Paklitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 test (HPLC) 97,0~102,0 %

paklitaxel
C47H51NO14 853,91
Kyselina benzenpropanová, -(benzoylamino)-hydroxy-, 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahydro-4,11-dihydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1 H-cyklodeka[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-yl ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodekahydro-4,6, 9,11,12,12b-hexahydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-7,11-metano-5H-cyklodeka[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-on 6, 12b-diacetát, 12-benzoát, 9-ester s (2R,3S)-N-benzoyl-3-fenylisoserinem [33069-62-4].
Paklitaxel obsahuje ne méně než 97,0 procent a ne více než 102,0 procent C47H51NO14, počítáno na bezvodou bázi bez rozpouštědla.
[Pozor – paklitaxel je cytotoxický.Je třeba věnovat velkou pozornost tomu, aby se zabránilo vdechnutí částic paclitaxelu a vystavení pokožky tomuto působení.]
Balení a skladování – Uchovávejte v těsných, světlu odolných nádobách a skladujte při kontrolované pokojové teplotě.
Označení – Označení označuje typ procesu použitého k výrobě materiálu a test souvisejících sloučenin, kterému materiál vyhovuje.
Referenční standardy USP <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS Kliknutím zobrazíte strukturu
USP Sloučenina A RS související s paclitaxelem
Cefalomanin.
USP Sloučenina B RS související s paclitaxelem
10-deacetyl-7-epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Impurity Mixture RS
Směs paklitaxelu a následujících příbuzných sloučenin: propylový analog, cefalomanin, sek-butylový analog, n-butylový analog, benzylový analog, baccatin VI, pentylový analog a 7-epipaclitaxel.
Identifikace-
A: Infračervená absorpce <197K>.
B: Retenční čas hlavního píku na chromatogramu preparátu testu odpovídá času na chromatogramu standardního přípravku získaného v testu.
Specifická rotace 781S: mezi 49,0 a 55,0 při 20 °C, vypočteno na bezvodé bázi bez rozpouštědla.
Testovaný roztok: 10 mg na ml, v methanolu.
Testy na stanovení počtu mikroorganismů <61> a Testy na specifické mikroorganismy <62> - Celkový počet aerobních mikroorganismů nepřesahuje 100 cfu na gram.Splňuje požadavky testů na nepřítomnost Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella species a Escherichia coli.
Bakteriální endotoxiny 85-Neobsahuje více než 0,4 USP endotoxinové jednotky na mg paclitaxelu.
Voda, metoda Ic <921>: ne více než 4,0 %.
Zbytek po zapálení <281>: ne více než 0,2 %.
Těžké kovy, metoda II <231>: 0,002 %.
Související sloučeniny-
test 1 (pro materiál označený jako izolovaný z přírodních zdrojů) – Pokud materiál vyhovuje tomuto testu, označení udává, že splňuje test 1 sloučenin souvisejících s USP.
Ředidlo – připravte podle pokynů v testu.
Roztok A-Připravte filtrovaný a odplyněný acetonitril.
Roztok B-Připravte filtrovanou a odplyněnou vodu.
Mobilní fáze - Použijte variabilní směsi roztoku A a roztoku B podle pokynů pro chromatografický systém.V případě potřeby proveďte úpravy (viz Vhodnost systému v části Chromatografie 621).
Roztok vhodnosti pro systém - Přesně odvážená množství sloučeniny A RS související s paclitaxelem podle USP a sloučeniny B RS související s paclitaxelem podle USP v methanolu, abyste získali roztok se známými koncentracemi asi 10 ug každého na ml.Přeneste 5,0 ml tohoto roztoku do 50ml odměrné baňky, zřeďte ředidlem na požadovaný objem a promíchejte.
Standardní roztok - Rozpusťte pomocí sonikace přesně odvážené množství USP Paclitaxel RS v ředidle a kvantitativně a v případě potřeby postupně zřeďte ředidlem, abyste získali roztok o známé koncentraci asi 5 ug na ml.
Testovací roztok – Použijte přípravek testu.
Chromatografický systém (viz Chromatografie <621>) - Kapalinový chromatograf je vybaven 227 nm detektorem a kolonou 4,6 mm x 25 cm, která obsahuje 5 µm náplň L43.Průtok je asi 2,6 ml za minutu.Teplota kolony se udržuje na 30 °C. Chromatograf je naprogramován následovně.
Čas (minuty) Roztok A (%) Roztok B (%) Eluce
0–35 35 65 izokratický
35–60 35®80 65®20 lineární gradient
60–70 80®35 20®65 lineární gradient
70–80 35 65 izokratická chromatografie roztoku vhodného pro systém a zaznamenejte odezvy píku podle pokynů pro Postup: relativní retenční časy jsou asi 0,78 pro sloučeninu A související s paclitaxelem a 0,86 pro sloučeninu související s paclitaxelem B (vzhledem k retenčnímu času pro paclitaxel získaný z testovací roztok);a rozlišení R mezi paclitaxelem příbuznou sloučeninou A a paclitaxelem příbuznou sloučeninou B není menší než 1,0.Chromatografujte standardní roztok a zaznamenejte maximální odezvy podle pokynů pro Postup: relativní směrodatná odchylka pro replikované nástřiky není větší než 2,0 %.
