Метылавы эфір L-4-нітрафенілаланіну HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Аналіз >98,5% (ВЭЖХ) завод

Метад аналізу метылавага эфіру L-4-нітрафенілаланіну HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Апісанне: Змесціце каля 2 г пробы ў чыстую і сухую чашку Петры і назірайце за знешнім выглядам пробы.Справаздача: Паведаміць аб назіранні
Ідэнтыфікацыя: Параўнайце час утрымання асноўнага піка на храматаграме доследнага прэпарата з часам утрымання асноўнага піка на храматаграме прэпарата прыдатнасці сістэмы, атрыманай у храматаграфічнай чысціні з дапамогай ВЭЖХ.
Страта пры сушцы: высушыце неглыбокую бутэльку са шкляной коркам пры тэмпературы 105±2℃ на працягу 30 хвілін.Дайце яму астыць да пакаёвай тэмпературы ў эксікатары.Дакладна ўзважце вагавую бутэльку з коркам і запішыце вагу (W1).Перанясіце прыблізна ад 1 да 2 г дакладна ўзважанай колькасці доследнага рэчыва ў вагавую бутэльку.Акуратным бакавым боўтаннем размеркуйце доследны ўзор як мага больш раўнамерна на глыбіню каля 5 мм.Узважце загружаную вагавую бутэльку і запішыце вагу (W2).Змесціце загружаную бутэльку ў сушыльную печ, выдаліўшы корак і пакінуўшы яе таксама ў камеры.Высушыце тэставы ўзор пры 105±2℃ на працягу 3 гадзін.Адкрыўшы камеру, неадкладна зачыніце бутэльку і дайце ёй нагрэцца да пакаёвай тэмпературы ў эксікатары.Дакладна ўзважце вагавую бутэльку з коркам і паўторыце вагу (W3).Разлічыце працэнтныя страты пры высыханні ўзору па наступнай формуле:
Разлік Страты пры сушцы (% масы) = (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Змест энантыёмераў паводле ВЭЖХ:
Хімічныя рэчывы і рэагенты:
n-гексан маркі AR
Клас метанолу ВЭЖХ
Клас ВЭЖХ на ізапрапілавым спірце
Диэтиламин маркі AR
Стандарты: L-4-нітрафенілаланін метылавы эфір HCl стандарт;Стандарт энантыёмера HCl метылавага эфіру L-4-нітрафенілаланіну
Мабільная фаза: падрыхтуйце аднастайную сумесь н-гексана, ізапрапілавага спірту, метанолу і дыэтыламіну (65:20:15:0,1 аб/аб/аб/аб)
Прыгатаванне пустой пробы: перанясіце 2,5 мл метанолу ў мерную колбу на 10 мл, развядзіце рухомай фазай да патрэбнага аб'ёму і змяшайце.
Падрыхтоўка сістэмы да прыдатнасці:
Дакладна ўзважце і перанясіце прыкладна па 5 мг стандарту метылавага эфіру L-4-нітрафенілаланіну HCl і стандарту энантыёмера L-4-нітрафенілаланіну метылавага эфіру HCl у 10-мл мерную колбу, растварыце прыкладна ў 2,5 мл метанолу, развядзіце да аб'ёму мабільным фазы і змяшаць.
Падрыхтоўка да тэсту:
Дакладна ўзважце і перанясіце каля 5 мг пробы ў 10-мольную мерную колбу, растварыце прыкладна ў 2,5 мл метанолу, развядзіце да аб'ёму рухомай фазай і змяшайце.
Інструментальныя параметры:
Прыбор: ВЭЖХ, абсталяваны інжэктарам, помпай, УФ-дэтэктарам і рэгістратарам
Калонка: ChiralPak-IC (4,6 мм x 250 мм) 5 мкм або эквівалент
Хуткасць патоку: 1,0 мл/мін
Даўжыня хвалі: 260 нм
Аб'ём ін'екцыі: 10 мкл
Тэмпература калонкі: 25 ℃
Працягласць: 20 хвілін
Працэдура
Увядзіце растворы ў наступнай паслядоўнасці.Запішыце храматаграмы і пацвердзіце крытэрыі:
Апісанне крытэрыяў колькасці ін'екцый
Пустая падрыхтоўка 1 Не павінна назірацца піка, які б перашкаджаў, падчас утрымання L-4-нітрафенілаланіну метылавага эфіру HCl або энантыёмера.
