Паклитаксел (Таксол) CAS 33069-62-4 Анализ (HPLC) 97,0~102,0%

Паклитаксел
C47H51NO14 853.91
Бензенпропанова киселина, -(бензоиламино)-хидрокси-, 6,12b-бис(ацетилокси)-12-(бензоилокси)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -додекахидро-4,11-дихидрокси-4а,8,13,13-тетраметил-5-оксо-7,11-метано-1Н-циклодека[3,4]бенз[1,2-Ь]оксет-9-ил естер, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-додекахидро-4,6, 9,11,12,12b-хексахидрокси-4а,8,13,13-тетраметил-7,11-метано-5Н-циклодека[3,4]-бенз[1,2-b]оксет-5-он 6, 12b-диацетат, 12-бензоат, 9-естер с (2R,3S)-N-бензоил-3-фенилизосерин [33069-62-4].
Паклитаксел съдържа не по-малко от 97,0 процента и не повече от 102,0 процента C47H51NO14, изчислено на безводна основа без разтворители.
[Внимание - Паклитаксел е цитотоксичен.Трябва много да се внимава, за да се предотврати вдишването на частици паклитаксел и излагането на кожата на него.]
Опаковка и съхранение - Съхранявайте в плътни, светлоустойчиви контейнери и съхранявайте при контролирана стайна температура.
Етикетиране - Етикетирането показва вида на процеса, използван за производството на материала, и теста за свързани съединения, на който материалът отговаря.
USP Референтни стандарти <11>-
USP Ендотоксин RS
USP Paclitaxel RS Щракнете, за да видите структурата
USP Свързано с паклитаксел съединение A RS
Цефаломанин.
USP Свързано с паклитаксел съединение B RS
10-деацетил-7-епипаклитаксел.
USP паклитаксел смес от примеси RS
Смес от паклитаксел и следните сродни съединения: пропилов аналог, цефаломанин, сек-бутилов аналог, n-бутилов аналог, бензилов аналог, бакатин VI, пентилов аналог и 7-епипаклитаксел.
Идентификация-
A: Инфрачервена абсорбция <197K>.
B: Времето на задържане на основния пик в хроматограмата на препарата за анализ съответства на това в хроматограмата на стандартния препарат, както е получено в анализа.
Специфично въртене 781S: между 49,0 и 55,0 при 20, изчислено на безводна база без разтворители.
Тестови разтвор: 10 mg на mL, в метанол.
Тестове за микробно изброяване <61> и Тестове за определени микроорганизми <62>-Общият аеробен микробен брой не надвишава 100 cfu на g.Отговаря на изискванията на тестовете за отсъствие на Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella species и Escherichia coli.
Бактериални ендотоксини 85 - Съдържа не повече от 0,4 USP ендотоксинова единица на mg паклитаксел.
Вода, метод Ic <921>: не повече от 4,0%.
Остатък при накаляване <281>: не повече от 0,2%.
Тежки метали, Метод II <231>: 0,002%.
Свързани съединения-
тест 1 (за материал, етикетиран като изолиран от естествени източници)-Ако материалът отговаря на този тест, етикетирането показва, че отговаря на USP свързани съединения Тест 1.
Разредител - Пригответе, както е указано в анализа.
Разтвор A-Пригответе филтриран и дегазиран ацетонитрил.
Разтвор B-Пригответе филтрирана и дегазирана вода.
Подвижна фаза - Използвайте променливи смеси от разтвор А и разтвор Б, както е указано за хроматографска система.Направете корекции, ако е необходимо (вижте Пригодност на системата под Хроматография 621).
Разтвор за пригодност на системата – Разтворете точно претеглени количества от USP паклитаксел, свързано съединение A RS и USP паклитаксел, свързано съединение B RS в метанол, за да получите разтвор с известни концентрации от около 10 µg от всяко на mL.Прехвърлете 5,0 mL от този разтвор в мерителна колба от 50 mL, разредете с разредител до обем и разбъркайте.
Стандартен разтвор – Разтворете, с помощта на ултразвук, точно претеглено количество USP Paclitaxel RS в разредител и разредете количествено и поетапно, ако е необходимо, с разредител, за да получите разтвор с известна концентрация от около 5 µg на mL.
Тестови разтвор - Използвайте препарата за анализ.
Хроматографска система (вижте хроматография <621>) - Течният хроматограф е оборудван с 227-nm детектор и колона 4,6 mm × 25 cm, която съдържа 5-µm набивка L43.Скоростта на потока е около 2,6 ml на минута.Температурата на колоната се поддържа при 30°С. Хроматографът се програмира както следва.
