Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 Assaig (HPLC) 97,0~102,0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
Àcid benzèpropanoic, -(benzoilamino)--hidroxi-, 6,12b-bis(acetiloxi)-12-(benzoiloxi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahidro-4,11-dihidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-5-oxo-7,11-metano-1H-ciclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-il èster, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahydro-4,6, 9,11,12,12b-hexahidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-ona 6, 12b-diacetat, 12-benzoat, 9-èster amb (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilioserina [33069-62-4].
Paclitaxel conté no menys del 97,0 per cent i no més del 102,0 per cent de C47H51NO14, calculat sobre una base anhidra i sense dissolvents.
[Atenció: el paclitaxel és citotòxic.S'ha de tenir molta cura per evitar la inhalació de partícules de Paclitaxel i exposar-hi la pell.]
Embalatge i emmagatzematge: conservar en contenidors estancs i resistents a la llum i emmagatzemar a temperatura ambient controlada.
Etiquetatge: l'etiquetatge indica el tipus de procés utilitzat per produir el material i la prova de compostos relacionats amb què compleix el material.
Estàndards de referència USP <11>-
USP Endotoxina RS
USP Paclitaxel RS Feu clic per veure l'estructura
Compost A Relacionat amb Paclitaxel USP RS
Cefalomanina.
Compost B relacionat amb paclitaxel USP RS
10-Deacetil-7-Epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Mescla d'impureses RS
Mescla de paclitaxel i els següents compostos relacionats: anàleg de propil, cefalomanina, anàleg de sec-butil, anàleg de n-butil, anàleg de benzil, baccatina VI, anàleg de pentil i 7-epipaclitaxel.
identificació-
A: Absorció d'infrarojos <197K>.
B: El temps de retenció del pic principal en el cromatograma de la preparació d'assaig correspon al del cromatograma de la preparació estàndard, tal com s'obté en l'assaig.
Rotació específica 781S: entre 49,0 i 55,0 a 20, calculat sobre la base anhidra, sense dissolvents.
Solució de prova: 10 mg per ml, en metanol.
Proves d'enumeració microbiana <61> i Proves per a microorganismes especificats <62>-El recompte total de microbis aeròbics no supera els 100 ufc per g.Compleix els requisits de les proves d'absència de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, espècies de Salmonella i Escherichia coli.
Endotoxines bacterianes 85-No conté més de 0,4 unitats d'endotoxina USP per mg de paclitaxel.
Aigua, Mètode Ic <921>: no més del 4,0%.
Residus de la ignició <281>: no més del 0,2%.
Metalls pesants, Mètode II <231>: 0,002%.
Compostos relacionats-
prova 1 (per a material etiquetat com aïllat de fonts naturals): si el material compleix amb aquesta prova, l'etiquetatge indica que compleix la prova 1 de compostos relacionats amb la USP.
Diluent-Prepareu tal com s'indica a l'assaig.
Solució A-Prepareu acetonitril filtrat i desgasificat.
Solució B-Preparar aigua filtrada i desgasificada.
Fase mòbil: utilitzeu mescles variables de la solució A i la solució B tal com s'indica per al sistema cromatogràfic.Feu ajustos si cal (vegeu Idoneïtat del sistema a Cromatografia 621).
Solució d'adequació del sistema: dissol quantitats pesades amb precisió de compost A RS relacionat amb paclitaxel USP i compost B relacionat amb paclitaxel USP RS en metanol per obtenir una solució amb concentracions conegudes d'uns 10 µg de cadascun per ml.Transferiu 5,0 ml d'aquesta solució a un matràs aforat de 50 ml, diluïu-lo amb Diluent a volum i barregeu-lo.
Solució estàndard: dissol, amb l'ajut de la sonicació, una quantitat pesada amb precisió de Paclitaxel RS USP en diluent, i diluïu quantitativament, i pas a pas si cal, amb diluent per obtenir una solució amb una concentració coneguda d'uns 5 µg per ml.
Solució de prova: utilitzeu la preparació d'assaig.
Sistema cromatogràfic (vegeu Cromatografia <621>): el cromatògraf líquid està equipat amb un detector de 227 nm i una columna de 4,6 mm × 25 cm que conté l'empaquetament L43 de 5 µm.El cabal és d'uns 2,6 ml per minut.La temperatura de la columna es manté a 30. El cromatògraf es programa de la següent manera.
