Урсодезоксихолева киселина (UDCA) CAS 128-13-2 Анализ 99,0~101,0%

УРСОДЕКСИХОЛОВА КИСЕЛИНА
C24H40O4 Mr 392.6[128-13-2]
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
3α,7β-дихидрокси-5β-холан-24-оева киселина.
Съдържание: 99,0% до 101,0% (сухо вещество).
ПЕРСОНАЖИ
Външен вид: бял или почти бял прах.
Разтворимост: практически неразтворим във вода, свободно разтворим в етанол (96 процента), слабо разтворим в ацетон, практически неразтворим в метиленхлорид.
т.т.: около 202 ℃.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Първа идентификация: А.
Втора идентификация: B, C.
A. Инфрачервена абсорбционна спектрофотометрия (2.2.24).
Сравнение: Ursodeoxycholic Acid CRS.
B. Разгледайте хроматограмите, получени при теста за примес C.
Резултати: основното петно ​​в хроматограмата, получена с тестовия разтвор (b), е подобно по позиция, цвят и размер на основното петно ​​в хроматограмата, получена с референтния разтвор (a).
В. Разтворете около 10 mg в 1 ml сярна киселина R. Добавете 0,1 ml разтвор на формалдехид R и оставете да престои 5 min.Добавят се 5 ml вода R. Получената суспензия е зеленикаво-синя.
ТЕСТОВЕ
Специфично оптично въртене (2.2.7): + 58,0 до + 62,0 (сухо вещество).
Разтварят се 0,500 g в безводен етанол R и се разреждат до 25,0 ml със същия разтворител.
Примес C. Тънкослойна хроматография (2.2.27).
Смес от разтворители: вода R, ацетон R (10:90 V/V).
Тестово решение (а).Разтварят се 0,40 g от изследваното вещество в сместа от разтворители и се разреждат до 10 mL със сместа от разтворители.
Тестово решение (b).Разредете 1 mL от тестовия разтвор (а) до 10 mL със сместа от разтворители.
Еталонен разтвор (а).Разтворете 40 mg урсодезоксихолева киселина CRS в сместа от разтворители и разредете до 10 mL със сместа от разтворители.
Еталонен разтвор (b).Разтворете 20 mg литохолева киселина CRS (примес C) в сместа от разтворители и разредете до 10,0 mL със сместа от разтворители (разтвор A).Разредете 2,0 mL от този разтвор до 100,0 mL със сместа от разтворители.
Еталонен разтвор (c).Към 5 mL от разтвор А се добавят 10 mg хенодезоксихолева киселина CRS (примес А) и се разрежда до 50 mL със сместа от разтворители.
Плоча: TLC силикагелна плоча R.
Подвижна фаза: ледена оцетна киселина Р, ацетон Р, метиленхлорид R (1:30:60 V/V/V).
Приложение: 5μL.
Развитие: над 2/3 от плочата.
Съхнене: при 120℃ за 10 минути.
Откриване: напръскайте незабавно с 47,6 g/L разтвор на фосфомолибденова киселина R в смес от 1 обем сярна киселина R и 20 обема ледена оцетна киселина R и загрейте при 120 ℃, докато се появят сини петна на по-светъл фон.
Пригодност на системата: референтен разтвор (c):
- хроматограмата показва 2 ясно разделени главни петна.
Граница: тестов разтвор (a):
-примес C: всяко петно, дължащо се на примес C, не е по-интензивно от основното петно ​​в хроматограмата, получена с референтния разтвор (b) (0,1 %).
Сродни вещества.Течна хроматография (2.2.29).
Смес от разтворители: метанол R, подвижна фаза (10:90 V/V).
Тестово решение.Разтворете 60 mg от изследваното вещество в сместа от разтворители и разредете до 20,0 mL със сместа от разтворители.
Еталонен разтвор (а).Разтворете съдържанието на флакон с урсодезоксихолева киселина за пригодност на системата CRS (съдържащ примеси A и H) в 1,0 mL от сместа от разтворители.
