Orlistat CAS 96829-58-2 API Čistota léku na hubnutí 98,0~101,5 %

Orlistat
C29H53NO5 495,73
l-Leucin, N-formyl-, l-[(3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl)methyl]dodecylester, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-formyl-l-leucin, ester s (3S,4S)-3-hexyl-4-[(2S)-2-hydroxytridecyl]-2-oxetanonem [96829-58-2].
DEFINICE
Orlistat obsahuje NLT 98,0 % a NMT 101,5 % C29H53NO5, počítáno na bezvodé bázi bez rozpouštědla.
IDENTIFIKACE
• A. Infračervená absorpce <197M>
• B. Retenční čas hlavního píku roztoku vzorku odpovídá retenčnímu času standardního roztoku, jak byl získán v testu.
TEST
• Postup
[Poznámka – Vyhněte se použití plastových baněk pro přípravu nebo zadržování jakéhokoli roztoku v této analýze.]
Mobilní fáze: acetonitril, kyselina fosforečná a voda (860:0,05:140)
Standardní roztok: 0,5 mg/ml USP Orlistat RS v mobilní fázi.Injikujte ihned po přípravě nebo uchovávejte v 5.
Roztok vzorku: 0,5 mg/ml orlistatu v mobilní fázi.Injikujte ihned po přípravě nebo uchovávejte v 5.
Chromatografický systém
(Viz Chromatografie <621>, Vhodnost systému.)
Režim: LC
Detektor: UV 195
Sloupec: 3,9 mm × 15 cm;4-µm těsnění L1
Průtok: 1,0 ml/min
Velikost nástřiku: 20 µL
Vhodnost systému
Vzorek: Standardní roztok
Požadavky na vhodnost
Relativní směrodatná odchylka: NMT 2,0 %
Analýza
Vzorky: Standardní roztok a Vzorkový roztok
Vypočítejte procento orlistatu (C29H53NO5) v části odebraného orlistatu:
Výsledek = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = maximální odezva z roztoku vzorku
rS = maximální odezva standardního roztoku
CS = koncentrace USP Orlistat RS ve standardním roztoku (mg/ml)
CU = koncentrace orlistatu v roztoku vzorku (mg/ml)
Kritéria přijatelnosti: 98,0 %-101,5 % na bezvodé bázi bez rozpouštědel
NEČISTOTY
Anorganické nečistoty
• Zbytek po zapálení <281>: NMT 0,1 %
• Těžké kovy, metoda II <231>: 20 ppm
Organické nečistoty
• Postup 1: Limit sloučeniny A související s orlistatem
Standardní roztok: 0,1 mg/ml USP Orlistat příbuzná sloučenina A RS v acetonu
Roztok vzorku: 50 mg/ml orlistatu v acetonu
Chromatografický systém
(Viz Chromatografie <621>, Thin-Layer Chromatography.)
Režim: TLC
Adsorbent: 0,25 mm vrstva chromatografické směsi silikagelu
Aplikační objem: 10 µL
Vyvíjecí systém rozpouštědel: Toluen a ethylacetát (4:1)
Detekční roztok: Přeneste 2,5 g kyseliny fosfomolybdenové a 1 g síranu ceričitého do 100ml odměrné baňky, rozpusťte a zřeďte methanolem na požadovaný objem.
Analýza
Vzorky: Standardní roztok a Vzorkový roztok
Vyjměte desku a důkladně ji osušte na vzduchu.Vysušenou desku postříkejte detekčním roztokem a vložte desku do sušárny při 120 °C na 30 minut.
Kritéria přijatelnosti: Žádná sekundární skvrna z roztoku vzorku odpovídající sloučenině A související s orlistatem není intenzivnější než odpovídající skvrna ze standardního roztoku (0,2 %).
• Postup 2: Limit sloučeniny B související s orlistatem
Standardní roztok: 0,025 mg/ml USP Orlistat příbuzná sloučenina B RS v methylenchloridu
Roztok vzorku: 50 mg/ml orlistatu v methylenchloridu
Roztok obohaceného vzorku: 50 mg/ml orlistatu ve standardním roztoku
Chromatografický systém
(Viz Chromatografie <621>, Vhodnost systému.)
Režim: GC
Detektor: Plamenová ionizace
Kolona: 0,32 mm x 30 m tavený oxid křemičitý, potažený 0,25 µm G27 stacionární fází
Teplota kolony: Viz tabulka teplotních programů níže.