Temps (minuts) Solució A (%) Solució B (%) Elució
0–35 35 65 isocràtica
35–60 35®80 65®20 gradient lineal
60–70 80®35 20®65 gradient lineal
70–80 35 65 isocràticCromatografia la solució d'idoneïtat del sistema i enregistreu les respostes màximes tal com s'indica per al Procediment: els temps de retenció relatius són d'uns 0,78 per al compost A relacionat amb paclitaxel i 0,86 per al compost B relacionat amb paclitaxel (en relació amb el temps de retenció per al paclitaxel obtingut de la solució de prova);i la resolució, R, entre el compost A relacionat amb paclitaxel i el compost B relacionat amb paclitaxel no és inferior a 1,0.Cromatografiar la solució estàndard i registrar les respostes màximes tal com s'indica al Procediment: la desviació estàndard relativa per a les injeccions repetides no és superior al 2,0%.
Procediment: injecteu un volum (uns 15 µL) de la solució de prova al cromatògraf, registreu el cromatograma i mesureu les àrees dels pics principals.Calcula el percentatge de cada impuresa en la porció de Paclitaxel presa per la fórmula:
100 (dv / rU)
en què F és el factor de resposta relativa per a cada pic d'impuresa (vegeu els valors de la taula 1);ri és l'àrea màxima de cada impuresa individual;i rU és l'àrea màxima del paclitaxel.
Taula 1
Temps de retenció relatiu Factor de resposta relativa (F) Límit de nom (%)
0,24 1,29 Baccatina III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetilpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-xilosilpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomanina (compost A relacionat amb Paclitaxel) a11
0,78 1,26 2'',3''-Dihidrocefalomanina a21
0,86 1,00 10-Deacetil-7-epipaclitaxel (compost B relacionat amb Paclitaxel) 0,5
1,10 1,00 Anàleg de bencil3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehidropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicefalomanina 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 La resolució pot ser incompleta per a aquests pics, depenent de les quantitats relatives presents;la suma de a1 i a2 no és superior al 0,5%.
2 La resolució pot ser incompleta per a aquests pics, depenent de les quantitats relatives presents;la suma de b1 i b2 no és superior al 0,5%.
3 El nom químic següent s'assigna al compost relacionat, anàleg de benzil: 13-èster de baccatina III amb àcid (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(2-fenilacetilamino)propanoic.
A més de no superar els límits per a les impureses relacionades amb paclitaxel a la taula 1, no es troba més del 0,1% de qualsevol altra impuresa única;i no es troba més del 2,0% del total d'impureses.
prova 2 (per a material etiquetat com a produït per un procés semisintètic): si el material compleix amb aquesta prova, l'etiquetatge indica que compleix la prova 2 de compostos relacionats amb la USP.
Diluent: utilitzeu acetonitril.
Solució A: utilitzeu una barreja filtrada i desgasificada d'aigua i acetonitril (3:2).
Solució B-Utilitzar acetonitril filtrat i desgasificat.
Fase mòbil: utilitzeu mescles variables de la solució A i la solució B tal com s'indica per al sistema cromatogràfic.Feu ajustos si cal (vegeu Idoneïtat del sistema a Cromatografia 621).
Solució d'idoneïtat del sistema: dissol quantitats pesades amb precisió de USP Paclitaxel RS i USP Paclitaxel Related Compound B RS en diluent, agitant i sonicant si cal, per obtenir una solució amb concentracions conegudes d'uns 0,96 mg i 0,008 mg per ml, respectivament.
Solució de prova: transferir uns 10 mg de Paclitaxel, pesats amb precisió, a un matràs aforat de 10 ml, dissoldre-hi i diluir amb el diluent a volum, agitant i sonicant si cal, i barrejar.
Sistema cromatogràfic (vegeu Cromatografia 621): el cromatògraf líquid està equipat amb un detector de 227 nm i una columna de 4,6 mm × 15 cm que conté l'empaquetament L1 de 3 µm.El cabal és d'uns 1,2 ml per minut.La temperatura de la columna es manté a 35. El cromatògraf es programa de la següent manera.