Еталонен разтвор (b).Разредете 1,0 mL от тестовия разтвор до 100,0 mL със сместа от разтворители.Разредете 1,0 mL от този разтвор до 10,0 mL със сместа от разтворители.
Колона:
-размер: l = 0.25 m, Ø = 4.6 mm;
-стационарна фаза: крайно ограничен октадецилсилил силикагел захроматография R (5 μm);
- температура: 40℃ ± 1℃.
Подвижна фаза: смесват се 30 обема ацетонитрил R, 37 обема 0,78 g/L разтвор на натриев дихидроген фосфат R, регулиран до pH 3 с фосфорна киселина R, и 40 обема метанол R.
Скорост на потока: 0.8 mL/min.
Откриване: рефрактометър при 35 ± 1 ℃.
Инжекция: 150 μL.
Време на работа: 4 пъти времето на задържане на урсодезоксихолевата киселина.
Идентифициране на примеси: използвайте хроматограмата, доставена с урсодезоксихолевата киселина, за пригодността на системата CRS и хроматограмата, получена с референтен разтвор (a), за да идентифицирате пиковете, дължащи се на примеси А и Н.
Относително задържане по отношение на урсодезоксихолева киселина (време на задържане = около 14 минути): примес Н = около 0.9;примес А = около 2,8.
Пригодност на системата: референтен разтвор (a):
-разделителна способност: минимум 1,5 между пиковете поради примес H и урсодезоксихолева киселина.
Ограничения:
- примес А: не повече от 10 пъти площта на основния пик в хроматограмата, получена с референтен разтвор (b) (1,0 процента);
-неуточнени примеси: за всеки примес не повече от площта на основния пик в хроматограмата, получена с референтен разтвор (b) (0,10 %);
- общо: не повече от 15 пъти площта на основния пик в хроматограмата, получена с референтния разтвор (b) (1,5 процента);
- граница на пренебрегване: 0,5 пъти площта на основния пик в хроматограмата, получена с референтния разтвор (b) (0,05 процента).
Тежки метали (2.4.8): максимум 20 ppm.
1,0 g отговаря на тест C. Пригответе референтния разтвор, като използвате 2 mL стандартен разтвор на олово (10 ppm Pb) R.
Загуба при сушене (2.2.32): максимум 1,0 %, определена на 1 000 g чрез сушене в пещ при 105 ℃.
Сулфатна пепел (2.4.14): максимум 0,1 процента, определена на 1,0 g.
АНАЛИЗ
Разтварят се 0,350 g в 50 ml етанол (96 процента) R, предварително неутрализиран до 0,2 ml разтвор на фенолфталеин R. Добавят се 50 ml вода R и се титрува с 0,1 M натриев хидроксид до получаване на розов цвят.
1 ml 0,1 M натриев хидроксид е еквивалентен на 39,26 mg C24H40O4.
ПРИМЕСИ
Специфицирани примеси: A, C.
Други откриваеми примеси (следните вещества, ако присъстват в достатъчно ниво, биха били открити чрез един или друг от тестовете в монографията. Те са ограничени от общия критерий за приемливост за други/неуточнени примеси и/или от общата монография Вещества за фармацевтична употреба (2034). Следователно не е необходимо да се идентифицират тези примеси за доказване на съответствие. Вижте също 5.10.
Контрол на примеси във вещества за фармацевтична употреба): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-дихидрокси-5β-холан-24-оева киселина (хенодезоксихолова киселина),
B. 3α,7α,12α-трихидрокси-5β-холан-24-оева киселина (холева киселина),
В. 3α-хидрокси-5β-холан-24-оева киселина (литохолева киселина),
D. 3α,7β,12α-трихидрокси-5β-холан-24-оева киселина (урсохолева киселина),
E. 3α,12α-дихидрокси-5β-холан-24-оева киселина (дезоксихолова киселина),
F. 3α-хидрокси-7-оксо-5β-холан-24-оева киселина,
G. метил 3α,7β-дихидрокси-5β-холан-24-оат,
H. 3β,7β-дихидрокси-5β-холан-24-оева киселина,
I. 5β-холан-3α,7β,24-триол.