Postup - Nastříkněte objem (asi 15 µl) zkušebního roztoku do chromatografu, zaznamenejte chromatogram a změřte plochy hlavních píků.Vypočítejte procento každé nečistoty v části paklitaxelu podle vzorce:
100 (pá / rU)
kde F je relativní faktor odezvy pro každý pík nečistoty (hodnoty viz Tabulka 1);ri je plocha píku pro každou jednotlivou nečistotu;a rU je oblast píku pro paclitaxel.
stůl 1
Relativní doba uchování Faktor relativní odezvy (F) Název Limit (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-Xylosylpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomanin (sloučenina A související s paklitaxelem) a11
0,78 1,26 2'',3''-dihydrocefalomannin a21
0,86 1,00 10-deacetyl-7-epipaclitaxel (sloučenina B související s paklitaxelem) 0,5
1,10 1,00 Benzyl analog3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-epicefalomannin 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Rozlišení může být pro tyto píky neúplné, v závislosti na relativních přítomných množstvích;součet a1 a a2 není větší než 0,5 %.
2 Rozlišení může být pro tyto píky neúplné, v závislosti na relativních přítomných množstvích;součet b1 a b2 není větší než 0,5 %.
3 Následující chemický název je přiřazen příbuzné sloučenině, benzylovému analogu: 13-ester Baccatinu III s kyselinou (2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(2-fenylacetylamino)propanovou.
Kromě nepřekročení limitů pro nečistoty související s paclitaxelem v tabulce 1 nebylo zjištěno více než 0,1 % jakékoli jiné jednotlivé nečistoty;a není nalezeno více než 2,0 % celkových nečistot.
test 2 (pro materiál označený jako vyrobený polosyntetickým procesem)— Pokud materiál vyhovuje tomuto testu, označení udává, že splňuje test 2 souvisejících sloučenin podle USP.
Ředidlo – použijte acetonitril.
Roztok A – Použijte filtrovanou a odplyněnou směs vody a acetonitrilu (3:2).
Roztok B-Použijte filtrovaný a odplyněný acetonitril.
Mobilní fáze - Použijte variabilní směsi roztoku A a roztoku B podle pokynů pro chromatografický systém.V případě potřeby proveďte úpravy (viz Vhodnost systému v části Chromatografie 621).
Roztok vhodný pro systém - Rozpusťte přesně odvážená množství USP Paclitaxel RS a USP Paclitaxel Related Compound B RS v ředidle, v případě potřeby protřepejte a sonikujte, abyste získali roztok se známými koncentracemi přibližně 0,96 mg a 0,008 mg na ml, v daném pořadí.
Testovací roztok – Přeneste přibližně 10 mg přesně zváženého paclitaxelu do 10ml odměrné baňky, rozpusťte a nařeďte ředidlem na požadovaný objem, v případě potřeby protřepejte a sonikujte a promíchejte.
Chromatografický systém (viz Chromatography 621) — Kapalinový chromatograf je vybaven detektorem 227 nm a kolonou 4,6 mm × 15 cm, která obsahuje 3 µm náplň L1.Průtok je asi 1,2 ml za minutu.Teplota kolony se udržuje na 35 °C. Chromatograf je naprogramován následovně.
Čas (minuty) Roztok A (%) Roztok B (%) Eluce
0-20 100 0 izokratický
20-60 100®100®90 lineární gradient
60-62 10®100 90®0 lineární gradient
62-70 100 0 izokratická chromatografie roztoku vhodného pro systém a zaznamenejte odezvy píku podle pokynů pro postup: relativní retenční časy jsou přibližně 0,94 pro sloučeninu B související s paclitaxelem a 1,0 pro paclitaxel;rozlišení R mezi paclitaxelovou sloučeninou B a paclitaxelem není menší než 1,2;a relativní směrodatná odchylka pro opakované injekce není větší než 2,0 %.
Postup – Samostatně vstříkněte stejné objemy (asi 15 µl) ředidla a testovacího roztoku do chromatografu, zaznamenejte chromatogramy a změřte plochy všech píků.Neberte v úvahu žádné píky způsobené ředidlem.Vypočítejte procento každé nečistoty v části paklitaxelu podle vzorce:
100 (pá / rs)
kde F je relativní faktor odezvy pro každou nečistotu (hodnoty viz tabulka 2);ri je plocha píku pro každou nečistotu získanou ze zkušebního roztoku;a rs je součet ploch všech píků získaných ze zkušebního roztoku.
Tabulka 2
Relativní doba uchování Faktor relativní odezvy (F) Název Limit (%)
0,11 1,24 10-deacetylbaccatin III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-debenzoylpaclitaxel-2-pentenoát 0,7
0,921 1,00 Oxetanový kruh otevřen, acetyl a benzoyl migrován 2 x 1
0,921 1,00 10-Acetoacetylpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-deacetyl-7-epipaclitaxel (sloučenina B související s paklitaxelem) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetylpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 Rozlišení může být pro tyto píky neúplné, v závislosti na relativních přítomných množstvích;součet x1, x2 a x3 není větší než 0,4 %.