Počáteční teplota () Náběh teploty (/min) Konečná teplota () Doba zdržení na konečné teplotě (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Teplota
Vstřikovač: 270
Detektor: 280
Nosný plyn: Helium
Průtok: 30 ml/min
Dělicí poměr: 10:1
Velikost nástřiku: 2 µL
Vhodnost systému
Vzorek: Standardní roztok
Požadavky na vhodnost
Relativní směrodatná odchylka: NMT 10,0 %
Analýza
Vzorky: Roztok vzorku a roztok obohaceného vzorku
Vypočítejte procento sloučeniny B související s orlistatem v části odebraného orlistatu:
Výsledek = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = maximální odezva sloučeniny B příbuzné orlistatu z roztoku vzorku
rSP = maximální odezva sloučeniny B související s orlistatem z roztoku obohaceného vzorku
CS = koncentrace USP sloučeniny B RS související s orlistatem ve standardním roztoku (mg/ml)
CT = koncentrace orlistatu v roztoku obohaceného vzorku (mg/ml)
Kritéria přijatelnosti: Bylo nalezeno NMT 0,05 % sloučeniny B příbuzné orlistatu.
• Postup 3
[Poznámka – Vyhněte se použití plastových baněk pro přípravu nebo zadržování jakéhokoli roztoku v této analýze.]
Mobilní fáze, standardní roztok a roztok vzorku: Připravte se podle pokynů v testu.
Řešení vhodnosti systému: 10 µg/ml USP Orlistat RS, 0,1 µg/ml USP Orlistat Related Compound C RS a 0,25 µg/ml USP Orlistat Related Compound D RS v mobilní fázi
Chromatografický systém
(Viz Chromatografie <621>, Vhodnost systému.)
Postupujte podle pokynů v testu, kromě chromatografie roztoku vhodného pro systém.
Vhodnost systému
Ukázka: Řešení vhodnosti systému
Požadavky na vhodnost
Poměr signálu k šumu: NLT 3 pro vrcholy sloučeniny C související s orlistatem a sloučeniny D související s orlistatem
Relativní směrodatná odchylka: NMT 10,0 % pro vrchol orlistatu
Analýza
Vzorky: Standardní roztok a Vzorkový roztok
Vypočítejte procento každé nečistoty v odebrané dávce Orlistatu:
Výsledek = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = maximální odezva pro každou jednotlivou nečistotu z roztoku vzorku
rS = špičková odezva USP Orlistat RS ze standardního roztoku
CS = koncentrace USP Orlistat RS ve standardním roztoku (mg/ml)
CU = koncentrace orlistatu v roztoku vzorku (mg/ml)
F = relativní faktor odezvy uvedený v tabulce nečistot 1
Kritéria přijatelnosti: Viz tabulka nečistot 1.
Tabulka nečistot 1
Název Relativní doba uchování Relativní faktor odezvy Kritéria přijetí, NMT (%)
Formylleucinea 0,10 4,0 0,2
Sloučenina příbuzná orlistatu C 0,13 33 0,05
Orlistat epimerb s otevřeným kruhem 0,44 1,0 0,2
Sloučenina příbuzná orlistatu D* 0,90 - Vypočteno v
Postup 4
Orlistat amidek s otevřeným kroužkem* 0,90 - Vypočteno v
Postup 4
Orlistat 1,00 - -
d-Leucin orlistatd 1,18 1,0 0,2
Jednotlivá neidentifikovaná nečistota - 1,0 0,1
*Koeluce v tomto LC systému, stanoveno podle postupu 4.
N-formyl-l-leucin.
b Kyselina (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-formylamino-4-methylpentanoyloxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadekanová.
c N-formyl-l-leucin (S)-l-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[l-fenyl-R-ethylkarbomoyl]nonyl]-dodecylester.
dN-Formyl-d-leucin (S)-l-[[(2S,3S)-3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl]methyl]dodecylester nebo enantiomer.
• Postup 4: Limit sloučeniny D související s orlistatem
Mobilní fáze: methanol a voda (83:17)
Systém vhodnosti řešení: 4 mg/ml USP Orlistat RS a 2,4 µg/ml USP Orlistat příbuzná sloučenina D RS v acetonitrilu, v daném pořadí
Standardní roztok: 5,0 mg/ml USP Orlistat RS v acetonitrilu
Roztok vzorku: 5,0 mg/ml orlistatu v acetonitrilu
Chromatografický systém
(Viz Chromatography 621, Vhodnost systému.)
Režim: LC
Detektor: 205 nm
Sloupec: 4,0 mm x 25 cm;5µm těsnění L7
Průtok: 0,6 ml/min
Velikost nástřiku: 20 µL
Vhodnost systému
Ukázka: Řešení vhodnosti systému
Požadavky na vhodnost
Poměr signálu k šumu: NLT 3 pro vrchol sloučeniny D související s orlistatem
Relativní směrodatná odchylka: NMT 10,0 % pro vrchol orlistatu
Analýza
Vzorky: Standardní roztok a Vzorkový roztok
Vypočítejte procento každé nečistoty v odebrané dávce Orlistatu:
Výsledek = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = maximální odezva pro každou jednotlivou nečistotu z roztoku vzorku
rS = špičková odezva pro USP Orlistat RS ze standardního roztoku
CS = koncentrace USP Orlistat RS ve standardním roztoku (µg/ml)
CU = koncentrace orlistatu v roztoku vzorku (µg/ml)
F = relativní faktor odezvy získaný v tabulce nečistot 2
Kritéria přijatelnosti: Viz tabulka nečistot 2.