Падрыхтоўка сістэмы да прыдатнасці 1 Раздзяленне паміж L-4-нітрафенілаланінам метылавым эфірам HCl і пікам энантыёмера павінна быць не менш за 2,0
Падрыхтоўка тэсту 1 Выкарыстоўвайце тэставую храматаграму для вызначэння ўтрымання энантыёмера ва ўзоры.
Адносны час захоўвання:
Метылавы эфір L-4-нітрафенілаланіну HCl 1,0
Энанціёмер Аб 1.11
Час утрымання метылавага эфіру L-4-нітрафенілаланіну HCl складае каля 9,8 хвілін.
Разлік: у храматаграме, атрыманай пры падрыхтоўцы тэсту, не ўлічвайце ўсе пікі, чакаючы L-4-нітрафенілаланіну метылавага эфіру HCl і энантыёмер.Паведаміце аб змесце энантыёмераў ва ўзоры метадам нармалізацыі плошчы.
Храмаграфічная чысціня і прымешкі паводле ВЭЖХ:
Хімічныя рэчывы і рэагенты:
Диамонийфосфат маркі АР
Фосфарная кіслата маркі АР
Клас метанолу ВЭЖХ
Вычышчаная вада
Стандарты
Стандарт метылавага эфіру L-4-нітрафенілаланіну HCl
Стандарт моногідрат 4-нітра-L-фенілаланіну
Мабільная фаза-А
Растворыце 6,6 г диамонийфосфата ў 1000 мл вычышчанай вады.Давядзіце рн гэтага раствора да 6,0 з дапамогай фосфарнай кіслаты.Адфільтраваць і дэгазаваць.Перад вымярэннем pH раствора адкалібруйце pH-метр стандартным буферным растворам pH 4,01 І 7,00.
Мабільная фаза-B
Клас метанолу ВЭЖХ
Падрыхтоўка сістэмы да прыдатнасці
Дакладна ўзважце і перанясіце прыкладна па 25 мг стандарту метылавага эфіру L-4-нітрафенілаланіну HCl і стандарту моногідрату 4-нітра-L-фенілаланіну ў 50-мл мерную колбу, растварыце ў ёй і развядзіце да аб'ёму метанолам і змяшайце.
Падрыхтоўка да тэсту:
Дакладна ўзважце і перанясіце каля 25 мг пробы ў 50-мл мерную колбу, растварыце і развядзіце да аб'ёму метанолам і змяшайце.
Інструментальныя параметры:
Прыбор: ВЭЖХ, абсталяваны інжэктарам, помпай, УФ-дэтэктарам і рэгістратарам
Калонка: XTerra RP-18 (4,6 мм x 150 мм) 5 мкм або эквівалент
Хуткасць патоку: 1,0 мл/мін
Даўжыня хвалі: 265 нм
Аб'ём ін'екцыі: 20 мкл
Тэмпература калонкі: 25 ℃
Працягласць: 45 хвілін
Праграму градыент
Час (мін) Мабільная фаза-A % Мабільная фаза-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Працэдура:
Увядзіце растворы ў наступнай паслядоўнасці.Запішыце храматаграмы і пацвердзіце крытэрыі:
Пустая падрыхтоўка 1 Пры часе ўтрымання метылавага эфіру L-4-нітрафенілаланіну HCl не павінна назірацца піка, які б перашкаджаў.
Падрыхтоўка сістэмы да прыдатнасці 1 Каэфіцыент абмежавання для L-4-нітрафенілаланіну метылавага эфіру HCl піка павінен быць не менш за 2,0
Падрыхтоўка тэсту 1 Выкарыстоўвайце тэставую храматаграму для вызначэння храматаграфічнай чысціні і прымешак.
Адносны час захоўвання:
Метылавы эфір L-4-нітрафенілаланіну HCl 1.0 (час утрымання каля 11.4 хвілін)
4-нітра-L-фенілаланін Каля 0,4
Талуол Каля 2,3
Разлікі:
На храматаграме, атрыманай пры падрыхтоўцы тэсту, пасля карэкцыі пустой пробы не ўлічвайце пік талуолу.Пакажыце храматаграфічную чысціню, утрыманне 4-нітра-L-фенілаланіну і агульную колькасць прымешак ва ўзоры метадам нармалізацыі плошчы.