Време (минути) Разтвор А (%) Разтвор Б (%) Елуиране
0–35 35 65 изократичен
35–60 35®80 65®20 линеен градиент
60–70 80®35 20®65 линеен градиент
70–80 35 65 isocraticChromatograph на разтвора за пригодност на системата и запишете пиковите отговори, както е указано за процедурата: относителните времена на задържане са около 0,78 за свързаното с паклитаксел съединение А и 0,86 за свързаното с паклитаксел съединение В (спрямо времето на задържане за паклитаксел, получено от тестовото решение);и разделителната способност, R, между свързаното с паклитаксел съединение А и свързаното с паклитаксел съединение В е не по-малко от 1.0.Хроматографирайте стандартния разтвор и запишете пиковите отговори, както е указано за процедурата: относителното стандартно отклонение за повторни инжекции е не повече от 2,0%.
Процедура-Инжектирайте обем (около 15 µL) от тестовия разтвор в хроматографа, запишете хроматограмата и измерете площите за основните пикове.Изчислете процента на всеки примес в порцията паклитаксел, взета по формулата:
100 (пет / rU)
в която F е относителният коефициент на реакция за всеки пик на примес (виж таблица 1 за стойности);ri е площта на пика за всеки отделен примес;и rU е площта на пика за паклитаксел.
маса 1
Относително време на задържане Относителен фактор на отговор (F) Име Ограничение (%)
0,24 1,29 Бакатин III 0,2
0,53 1,00 10-деацетилпаклитаксел 0,5
0,57 1,00 7-ксилозилпаклитаксел 0,2
0,78 1,26 Цефаломанин (съединение А, свързано с паклитаксел) a11
0,78 1,26 2'',3''-дихидроцефаломанин a21
0,86 1,00 10-деацетил-7-епипаклитаксел (съединение В, свързано с паклитаксел) 0,5
1,10 1,00 Бензилов аналог3 b12
1,10 1,00 3'',4''-дехидропаклитаксел C b22
1,40 1,00 7-епицефаломанин 0,3
1,85 1,00 7-епипаклитаксел 0,5
1 Резолюцията може да е непълна за тези пикове, в зависимост от наличните относителни количества;сумата от a1 и a2 е не повече от 0,5%.
2 Резолюцията може да е непълна за тези пикове, в зависимост от наличните относителни количества;сумата от b1 и b2 е не повече от 0,5%.
3 Следното химично наименование е дадено на свързаното съединение, бензилов аналог: Бакатин III 13-естер с (2R,3S)-2-хидрокси-3-фенил-3-(2-фенилацетиламино)пропанова киселина.
В допълнение към непревишаването на границите за примеси, свързани с паклитаксел в Таблица 1, не се откриват повече от 0,1% от всеки друг единичен примес;и се установяват не повече от 2,0% от общите примеси.
тест 2 (за материал, етикетиран като произведен чрез полусинтетичен процес)— Ако материалът отговаря на този тест, етикетирането показва, че отговаря на тест 2 на свързаните с USP съединения.
Разредител - Използвайте ацетонитрил.
Разтвор A-Използвайте филтрирана и дегазирана смес от вода и ацетонитрил (3:2).
Разтвор B-Използвайте филтриран и дегазиран ацетонитрил.
Подвижна фаза - Използвайте променливи смеси от разтвор А и разтвор Б, както е указано за хроматографска система.Направете корекции, ако е необходимо (вижте Пригодност на системата под Хроматография 621).
Разтвор за пригодност на системата – Разтворете точно претеглени количества от USP Paclitaxel RS и USP Paclitaxel Related Compound B RS в разредител, като разклатите и обработите с ултразвук, ако е необходимо, за да получите разтвор с известни концентрации съответно от около 0,96 mg и 0,008 mg на ml.
Тестови разтвор - Прехвърлете около 10 mg паклитаксел, претеглен точно, в 10-mL мерителна колба, разтворете в нея и разредете с разредител до обем, разклатете и обработете с ултразвук, ако е необходимо, и разбъркайте.
Хроматографска система (вижте Хроматография 621)— Течният хроматограф е оборудван с 227-nm детектор и колона 4,6 mm × 15 cm, която съдържа 3-µm набивка L1.Скоростта на потока е около 1,2 ml на минута.Температурата на колоната се поддържа при 35°С. Хроматографът се програмира както следва.
Време (минути) Разтвор А (%) Разтвор Б (%) Елуиране
0-20 100 0 изократичен
20-60 100®10 0®90 линеен градиент
60-62 10®100 90®0 линеен градиент
62-70 100 0 isocraticChromatograph на разтвора за пригодност на системата и запишете пиковите отговори, както е указано за процедурата: относителните времена на задържане са около 0,94 за свързано с паклитаксел съединение В и 1,0 за паклитаксел;разделителната способност, R, между свързаното с паклитаксел съединение В и паклитаксел е не по-малко от 1.2;и относителното стандартно отклонение за повторни инжекции е не повече от 2,0%.
