLC.
Verlies tydens droging: Droog 'n vlak weegbottel met glasprop by 105±2℃ vir 30 minute.Laat dit afkoel tot kamertemperatuur in 'n uitroeimasjien.Weeg die weegbottel met prop akkuraat en teken die gewig aan (W1).Plaas ongeveer 1 tot 2g akkuraat geweegde hoeveelheid toetsstof in die weegbottel oor.Deur liggies sywaarts te skud, versprei die toetsmonster so eweredig as moontlik tot 'n diepte van ongeveer 5 mm.Weeg die gelaaide weegbottel en teken die gewig aan (W2).Plaas die gelaaide bottel in die droogoond, verwyder die prop en laat dit ook in die kamer.Droog die toetsmonster vir 3 uur by 105±2℃.Wanneer die kamer oopgemaak word, maak die bottel dadelik toe en laat dit tot kamertemperatuur kom in 'n uitdroogmasjien.Weeg die weegbottel met prop akkuraat af en herken die gewig (W3).Bereken die persentasie verlies tydens droging van die monster deur die volgende formule te gebruik:
Berekening Verlies tydens droging (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Enantiomeer inhoud deur HPLC:
Chemiese en reagense:
n-Hexane AR-graad
Metanol HPLC graad
Isopropylalkohol HPLC graad
Diethylamine AR graad
Standaarde: L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl standaard;L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl enantiomeer standaard
Mobiele fase: Berei 'n homogene mengsel van n-heksaan, isopropylalkohol, metanol en diëtielamien (65:20:15:0.1 v/v/v/v) voor.
Blankvoorbereiding: Dra 2,5 ml metanol oor in 'n 10 ml maatfles, verdun tot volume met mobiele fase en meng.
Stelsel geskiktheid voorbereiding:
Weeg akkuraat en dra ongeveer 5 mg elk van L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl standaard en L-4-Nitrofenylalanine Methyl Ester HCl enantiomeer standaard oor in 'n 10 ml volumetriese fles, los op in ongeveer 2.5ml metanol, verdun tot volume met mobiele fase en meng.
Toetsvoorbereiding:
Weeg akkuraat en dra ongeveer 5 mg monster oor in 'n 10-mol volumetriese fles, los op in ongeveer 2,5 ml metanol, verdun tot volume met mobiele fase en meng.
Instrumentele parameters:
Instrument: HPLC toegerus met inspuiter, pomp, UV-detektor en opnemer
Kolom: ChiralPak-IC (4,6 mm x 250 mm) 5 μ of ekwivalent
Vloeitempo: 1,0 ml/minuut
Golflengte: 260nm
Inspuitvolume: 10 μL
Kolom rooster temp.: 25 ℃
Looptyd: 20 minute
Prosedure
Spuit die oplossings in soos in die volgende volgorde genoem.Teken die chromatogramme op en bevestig die kriteria:
Beskrywing van inspuitings Aantal inspuitingskriteria
Blank Voorbereiding 1 Geen interfererende piek moet waargeneem word tydens die retensietyd van L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl of enantiomeer nie.
Stelsel geskiktheid voorbereiding 1 Resolusie tussen L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl en enantiomeer piek moet nie minder nie as 2,0 wees
Toetsvoorbereiding 1 Gebruik toetschromatogram om enantiomeerinhoud in die monster te bepaal.
Relatiewe retensietye:
L-4-Nitrofenylalanien Metiel Ester HCl 1.0
Enantiomeer Ongeveer 1.11
Retensietyd van L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl is ongeveer 9,8 minute.
Berekening: In die chromatogram verkry uit toetsvoorbereiding, ignoreer alle pieke wat L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl en Enantiomeer verwag.Rapporteer die enantiomeer-inhoud in die monster volgens areanormaliseringsmetode.
Chromatografiese suiwerheid en onsuiwerhede deur HPLC:
Chemiese en reagense:
Diammoniumfosfaat AR-graad
Fosforsuur AR graad
Metanol HPLC graad
Gesuiwerde water
Standaarde
L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl standaard
4-Nitro-L-Fenielalanienmonohidraatstandaard
Mobiele Fase-A
Los 6,6 g diammoniumfosfaat op in 1000 ml gesuiwerde water.Verstel die pH van hierdie oplossing na 6,0 met fosforsuur.Filter en ontgas.Voordat die pH van die oplossing gemeet word, kalibreer die pH-meter met standaard bufferoplossing pH 4.01 EN 7.00.
Mobiele Fase-B
Metanol HPLC graad
Stelsel geskiktheid Voorbereiding
Weeg akkuraat en dra ongeveer 25 mg elk van L-4-Nitrofenielalanien Methyl Ester HCl standaard en 4-Nitro-L-Fenielalanien monohydraat standaard oor in 'n 50 ml volumetriese fles, los op in en verdun tot volume met metanol en meng.
Toetsvoorbereiding:
Weeg akkuraat en dra ongeveer 25 mg monster oor in 'n 50 ml maatfles, los op in en verdun tot volume met metanol en meng.
Instrumentele parameters:
Instrument: HPLC toegerus met inspuiter, pomp, UV-detektor en opnemer
Kolom: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 μ of ekwivalent
Vloeitempo: 1,0 ml/minuut
Golflengte: 265nm
Inspuitvolume: 20 μL
Kolom rooster temp.: 25 ℃
Looptyd: 45 minute
Gradiëntprogram
Tyd (min) Mobiele Fase-A % Mobiele Fase-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Prosedure:
Spuit die oplossings in soos in die volgende volgorde genoem.Teken die chromatogramme op en bevestig die kriteria:
Blank Voorbereiding 1 Geen interfererende piek moet waargeneem word tydens die retensietyd van L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl nie.
Stelselgeskiktheidsvoorbereiding 1 Uitstertfaktor vir L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl piek moet nie minder as 2,0 wees nie
Toetsvoorbereiding 1 Gebruik toetschromatogram om chromatografiese suiwerheid en onsuiwerhede te bepaal.
Relatiewe retensietye:
L-4-Nitrofenylalanien Methyl Ester HCl 1.0 (retensietyd ongeveer 11.4 minute)
4-Nitro-L-Fenielalanien Ongeveer 0,4
Tolueen Ongeveer 2.3
Berekeninge:
In die chromatogram verkry uit toetsvoorbereiding, na blanko regstelling, ignoreer die piek as gevolg van tolueen.Rapporteer die chromatografiese suiwerheid, 4-Nitro-L-Fenielalanien inhoud en totale onsuiwerhede in die monster volgens area normalisering metode.