Ursodeoxycholic Acid (UDCA) CAS 128-13-2 Assay 99.0~101.0%

URSODEOXYCHOLIC ACID
C24H40O4 Mr 392.6[128-13-2]
DEPINISYON
3α,7β-Dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid.
Kontento: 99.0 porsyento ngadto sa 101.0 porsyento (uga nga substansiya).
MGA KARAKTER
Panagway: puti o hapit puti nga powder.
Solubility: halos dili matunaw sa tubig, libre nga matunaw sa ethanol (96 porsyento), gamay nga matunaw sa acetone, halos dili matunaw sa methylene chloride.
mp: mga 202 ℃.
PAGKILALA
Unang pag-ila: A.
Ikaduhang pag-ila: B, C.
A. Infrared pagsuyup spectrophotometry (2.2.24).
Pagtandi: Ursodeoxycholic Acid CRS.
B. Susiha ang mga chromatograms nga nakuha sa pagsulay alang sa kahugawan C.
Resulta: ang punoan nga lugar sa chromatogram nga nakuha gamit ang solusyon sa pagsulay (b) parehas sa posisyon, kolor ug gidak-on sa punoan nga lugar sa chromatogram nga nakuha gamit ang reference solution (a).
C. Dissolve mga 10 mg sa 1 mL sa sulfuric acid R. Idugang ang 0.1 mL sa formaldehyde solution R ug tugoti nga mobarog sulod sa 5 min.Idugang ang 5 mL nga tubig R. Ang suspension nga nakuha kay greenish-blue.
MGA PAGSULAY
Piho nga optical rotation (2.2.7): + 58.0 hangtod + 62.0 (uga nga substansiya).
Dissolve 0.500 g sa anhydrous ethanol R ug dilute ngadto sa 25.0 mL uban sa sama nga solvent.
Kahugawan C. Thin-layer chromatography (2.2.27).
Sagol nga solvent: tubig R, acetone R (10:90 V/V).
Pagsulay solusyon (a).Dissolve 0.40 g sa substansiya nga susihon sa solvent mixture ug dilute ngadto sa 10 mL sa solvent mixture.
Sulayi nga solusyon (b).Dilute ang 1 mL sa test solution (a) ngadto sa 10 mL sa solvent mixture.
Reperensya nga solusyon (a).Dissolve 40 mg sa ursodeoxycholic acid CRS sa solvent mixture ug dilute ngadto sa 10 mL uban sa solvent mixture.
Reperensya nga solusyon (b).Dissolve 20 mg sa lithocholic acid CRS (impurity C) sa solvent mixture ug dilute ngadto sa 10.0 mL sa solvent mixture (solusyon A).Dilute ang 2.0 mL niini nga solusyon ngadto sa 100.0 mL sa solvent mixture.
Reperensya nga solusyon (c).Sa 5 mL sa solusyon A idugang ang 10 mg sa chenodeoxycholic acid CRS (kahugawan A) ug lasaw sa 50 mL sa solvent mixture.
Plate: TLC silica gel plate R.
Mobile phase: glacial acetic acid R, acetone R, methylenechloride R (1:30:60 V/V/V).
Aplikasyon: 5μL.
Pag-uswag: labaw sa 2/3 sa plato.
Pagpauga: sa 120 ℃ sulod sa 10 min.
Detection: Pag-spray dayon sa 47.6 g/L nga solusyon sa phosphomolybdic acid R sa usa ka sagol nga 1 ka volume sa sulfuric acid R ug 20 ka volume sa glacial acetic acid R ug init sa 120 ℃ hangtud nga ang mga blue spots makita sa mas gaan nga background.
Kaangayan sa sistema: solusyon sa pakisayran (c):
- ang chromatogram nagpakita sa 2 klaro nga gibulag nga punoan nga mga lugar.
Limitado: solusyon sa pagsulay (a):
-kahugawan C: bisan unsang spot tungod sa kahugawan C dili mas grabe kay sa principal spot sa chromatogram nga nakuha gamit ang reference solution (b) (0.1 percent).
May kalabotan nga mga substansiya.Liquid chromatography (2.2.29).
Sagol nga solvent: methanol R, mobile phase (10:90 V/V).
Sulayi nga solusyon.Dissolve 60 mg sa substansiya nga susihon sa solvent mixture ug dilute ngadto sa 20.0 mL sa solvent mixture.
Reperensya nga solusyon (a).Dissolve ang sulod sa usa ka panaksan sa Ursodeoxycholic Acid alang sa sistema sa pagkaangay CRS (nga adunay mga impurities A ug H) sa 1.0 mL sa solvent sagol.