Процедура – ​​Отделно инжектирайте равни обеми (около 15 µL) от разредителя и тестовия разтвор в хроматографа, запишете хроматограмите и измерете площите за всички пикове.Пренебрегвайте всякакви пикове, дължащи се на разредителя.Изчислете процента на всеки примес в порцията паклитаксел, взета по формулата:
100 (пет / rs)
в която F е относителният коефициент на реакция за всеки примес (виж таблица 2 за стойности);ri е площта на пика за всеки примес, получен от тестовия разтвор;и rs е сумата от площите на всички пикове, получени от тестовия разтвор.
Таблица 2
Относително време на задържане Относителен фактор на отговор (F) Име Ограничение (%)
0,11 1,24 10-деацетилбакатин III 0,1
0,20 1,29 Бакатин III 0,2
0,42 1,39 Фотодеградант2 0,1
0,47 1,00 10-деацетилпаклитаксел 0,5
0,80 1,00 2-дебензоилпаклитаксел-2-пентеноат 0,7
0,921 1,00 Оксетановият пръстен е отворен, ацетил и бензоил мигрират 2 x1
0,921 1,00 10-ацетоацетилпаклитаксел x2
0,941 1,00 10-деацетил-7-епипаклитаксел (съединение B, свързано с паклитаксел) x3
1,37 1,00 7-епипаклитаксел 0,4
1,45 1,00 10,13-бисайдверигапаклитаксел2 0,5
1,54 1,00 7-ацетилпаклитаксел 0,6
1,80 1,75 13-тес-бакатин III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-паклитаксел 0,3
1 Резолюцията може да е непълна за тези пикове, в зависимост от наличните относителни количества;сумата от x1, x2 и x3 е не повече от 0,4%.
2 Следните химични имена са присвоени на свързаните съединения Фоторазграждащ се;Оксетановият пръстен се отваря, ацетил и бензоил мигрират;и 10,13-бисайдверига паклитаксел:
Фотодеградант
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-диацетилокси-5,13-дихидрокси-4,16,17,17-тетраметил-8-окса- 3-оксо-12-фенилкарбонилоксипентацикло[11.3.1.01,11.04,11.07,10]хептадек-15-ил
(2R,3S)-2-хидрокси-3-фенил-3-(фенилкарбониламино)пропаноат
Оксетановият пръстен се отваря, ацетилът и бензоилът мигрират
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-диацетилокси-1,2,4,7-тетрахидрокси-8,12,15,15-тетраметил-9-оксо- 4-(фенилкарбонилоксиметил)трицикло[9.3.1.03,8]пентадек-11-ен-13-ил
(2R,3S)-2-хидрокси-3-фенил-3-(фенилкарбониламино)пропаноат
10,13-бисайдверига паклитаксел
Бакатин III 13-естер с (2R,3S)-2-хидрокси-3-фенил-3-(фенилкарбониламино)пропанова киселина, 10-естер с (2S,3S)-2-хидрокси-3-фенил-3-(фенилкарбониламино) )пропанова киселина
В допълнение към непревишаването на границите за примеси, свързани с паклитаксел в Таблица 2, не се откриват повече от 0,1% от всеки друг единичен примес;и се установяват не повече от 2,0% от общите примеси.
тест 3 (за материал, етикетиран като произведен чрез процес на ферментация на растителни клетки)— Ако материалът отговаря на този тест, етикетирането показва, че отговаря на тест 3 за свързаните с USP съединения.
Разтвор A-Пригответе филтрирана и дегазирана смес от вода и ацетонитрил (3:2).
Разтвор B-Пригответе филтриран и дегазиран ацетонитрил.
Подвижна фаза - Използвайте променливи смеси от разтвор А и разтвор Б, както е указано за хроматографска система.Направете корекции, ако е необходимо (вижте Пригодност на системата под Хроматография 621).
Разтвор за пригодност на системата - Разтворете USP Paclitaxel Purity Mixture RS в ацетонитрил, обработвайки с ултразвук, ако е необходимо, за да получите разтвор с известна концентрация от около 1 mg на mL.
Стандартен разтвор – Разтворете точно претеглено количество USP Paclitaxel RS в ацетонитрил, обработвайки с ултразвук, ако е необходимо, за да получите разтвор с известна концентрация от около 1 mg на mL.
Разтвор за изпитване - Прехвърлете около 10 mg паклитаксел, претеглен точно, в мерителна колба от 10 ml.Разтваря се и се разрежда с ацетонитрил до обем, като се обработва с ултразвук, ако е необходимо, и се разбърква.