Tabulka nečistot 2
Název Relativní doba uchování Relativní faktor odezvy Kritéria přijetí, NMT (%)
Sloučenina příbuzná orlistatu D 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1,00 - -
Orlistat otevřený kruh amida 1,25 4,3 0,1
(S)-l-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[l-fenyl-R-ethylkarbomoyl]nonyl]dodecylester N-formyl-l-leucinu.
• Postup 5: Limit sloučeniny E související s orlistatem
Pufr: 0,4N roztok boritanu, upravený na pH 10,2
Derivitizační činidlo: roztok o-ftaldehydu (OPA).[Poznámka-Pokud není možné získat komerčně, lze derivatizační činidlo připravit jako 1% kyselinu 3-merkaptopropionovou a o-ftaldialdehyd v 0,4M roztoku borátového pufru.]
Roztok A: Přeneste 4,1 g trihydrátu octanu sodného a 40 mg kyseliny ethylendiamintetraoctové (EDTA) do 1-litrové odměrné baňky.Rozpustí se v 950 ml vody a upraví se 0,1 N hydroxidem sodným na pH 7,2.Zředí se vodou na požadovaný objem, přidá se 2,5 ml tetrahydrofuranu a promíchá se.Filtrovat a odplyňovat.
Roztok B: Přeneste 2,7 g trihydrátu octanu sodného a 40 mg EDTA do 1-litrové odměrné baňky.Rozpustí se ve 200 ml vody a upraví se 0,1 N hydroxidem sodným na pH 7,2.Přidá se 800 ml acetonitrilu, filtruje se a odplyní se.
Mobilní fáze: Viz tabulka gradientů níže.
Čas (min) Roztok A (%) Roztok B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3,3
45 96,7 3,3
Standardní roztok: Přeneste odvážené množství asi 0,2 mg sloučeniny USP Orlistat Related E RS do 20ml lahvičky head-space.Přidejte 10 ml 4N hydroxidu sodného a lahvičku uzavřete.Lahvička se zahřívá na 100 °C po dobu 1 hodiny, poté se nechá vychladnout na pokojovou teplotu.Přeneste 2 ml výsledného roztoku do 50ml odměrné baňky a zřeďte vodou na požadovaný objem.K 0,5 ml tohoto roztoku přidejte 2,0 ml pufru a 0,5 ml derivatizačního činidla.
Vzorkový roztok: Postupujte podle pokynů pro standardní roztok, ale místo toho použijte 25 mg orlistatu k nahrazení 0,2 mg sloučeniny E RS související s USP Orlistat.
Chromatografický systém
(Viz Chromatografie <621>, Vhodnost systému.)
Režim: LC
Detektor: Fluorescence 340 nm (excitace);450 nm (emise)
Sloupce
Záštita: 2,1 mm × 2 cm;50µm balení L1
Analytické: 2,1 mm x 20 cm;balení L1
Průtok: 0,5 ml/min
Velikost nástřiku: 20 µL
Vhodnost systému
Vzorek: Standardní roztok
Požadavky na vhodnost
Relativní standardní odchylka: NMT 6,0 % pro vrchol sloučeniny E související s orlistatem
Analýza
Vzorky: Standardní roztok a Vzorkový roztok
Vypočítejte procento této nečistoty v odebrané dávce Orlistatu:
Výsledek = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = maximální odezva pro sloučeninu E související s orlistatem v roztoku vzorku
rS = maximální odezva pro sloučeninu E RS související s orlistatem podle USP ve standardním roztoku
CS = koncentrace USP Orlistat Related Compound E RS ve standardním roztoku (mg/ml)
CU = koncentrace orlistatu v roztoku vzorku (mg/ml)
Kritéria přijatelnosti
Jednotlivá nečistota: Bylo nalezeno NMT 0,2 % sloučeniny E příbuzné orlistatu.
Celkové nečistoty: NMT Bylo nalezeno 1,0 % celkových nečistot, výsledky pro postupy 1, 2, 3, 4 a 5 byly přidány.
SPECIFICKÉ TESTY
• Optická rotace, specifická rotace <781>
Vzorkový roztok: 30 mg/ml v dehydrovaném alkoholu
Kritéria přijetí: Mezi -48,0 a -51,0 ve 20
• Stanovení vody, metoda Ic <921>: NMT 0,2 %
DALŠÍ POŽADAVKY
• Balení a skladování: Uchovávejte v dobře uzavřených nádobách při teplotě mezi 2 a 8 °C.
• Referenční standardy USP <11>
USP Orlistat RS
USP Orlistat související sloučenina A RS
USP sloučenina B RS související s orlistatem
USP sloučenina C RS související s orlistatem
USP sloučenina D RS související s orlistatem
USP Orlistat Související sloučenina E RS
USP35