Reperensya nga solusyon (b).Dilute ang 1.0 mL sa test solution ngadto sa 100.0 mL nga adunay solvent mixture.Dilute ang 1.0 mL niini nga solusyon ngadto sa 10.0 mL sa solvent mixture.
Kolum:
-gidak-on: l = 0.25 m, Ø = 4.6 mm;
-stationary phase: end-capped octadecylsilyl silica gel alang sachromatography R (5 μm);
- temperatura: 40 ℃ ± 1 ℃.
Mobile phase: isagol ang 30 ka volume sa acetonitrile R, 37 ka volume sa usa ka 0.78 g/L nga solusyon sa sodium dihydrogen phosphate R nga gi-adjust sa pH 3 sa phosphoric acid R, ug 40 ka volume sa methanol R.
Dagayday sa agos: 0.8 mL/min.
Detection: refractometer sa 35 ± 1 ℃.
Pag-injection: 150 μL.
Panahon sa pagdagan: 4 ka beses ang oras sa pagpadayon sa Ursodeoxycholic Acid.
Pag-ila sa mga hugaw: gamita ang chromatogram nga gihatag sa ursodeoxycholic acid para sa pagkaangay sa sistema CRS ug ang chromatogram nga nakuha gamit ang reference solution (a) aron mailhan ang mga taluktok tungod sa mga hugaw A ug H.
Relatibong paghawid nga may kalabotan sa ursodeoxycholic acid (panahon sa pagpabilin = mga 14 min): kahugawan H = mga 0.9;kahugawan A = mga 2.8.
Kaangayan sa sistema: solusyon sa pakisayran (a):
-resolusyon: minimum nga 1.5 taliwala sa mga taluktok tungod sa kahugawan sa H ug ursodeoxycholic acid.
Mga limitasyon:
- kahugawan A: dili mosobra sa 10 ka pilo sa lugar sa punoan nga peak sa chromatogram nga nakuha gamit ang reference solution (b) (1.0 percent);
-unspecified impurities: alang sa matag kahugawan, dili labaw pa kay sa dapit sa principal peak sa chromatogram nga nakuha uban sa reference solusyon (b) (0.10 porsyento);
- kinatibuk-an: dili mosobra sa 15 ka pilo sa lugar sa punoan nga peak sa chromatogram nga nakuha gamit ang reference solution (b) (1.5 porsyento);
-limitasyon sa pagbaliwala: 0.5 ka pilo sa lugar sa punoan nga peak sa chromatogram nga nakuha gamit ang reference solution (b) (0.05 porsyento).
Bug-at nga mga metal (2.4.8): maximum 20 ppm.
1.0 g nagsunod sa pagsulay C. Andama ang reference solution gamit ang 2 mL nga lead standard solution (10 ppm Pb) R.
Pagkawala sa pagpauga (2.2.32): labing taas nga 1.0 porsyento, gitino sa 1.000 g pinaagi sa pagpauga sa oven sa 105 ℃.
Sulfated ash (2.4.14): maximum nga 0.1 porsyento, determinado sa 1.0 g.
PAGSUSI
Dissolve 0.350 g sa 50 mL sa ethanol (96 porsyento) R, kaniadto neutralized sa 0.2 mL sa phenolphthalein solusyon R. Idugang ang 50 mL sa tubig R ug titrate sa 0.1 M sodium hydroxide hangtud nga ang usa ka pink nga kolor makuha.
Ang 1 mL sa 0.1 M sodium hydroxide katumbas sa 39.26 mg sa C24H40O4.
MGA hugaw
Gipiho nga mga hugaw: A, C.
Ang uban nga makit-an nga mga hugaw (ang mosunod nga mga substansiya, kung anaa sa igo nga lebel, mahibal-an sa usa o uban pa nga mga pagsulay sa monograpo. Gilimitahan kini sa kinatibuk-ang sukdanan sa pagdawat alang sa uban/wala matino nga mga hugaw ug/o sa kinatibuk-ang monograph nga mga Substance. for pharmaceutical use (2034) Busa dili kinahanglan nga ilhon kini nga mga hugaw para sa pagpakita sa pagsunod Tan-awa usab ang 5.10.
Pagkontrol sa mga hugaw sa mga sangkap alang sa paggamit sa parmasyutiko): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (chenodeoxycholic acid),
B. 3α,7α,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (cholic acid),
C. 3α-hydroxy-5β-cholan-24-oic acid (lithocholic acid),
D. 3α,7β,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (ursocholic acid),
E. 3α,12α-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (deoxycholic acid),
F. 3α-hydroxy-7-oxo-5β-cholan-24-oic acid,
G. methyl 3α,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oate,
H. 3β,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid,
I. 5β-cholane-3α,7β,24-triol.