Хроматографска система (вижте Хроматография 621)— Течният хроматограф е оборудван с 227-nm детектор и колона 4,6 mm × 15 cm, която съдържа 3-µm набивка L1.Скоростта на потока е около 1,2 ml на минута.Хроматографът се програмира по следния начин.
Време (минути) Разтвор А (%) Разтвор Б (%) Елуиране
0-28 100 0 изократичен
28-33 100®98 0®2 линеен градиент
33–58 98®10 2®90 линеен градиент
58-60 10 90 изократичен
60-63 10®100 90®0 линеен градиент
63-70 100 0 изократична хроматография на разтвора за пригодност на системата и запишете пиковите отговори, както е указано за процедурата: разделителната способност, R, между паклитаксел и бензилов аналог е не по-малка от 1,8.Хроматографирайте стандартния разтвор и запишете пиковите отговори, както е указано за процедурата: относителното стандартно отклонение за повторни инжекции е не повече от 2,0%.[забележка—За целите на идентифициране на пика, приблизителните относителни времена на задържане са дадени в Таблица 3. Относителните времена на задържане се измерват спрямо паклитаксел.]
Таблица 3
Име Относителен срок на задържане (%)
Пропилов аналог1 0,54 0,2
Цефаломанин (съединение А, свързано с паклитаксел) 0,76 0,5
сек-Бутилов аналог2 0,81 0,2
n-Бутилов аналог3 0,89 0,1
Бензилов аналог 1,10 0,4
Бакатин VI 1,23 0,2
Пентилов аналог4 1,31 0,2
7-епипаклитаксел 1,51 0,4
1 Следното химично наименование е дадено на свързаното съединение Пропилов аналог: Бакатин III 13-естер с (2R,3S)-3-бутаноиламино-2-хидрокси-3-фенилпропанова киселина.
2 Следното химическо наименование е дадено на сродното съединение sec-Butyl аналог: Бакатин III 13-естер с (2R,3S)-2-хидрокси-3-(2-метилбутаноиламино)-3-фенилпропанова киселина.
3 Следното химично наименование е дадено на сродния n-бутилов аналог на съединението: Бакатин III 13-естер с (2S,3S)-2-хидрокси-3-(пентаноиламино)-3-фенилпропанова киселина.
4 Следното химическо наименование е присвоено на сродното съединение Пентилов аналог: Бакатин III 13-естер с (2R,3S)-3-(хексаноиламино)-2-хидрокси-3-фенилпропанова киселина.
Процедура – ​​Инжектирайте обем (около 12 µL) от тестовия разтвор в хроматографа, запишете хроматограмата и измерете площите за всички пикове.Изчислете процента на всеки примес в порцията паклитаксел, взета по формулата:
100 (ri / rU)
в която ri е реакцията на всеки отделен примес;и rU е сумата от площите на всички пикове, получени от тестовия разтвор.В допълнение към непревишаването на границите за примеси, свързани с паклитаксел в таблица 3, не се откриват повече от 0,1% от всеки друг единичен примес;и се установяват не повече от 2,0% от общите примеси.
анализ-
Разредител - Пригответе смес от метанол и оцетна киселина (200:1).
Подвижна фаза - Пригответе филтрирана и дегазирана смес от вода и ацетонитрил (11:9).Направете корекции, ако е необходимо (вижте Пригодност на системата под Хроматография 621).
Стандартна подготовка – Разтворете, като използвате ултразвук, ако е необходимо, точно претеглено количество от USP Paclitaxel RS в разредител и разредете количествено и поетапно, ако е необходимо, с разредител, за да получите разтвор с известна концентрация от около 1 mg на mL.
Подготовка на анализа - Прехвърлете около 10 mg паклитаксел, претеглен точно, в мерителна колба от 10 ml.Разтворете в разредител, като използвате ултразвук, ако е необходимо, разредете с разредител до обем и разбъркайте.
Хроматографска система (вижте хроматография <621>) - Течният хроматограф е оборудван с 227-nm детектор и колона 4,6 mm × 25 cm, която съдържа 5-µm набивка L43.Скоростта на потока е около 1,5 ml на минута.Хроматографирайте стандартния препарат и запишете пиковите отговори, както е указано за процедурата: коефициентът на изоставане е между 0,7 и 1,3;и относителното стандартно отклонение за повторни инжекции е не повече от 1,5%.
Процедура – ​​Отделно инжектирайте равни обеми (около 10 µL) от стандартния препарат и препарата за анализ в хроматографа, запишете хроматограмите и измерете площите за основните пикове.Изчислете количеството, в mg, на C47H51NO14 в порцията паклитаксел, взета по формулата:
10C(rU / rS)
в която C е концентрацията, в mg на mL, на USP паклитаксел RS в стандартния препарат;и rU и rS са пиковите отговори за паклитаксел, получени съответно от препарата за анализ и стандартния препарат.