Fmoc-Ser(tBu)-OH CAS 71989-33-8 Fmoc-O-terc-butyl-L-serin Čistota >98,5 % (HPLC)

Kontrolní postupy
1. Vzhled
-- Vizuální kontrola
2. Čistota (HPLC)
2.1 Nástroj
Vysokoúčinná kapalinová chromatografie, PDA detektor.
Elektronická analytická váha
2.2 Činidlo
Acetonitril (chromatografická kvalita), kyselina trifluoroctová (chromatografická kvalita)
2.3 Chromatografické podmínky
2.3.1 Sloupec: YMC-ODS-AM, 5 μl, 250 x 4,6 mm
2.3.2 Vlnová délka detekce: INC220nm
Průtok: 1,0 ml/min
Velikost vzorku: 10 μl (referenční)
Ředidlo: acetonitril
Doba sběru dat: 25,00 min
2.4 Příprava mobilní fáze
Mobilní fáze A (0,1% kyselina trifluoroctová voda): přesná absorpce 2. Zřeďte 0 ml kyseliny trifluoroctové vodou na 2000 ml, dobře promíchejte a odplyněte;
Mobilní fáze B (0,1% acetonitril trifluoroctová kyselina): přesná absorpce 2,0 ml trifluoroctové kyseliny bylo zředěno na 2000 ml acetonitrilem, promícháno a odplyněno;
2.5 Gradientní program mobilní fáze
Čas (min) A% B%
0,00 90 10
13,00 10 90
18:00 10 90
18.01 90 10
23,00 90 10
2.6 Příprava roztoku vzorku
Zvažte a rozpusťte 0,1 g vzorku v acetonitrilu a nařeďte na 100 ml, pro použití dobře protřepejte nebo na stejnou koncentraci.Připravte dva vzorky paralelně.
2.7 Stanovení vzorku
Analyzujte vzorek podle následujícího postupu odběru vzorků:
Více než 1 injekce slepého roztoku
1 vzorový roztok stehu 1#
1 vzorový roztok stehu 2#
2.8 Výpočet výsledku
2.8.1 Pro výpočet HPLC čistoty byla použita metoda normalizace plochy píku odečtením prázdného prostoru.
2.8.2 Relativní střední odchylka čistoty dvou jehel nesmí být větší než 1 %
2.8.3 Pokud výsledky obou nástřiků splňují kritéria přijatelnosti, považuje se za konečný výsledek průměrná čistota.
3, Bod tání -- přístroj na stanovení bodu tání RY-1
4. Metoda detekce ztrát sušením
4.1 Nástroje:
Elektrická termostatická sušárna, bilance jedna ku deseti tisícům.
4.2 Postup:
V ploché navažovačce se zabroušeným uzávěrem ústí s konstantní hmotností a přesušením navažte 1 gram vzorku (s přesností na 0,0001 gramu).Vzorek by měl být rovnoměrně rozprostřen na dno váženky o tloušťce nepřesahující 10 mm, vložit do elektrické sušárny s konstantní teplotou, sušit při 105-110 °C po dobu 3 hodin a poté přemístit do sušárny, vychladnout. na pokojovou teplotu a zváží se.
Výpočet: Úbytek suché hmotnosti %= (M1-M2) ÷M×100
Kde: M1: hmotnost vzorku a váženky před sušením, g
M2: Hmotnost vzorku a váženky po vysušení, g
M: Hmotnost vzorku, gram
5. Specifická rotace
-- Specifická rotace se měří v souladu s GB/T613-1988
Příprava vzorku: 0,5000 g vzorku bylo přesně zváženo a přeneseno do čisté a suché 50 ml odměrné láhve s 20 ml ethylacetátu.Láhev byla zazátkována a protřepána, aby se rozpustil ethylacetát.
Test: Před testem nastavte nulu gyroskopu, poté naplňte zkumavku roztokem vzorku, zaznamenejte úhel vychýlení a vypočítejte specifickou rotaci vzorku pomocí následujícího vzorce.
[α]20/D= (r×50) ÷(L×W)
Kde:
[α]20/D: Specifická rotace roztoku vzorku při 25 °C
r: Rotace pozorovaná při 25 °C pro roztok vzorku
50: Připravte objem roztoku vzorku (ml)
w: Hmotnost vzorku (g)
L: Délka optické trubice (dm)
6. Analýza TCL
Příprava vzorku: 0,5000 g vzorku bylo přesně zváženo a přemístěno do čisté a suché 50ml odměrné láhve, bylo přidáno 40 ml EtoH, láhev byla uzavřena a protřepána, aby se rozpustila, a poté zředěna na stupnici pomocí EtoH.
Příprava kontrolního vzorku: 0,5000 g vzorku bylo přesně zváženo a přemístěno do čisté a suché odměrné láhve o objemu 50 ml, bylo přidáno 40 ml vody a 2 kapky 6N kyseliny chlorovodíkové, láhev byla uzavřena a protřepána, aby se rozpustila, a poté zředěna na stupnici pomocí voda.Poté odeberte 0,5 výše uvedené kapaliny a zřeďte ji ethanolem ve 100ml lahvičce na referenční vzorek s 1,0% stupnicí zbytků aminokyselin.
10 mikrolitrové vzorky byly odebrány pomocí mikrovzorkovací stříkačky a vzorky byly umístěny na silikonovou destičku GF254.Pro srovnávací body byly odebrány 5 mikrolitrové, 10 mikrolitrové a 15 mikrolitrové bodové destičky.
Vyvíjecí činidlo: n-butanol: ledová kyselina octová: voda =4:1:1.
Činidlo vyvíjející barvu: 5% roztok ninhydrinu v methanolu.
Operace vyvolání barvy: nejprve pomocí vysoušeče vlasů vysušte vyvinutou silikagelovou desku, poté ji ponořte do 5% roztoku ninhydrinu v methanolu, poté vysušte fénem a pečte při vysoké teplotě v elektrické peci pro vyvolání barvy.
Posouzení: Podívejte se na dobu zbarvení produktu, velikost skvrn, koncentraci barvy a srovnání s kontrolním produktem, posuďte, že je v tomto rozmezí.