Ursodeoksiholna kiselina (UDCA) CAS 128-13-2 Test 99,0~101,0%

URSODEOKSIHOLNA KISELINA
C24H40O4 Mr 392.6[128-13-2]
DEFINICIJA
3α,7β-Dihidroksi-5β-holan-24-oična kiselina.
Sadržaj: 99,0% do 101,0% (sušena supstanca).
LIKOVI
Izgled: bijeli ili gotovo bijeli prah.
Rastvorljivost: praktično nerastvorljiv u vodi, slobodno rastvorljiv u etanolu (96%), slabo rastvorljiv u acetonu, praktično nerastvorljiv u metilen hloridu.
mp: oko 202℃.
IDENTIFIKACIJA
Prva identifikacija: A.
Druga identifikacija: B, C.
A. Infracrvena apsorpciona spektrofotometrija (2.2.24).
Poređenje: Ursodeoksiholna kiselina CRS.
B. Ispitati hromatograme dobijene u testu na nečistoću C.
Rezultati: glavna tačka na hromatogramu dobijenom test rastvorom (b) slična je po položaju, boji i veličini glavnoj tački na hromatogramu dobijenom sa referentnom otopinom (a).
C. Rastvoriti oko 10 mg u 1 mL sumporne kiseline R. Dodati 0,1 mL rastvora formaldehida R i ostaviti da odstoji 5 min.Dodati 5 mL vode R. Dobijena suspenzija je zelenkastoplava.
TESTOVI
Specifična optička rotacija (2.2.7): + 58,0 do + 62,0 (osušena supstanca).
Rastvorite 0,500 g u bezvodnom etanolu R i razblažite do 25,0 mL sa istim rastvaračem.
Nečistoća C. Tankoslojna kromatografija (2.2.27).
Mešavina rastvarača: voda R, aceton R (10:90 V/V).
Test rješenje (a).Rastvoriti 0,40 g supstance koja se ispituje u mešavini rastvarača i razblažiti na 10 mL sa mešavinom rastvarača.
Test rješenje (b).Razblažite 1 mL test rastvora (a) do 10 mL sa mešavinom rastvarača.
Referentno rješenje (a).Rastvorite 40 mg ursodeoksiholne kiseline CRS u smjesi rastvarača i razrijedite do 10 mL mješavinom rastvarača.
Referentno rješenje (b).Rastvorite 20 mg litoholne kiseline CRS (nečistoća C) u smeši rastvarača i razblažite do 10,0 mL sa mešavinom rastvarača (rastvor A).Razblažite 2,0 mL ovog rastvora do 100,0 mL sa mešavinom rastvarača.
Referentno rješenje (c).U 5 mL rastvora A dodati 10 mg kenodeoksiholne kiseline CRS (nečistoća A) i razblažiti do 50 mL smešom rastvarača.
Ploča: TLC silika gel ploča R.
Mobilna faza: glacijalna sirćetna kiselina R, aceton R, metilenhlorid R (1:30:60 V/V/V).
Primjena: 5μL.
Razvijenost: preko 2/3 ploče.
Sušenje: na 120℃ 10 min.
Detekcija: odmah poprskati sa 47,6 g/L rastvora fosfomolibdinske kiseline R u mešavini 1 zapremine sumporne kiseline R i 20 zapremina glacijalne sirćetne kiseline R i zagrejati na 120℃ dok se ne pojave plave mrlje na svetlijoj pozadini.
Pogodnost sistema: referentno rješenje (c):
- hromatogram pokazuje 2 jasno odvojene glavne tačke.
Granica: test rješenje (a):
-nečistoća C: nijedna tačka zbog nečistoće C nije intenzivnija od glavne tačke na hromatogramu dobijenom sa referentnim rastvorom (b) (0,1%).
Srodne supstance.Tečna hromatografija (2.2.29).
Mešavina rastvarača: metanol R, mobilna faza (10:90 V/V).
Test rješenje.Rastvorite 60 mg supstance koja se ispituje u mešavini rastvarača i razblažite na 20,0 mL sa mešavinom rastvarača.
Referentno rješenje (a).Rastvoriti sadržaj bočice ursodeoksiholne kiseline za sistemsku prikladnost CRS (koji sadrži nečistoće A i H) u 1,0 mL mešavine rastvarača.