Temps (minuts) Solució A (%) Solució B (%) Elució
0-20 100 0 isocràtica
20-60 100®10 0®90 gradient lineal
60-62 10®100 90®0 gradient lineal
62-70 100 0 isocràticCromatografia la solució d'idoneïtat del sistema i enregistreu les respostes màximes tal com s'indica al Procediment: els temps de retenció relatius són d'uns 0,94 per al compost B relacionat amb paclitaxel i 1,0 per al paclitaxel;la resolució, R, entre el compost B relacionat amb paclitaxel i paclitaxel no és inferior a 1,2;i la desviació estàndard relativa per a les injeccions repetides no és superior al 2,0%.
Procediment: injecteu per separat volums iguals (uns 15 µL) del diluent i la solució de prova al cromatògraf, registreu els cromatogrames i mesureu les àrees de tots els pics.Ignoreu els pics deguts al diluent.Calcula el percentatge de cada impuresa en la porció de Paclitaxel presa per la fórmula:
100 (dv/rs)
en què F és el factor de resposta relativa per a cada impuresa (vegeu els valors a la taula 2);ri és l'àrea màxima de cada impuresa obtinguda de la solució de prova;i rs és la suma de les àrees de tots els pics obtinguts de la solució de prova.
Taula 2
Temps de retenció relatiu Factor de resposta relativa (F) Límit de nom (%)
0,11 1,24 10-Deacetilbaccatina III 0,1
0,20 1,29 Baccatina III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetilpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoilpaclitaxel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Anell d'oxetan obert, migració d'acetil i benzoil2 x1
0,921 1,00 10-Acetoacetilpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-Deacetil-7-epipaclitaxel (compost B relacionat amb Paclitaxel) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetilpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatina III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 La resolució pot ser incompleta per a aquests pics, depenent de les quantitats relatives presents;la suma de x1, x2 i x3 no és superior al 0,4%.
2 Els noms químics següents s'assignen als compostos relacionats Fotodegradant;L'anell d'oxetà es va obrir, l'acetil i el benzoil van migrar;i 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradant
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetiloxi-5,13-dihidroxi-4,16,17,17-tetrametil-8-oxa- 3-oxo-12-fenilcarboniloxipentaciclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoat
L'anell d'oxetà es va obrir, l'acetil i el benzoil van migrar
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetiloxi-1,2,4,7-tetrahidroxi-8,12,15,15-tetrametil-9-oxo- 4-(fenilcarboniloximetil)triciclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoat
10,13-Bissidechainpaclitaxel
Baccatin III 13-èster amb (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoic àcid, 10-èster amb (2S,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino) ) àcid propanoic
A més de no superar els límits per a les impureses relacionades amb paclitaxel a la taula 2, no es troba més del 0,1% de qualsevol altra impuresa única;i no es troba més del 2,0% del total d'impureses.
prova 3 (per a material etiquetat com a produït per un procés de fermentació de cèl·lules vegetals): si el material compleix amb aquesta prova, l'etiquetatge indica que compleix la prova 3 de compostos relacionats amb la USP.
Solució A-Prepareu una barreja filtrada i desgasificada d'aigua i acetonitril (3:2).
Solució B-Preparar acetonitril filtrat i desgasificat.
Fase mòbil: utilitzeu mescles variables de la solució A i la solució B tal com s'indica per al sistema cromatogràfic.Feu ajustos si cal (vegeu Idoneïtat del sistema a Cromatografia 621).
Solució d'idoneïtat del sistema: dissol la mescla d'impureses de paclitaxel USP RS en acetonitril, sonicant si cal, per obtenir una solució amb una concentració coneguda d'aproximadament 1 mg per ml.
Solució estàndard: dissol una quantitat pesada amb precisió de USP Paclitaxel RS en acetonitril, sonicant si cal, per obtenir una solució amb una concentració coneguda d'aproximadament 1 mg per ml.
Solució de prova: transferiu uns 10 mg de Paclitaxel, pesats amb precisió, a un matràs aforat de 10 ml.Dissoldre i diluir amb acetonitril a volum, sonicant si cal, i barrejar.
Sistema cromatogràfic (vegeu Cromatografia 621): el cromatògraf líquid està equipat amb un detector de 227 nm i una columna de 4,6 mm × 15 cm que conté l'empaquetament L1 de 3 µm.El cabal és d'uns 1,2 ml per minut.El cromatògraf es programa de la següent manera.
