L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe (4-NO2)-OMe·HCl Assay > 98.5% (HPLC) Factory

Metudu di Analisi di L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Descrizzione: Pone circa 2 g di mostra in una petri-dish pulita è secca è osservate l'aspettu di mostra.Reporting: Segnala l'osservazione
Identificazione: Paragunate u tempu di ritenzione di u piccu maiò in u cromatogramma di a preparazione di prova cù u tempu di ritenzione di u piccu maiò in u cromatogramma di a preparazione di adattazione di u sistema cum'è ottenuta in purità cromatografica da HPLC.
Perdita à l'asciugatura: Asciugà una buttiglia di pesu pocu profonda cù tappu di vetru à 105±2 ℃ per 30 minuti.Lasciate rinfriscà à a temperatura di l'ambienti in un desciccatore.Pesa accuratamente a buttiglia di pesa cù tappu è registra u pesu (W1).Trasferisce circa 1 à 2 g di quantità accuratamente pesata di sustanza di prova in a buttiglia di pesa.Scuzzulate dolcemente, lateralmente, distribuisce u specimenu di prova in u modu più uniforme pussibule à una prufundità di circa 5 mm.Pesa a buttiglia di pesata caricata è registra u pesu (W2).Pone a buttiglia caricata in u fornu di secca, sguassate u tappu è lasciate ancu in a camera.Asciugà a mostra di prova à 105±2 ℃ per 3 ore.À l'apertura di a camera, chjude a buttiglia prontamente, è permettenu di vene à a temperatura di l'ambienti in un dessiccatore.Pesa accuratamente a buttiglia di pesa cù tappu è ricuddà u pesu (W3).Calculà a perdita percentuale nantu à l'asciugatura di a mostra cù a seguente formula:
Calcul Perdita à l'asciugatura (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Cuntenutu enantiomeru da HPLC:
Chimica è Reagenti:
n-Hexane AR grade
Metanolu di qualità HPLC
Alcolu isopropilico di qualità HPLC
Dietilamina di qualità AR
Standards: L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl standard;L-4-Nitrofenilalanina Methyl Ester HCl enantiomer standard
Fase Mobile: Preparate una mistura omogenea di n-Hexane, Isopropyl Alcohol, Metanol è Dietilamina (65:20:15:0.1 v/v/v/v)
Preparazione Blanka: Trasferisce 2,5 ml di metanol in un fiascon volumetricu di 10 ml, dilute à u voluminu cù a fase mobile è mischjà.
Preparazione di l'idoneità di u sistema:
Pesa accuratamente è trasferisce circa 5 mg ognuna di L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl standard è L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl enantiomer standard in un fiasco volumetricu da 10 ml, dissolve in circa 2,5 ml di metanol, dilute à u voluminu cù mobile. fasa è mischjà.
Preparazione di a prova:
Pesa accuratamente è trasferisce circa 5 mg di mostra in un flask volumetricu 10-mol, dissolve in circa 2,5 ml di metanol, dilute à u voluminu cù a fase mobile è mischjà.
Parametri strumentali:
Strumentu: HPLC equipatu di iniettore, Pompa, detector UV è Registratore
Colonna: ChiralPak-IC (4,6 mm x 250 mm) 5 μ o equivalente
Flusso: 1,0 ml/minute
Lunghezza d'onda: 260 nm
Volume d'iniezione: 10 μL
Temperature di a colonna: 25 ℃
Durata: 20 minuti
Prucedura
Inject the solution as mentioned in the following sequence.Registrate i cromatogrammi è cunfirmate i criteri:
Description of Injections Number of Injections Criteria
Preparazione Blanka 1 Nisun piccu interferente deve esse osservatu à u tempu di ritenzione di L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl o enantiomer.
Preparazione di idoneità di u sistema 1 A risoluzione trà L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl è u piccu enantiomeru ùn deve esse micca menu di 2,0
Preparazione di a prova 1 Aduprate u cromatogramma di prova per determinà u cuntenutu di l'enantiomeru in a mostra.
Tempi di Retention Relative:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0
Enantiomer Circa 1.11
U tempu di ritenzione di L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl hè di circa 9,8 minuti.
Calculu: In u cromatogramma ottenutu da a preparazione di a prova, ignora tutti i picchi aspetta L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl è Enantiomer.Segnala u cuntenutu di l'enantiomeru in u sample per u metudu di normalizazione di l'area.
Purezza cromatografica è impurità da HPLC:
Chimica è Reagenti:
Fosfatu diammoniu di qualità AR
Acidu fosforicu AR gradu
Metanolu di qualità HPLC
Acqua purificata
Norme
L-4-Nitrofenilalanina Methyl Ester HCl standard
4-Nitro-L-Phenylalanine monoidrato standard
Fase mobile-A
Dissolve 6,6 g di fosfat di diammoniu in 1000 ml d'acqua purificata.Aghjustate u pH di sta suluzione à 6,0 cù l'acidu fosforicu.Filtru è degas.Prima di misurà u pH di a suluzione, calibrate u pH metru cù una soluzione tampone standard pH 4.01 AND 7.00.
Fase mobile-B
Metanolu di qualità HPLC
Preparazione di l'adattabilità di u sistema
Pesa accuratamente è trasferisce circa 25 mg ognuna di L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl standard è 4-Nitro-L-Phenylalanine standard monohydrate in un fiascon volumetricu 50-ml, dissolve in è dilute à u voluminu cù metanol è mischjà.
Preparazione à a prova:
Pesa accuratamente è trasferisce circa 25 mg di mostra in un fiasco volumetricu di 50 ml, dissolve è diluite à u voluminu cù metanol è mischjà.
Parametri strumentali:
Strumentu: HPLC equipatu di iniettore, Pompa, detector UV è Registratore
Colonna: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 μ o equivalente
Flusso: 1,0 ml/minute
Lunghezza d'onda: 265 nm
Volume d'iniezione: 20 μL
Temperature di a colonna: 25 ℃
Durata: 45 minuti
Prugramma di gradiente
Tempu (min) Mobile Phase-A % Mobile Phase-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Prucedura:
Inject the solution as mentioned in the following sequence.Registrate i cromatogrammi è cunfirmate i criteri:
Preparazione Blanka 1 Nisun piccu interferente deve esse osservatu à u tempu di retenzioni di L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl.
Preparazione di idoneità di u sistema 1 Fattore di coda per L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl piccu ùn deve esse micca menu di 2,0
Preparazione di a prova 1 Aduprate u cromatogramma di prova per determinà a purità cromatografica è impurità.
Tempi di Retention Relative:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0 (tempu di ritenzione circa 11.4 minuti)
4-Nitro-L-Phenylalanine Circa 0,4
Toluene Circa 2,3
Calculi:
In u cromatogramma ottenutu da a preparazione di teste, dopu a correzione in biancu, ignora u piccu per via di u toluene.Segnala a purità cromatografica, u cuntenutu di 4-Nitro-L-Phenylalanine è l'impurità totali in u campione per u metudu di normalizazione di l'area.