Referentno rješenje (b).Razblažite 1,0 mL test rastvora na 100,0 mL sa mešavinom rastvarača.Razblažite 1,0 mL ovog rastvora do 10,0 mL sa mešavinom rastvarača.
Kolona:
-veličina: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stacionarna faza: oktadecilsilil silika gel sa završnim poklopcem zahromatografija R (5 μm);
- temperatura: 40℃ ± 1℃.
Mobilna faza: pomiješati 30 zapremina acetonitrila R, 37 zapremina 0,78 g/L rastvora natrijum dihidrogen fosfata R podešenog na pH 3 sa fosfornom kiselinom R i 40 zapremina metanola R.
Brzina protoka: 0,8 mL/min.
Detekcija: refraktometar na 35 ± 1℃.
Injekcija: 150 μL.
Vrijeme trajanja: 4 puta duže vrijeme zadržavanja ursodeoksiholne kiseline.
Identifikacija nečistoća: koristite hromatogram isporučen s ursodeoksiholnom kiselinom za CRS prikladnost sistema i hromatogram dobijen s referentnom otopinom (a) za identifikaciju pikova zbog nečistoća A i H.
Relativno zadržavanje u odnosu na ursodeoksiholnu kiselinu (vrijeme zadržavanja = oko 14 min): nečistoća H = oko 0,9;nečistoća A = oko 2,8.
Pogodnost sistema: referentno rješenje (a):
-rezolucija: minimalno 1,5 između vrhova zbog nečistoće H i ursodeoksiholne kiseline.
Ograničenja:
- nečistoća A: ne više od 10 puta veća od površine glavnog pika na hromatogramu dobijenom referentnom otopinom (b) (1,0 posto);
-nespecificirane nečistoće: za svaku nečistoću, ne više od površine glavnog pika na hromatogramu dobijenom referentnom otopinom (b) (0,10 posto);
- ukupno: ne više od 15 puta veće površine glavnog pika na hromatogramu dobijenom sa referentnom otopinom (b) (1,5 posto);
- granica zanemarivanja: 0,5 puta veća od površine glavnog pika na hromatogramu dobijenom sa referentnom otopinom (b) (0,05 posto).
Teški metali (2.4.8): maksimalno 20 ppm.
1,0 g odgovara testu C. Pripremite referentni rastvor koristeći 2 mL standardnog rastvora olova (10 ppm Pb) R.
Gubitak pri sušenju (2.2.32): maksimalno 1,0 posto, određen na 1.000 g sušenjem u pećnici na 105 ℃.
Sulfatni pepeo (2.4.14): najviše 0,1 posto, određeno na 1,0 g.
ANALIZA
Rastvoriti 0,350 g u 50 mL etanola (96 posto) R, prethodno neutraliziranog u 0,2 mL otopine fenolftaleina R. Dodati 50 mL vode R i titrirati sa 0,1 M natrijum hidroksida dok se ne dobije ružičasta boja.
1 mL 0,1 M natrijum hidroksida je ekvivalentan 39,26 mg C24H40O4.
IMPURITIES
Specificirane nečistoće: A, C.
Druge detektivne nečistoće (sljedeće supstance bi, ako su prisutne na dovoljnom nivou, bile otkrivene jednim ili drugim testovima u monografiji. One su ograničene općim kriterijem prihvatljivosti za druge/nespecificirane nečistoće i/ili općom monografijom Supstance za farmaceutsku upotrebu (2034). Stoga nije potrebno identificirati ove nečistoće radi demonstracije usklađenosti. Vidi također 5.10.
Kontrola nečistoća u supstancama za farmaceutsku upotrebu): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihidroksi-5β-holan-24-oična kiselina (henodeoksiholna kiselina),
B. 3α,7α,12α-trihidroksi-5β-holan-24-oična kiselina (holna kiselina),
C. 3α-hidroksi-5β-holan-24-oična kiselina (litoholna kiselina),
D. 3α,7β,12α-trihidroksi-5β-holan-24-oična kiselina (ursoholna kiselina),
E. 3α,12α-dihidroksi-5β-holan-24-oična kiselina (deoksiholna kiselina),
F. 3α-hidroksi-7-okso-5β-holan-24-oična kiselina,
G. metil 3α,7β-dihidroksi-5β-holan-24-ovs,
H. 3β,7β-dihidroksi-5β-holan-24-oinska kiselina,
I. 5β-holan-3α,7β,24-triol.