Temps (minuts) Solució A (%) Solució B (%) Elució
0-28 100 0 isocràtica
28-33 100®98 0®2 gradient lineal
33–58 98®10 2®90 gradient lineal
58-60 10 90 isocràtica
60-63 10®100 90®0 gradient lineal
63-70 100 0 isocràticCromatografia la solució d'idoneïtat del sistema i enregistreu les respostes màximes tal com s'indica al Procediment: la resolució, R, entre paclitaxel i anàleg de benzil no és inferior a 1,8.Cromatografiar la solució estàndard i registrar les respostes màximes tal com s'indica al Procediment: la desviació estàndard relativa per a les injeccions repetides no és superior al 2,0%.[nota: per a la identificació dels pics, els temps de retenció relatius aproximats es mostren a la taula 3. Els temps de retenció relatius es mesuren en comparació amb Paclitaxel.]
Taula 3
Límit de temps relatiu de retenció del nom (%)
Propil anàleg1 0,54 0,2
Cefalomanina (compost A relacionat amb Paclitaxel) 0,76 0,5
sec-butil analògic2 0,81 0,2
Anàleg de n-butil3 0,89 0,1
Anàleg de bencil 1,10 0,4
Baccatina VI 1,23 0,2
Pentil anàleg4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 El nom químic següent s'assigna al compost relacionat anàleg propil: 13-èster de baccatina III amb àcid (2R,3S)-3-butanoilamino-2-hidroxi-3-fenilpropanoic.
2 El nom químic següent s'assigna al compost relacionat sec-butil anàleg: 13-èster de baccatina III amb àcid (2R,3S)-2-hidroxi-3-(2-metilbutanoilamino)-3-fenilpropanoic.
3 El nom químic següent s'assigna al compost relacionat anàleg n-butil: 13-èster de baccatina III amb àcid (2S,3S)-2-hidroxi-3-(pentanoilamino)-3-fenilpropanoic.
4 El nom químic següent s'assigna al compost relacionat anàleg pentil: 13-èster de baccatina III amb àcid (2R,3S)-3-(hexanoilamino)-2-hidroxi-3-fenilpropanoic.
Procediment: injecteu un volum (uns 12 µL) de la solució de prova al cromatògraf, registreu el cromatograma i mesureu les àrees de tots els pics.Calcula el percentatge de cada impuresa en la porció de Paclitaxel presa per la fórmula:
100(ri/rU)
en què ri és la resposta de cada impuresa individual;i rU és la suma de les àrees de tots els pics obtinguts de la solució de prova.A més de no superar els límits per a les impureses relacionades amb paclitaxel a la taula 3, no es troba més del 0,1% de qualsevol altra impuresa única;i no es troba més del 2,0% del total d'impureses.
Assaig-
Diluent-Prepareu una barreja de metanol i àcid acètic (200:1).
Fase mòbil: preparar una barreja filtrada i desgasificada d'aigua i acetonitril (11:9).Feu ajustos si cal (vegeu Idoneïtat del sistema a Cromatografia 621).
Preparació estàndard: dissoleu, utilitzant sonicació si cal, una quantitat pesada amb precisió de USP Paclitaxel RS en diluent, i diluïu quantitativament, i pas a pas si cal, amb diluent per obtenir una solució amb una concentració coneguda d'aproximadament 1 mg per ml.
Preparació de l'assaig: transferiu uns 10 mg de Paclitaxel, pesats amb precisió, a un matràs aforat de 10 ml.Dissoldre en el diluent, utilitzant la sonicació si cal, diluir amb el diluent a volum i barrejar.
Sistema cromatogràfic (vegeu Cromatografia <621>): el cromatògraf líquid està equipat amb un detector de 227 nm i una columna de 4,6 mm × 25 cm que conté l'empaquetament L43 de 5 µm.El cabal és d'uns 1,5 ml per minut.Cromatografiar la preparació estàndard i registrar les respostes màximes tal com s'indica al Procediment: el factor de cua està entre 0,7 i 1,3;i la desviació estàndard relativa per a les injeccions repetides no és superior a l'1,5%.
Procediment: injecteu per separat volums iguals (uns 10 µL) de la preparació estàndard i la preparació d'assaig al cromatògraf, registreu els cromatogrames i mesureu les àrees dels pics principals.Calcula la quantitat, en mg, de C47H51NO14 a la porció de Paclitaxel presa per la fórmula:
10C (rU / rS)
en què C és la concentració, en mg per ml, de USP Paclitaxel RS a la preparació estàndard;i rU i rS són les respostes màximes per al paclitaxel obtingudes de la preparació d'assaig i la preparació estàndard, respectivament.