2 Následující chemické názvy jsou přiřazeny souvisejícím sloučeninám Fotodegradant;Oxetanový kruh se otevřel, acetyl a benzoyl migrovaly;a 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradant
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloxy-5,13-dihydroxy-4,16,17,17-tetramethyl-8-oxa- 3-oxo-12-fenylkarbonyloxypentacyklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propanoát
Oxetanový kruh se otevřel, acetyl a benzoyl migrovaly
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetyloxy-1,2,4,7-tetrahydroxy-8,12,15,15-tetramethyl-9-oxo- 4-(fenylkarbonyloxymethyl)tricyklo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propanoát
10,13-Bissidechainpaclitaxel
Baccatin III 13-ester s kyselinou (2R,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino)propanovou, 10-ester s (2S,3S)-2-hydroxy-3-fenyl-3-(fenylkarbonylamino) ) kyselina propanová
Kromě nepřekročení limitů pro nečistoty související s paclitaxelem v tabulce 2 nebylo zjištěno více než 0,1 % jakékoli jiné jednotlivé nečistoty;a není nalezeno více než 2,0 % celkových nečistot.
test 3 (pro materiál označený jako vyrobený procesem fermentace rostlinných buněk)— Pokud materiál vyhovuje tomuto testu, označení znamená, že splňuje test 3 sloučenin souvisejících s USP.
Roztok A-Připravte zfiltrovanou a odplyněnou směs vody a acetonitrilu (3:2).
Roztok B-Připravte filtrovaný a odplyněný acetonitril.
Mobilní fáze - Použijte variabilní směsi roztoku A a roztoku B podle pokynů pro chromatografický systém.V případě potřeby proveďte úpravy (viz Vhodnost systému v části Chromatografie 621).
Roztok vhodný pro systém – Rozpusťte USP Paclitaxel Impurity Mixture RS v acetonitrilu, v případě potřeby sonikujte, abyste získali roztok o známé koncentraci asi 1 mg na ml.
Standardní roztok – Rozpusťte přesně odvážené množství USP Paclitaxel RS v acetonitrilu, v případě potřeby sonikujte, abyste získali roztok o známé koncentraci asi 1 mg na ml.
Testovací roztok - Přeneste přibližně 10 mg paclitaxelu, přesně odváženého, ​​do 10ml odměrné baňky.Rozpusťte a zřeďte acetonitrilem na objem, v případě potřeby sonikujte a promíchejte.
Chromatografický systém (viz Chromatography 621) — Kapalinový chromatograf je vybaven detektorem 227 nm a kolonou 4,6 mm × 15 cm, která obsahuje 3 µm náplň L1.Průtok je asi 1,2 ml za minutu.Chromatograf je naprogramován následovně.
Čas (minuty) Roztok A (%) Roztok B (%) Eluce
0-28 100 0 izokratický
28-33 100®98 0®2 lineární gradient
33–58 98®10 2®90 lineární gradient
58-60 10 90 izokratický
60-63 10®100 90®0 lineární gradient
63-70 100 0 izokratická chromatografie roztoku vhodného pro systém a zaznamenejte odezvy píku podle pokynů pro postup: rozlišení R mezi paclitaxelem a benzylovým analogem není menší než 1,8.Chromatografujte standardní roztok a zaznamenejte maximální odezvy podle pokynů pro Postup: relativní směrodatná odchylka pro replikované nástřiky není větší než 2,0 %.[poznámka - Pro účely identifikace píku jsou přibližné relativní retenční časy uvedeny v tabulce 3. Relativní retenční časy jsou měřeny proti paclitaxelu.]
Tabulka 3
Limit relativní doby uchování jména (%)
Propyl analog1 0,54 0,2
Cefalomannin (sloučenina A související s paklitaxelem) 0,76 0,5
sek-butyl analog2 0,81 0,2
n-butyl analog3 0,89 0,1
Benzyl analog 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentyl analog4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Následující chemický název je přiřazen příbuzné sloučenině Propylový analog: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2R,3S)-3-butanoylamino-2-hydroxy-3-fenylpropanovou.
2 Následující chemický název je přiřazen příbuzné sloučenině sek-butylový analog: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2R,3S)-2-hydroxy-3-(2-methylbutanoylamino)-3-fenylpropanovou.
3 Následující chemický název je přiřazen příbuzné sloučenině n-butylový analog: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2S,3S)-2-hydroxy-3-(pentanoylamino)-3-fenylpropanovou.
4 Následující chemický název je přiřazen příbuzné sloučenině pentylový analog: 13-ester baccatinu III s kyselinou (2R,3S)-3-(hexanoylamino)-2-hydroxy-3-fenylpropanovou.
Postup - Nastříkněte objem (asi 12 µl) zkušebního roztoku do chromatografu, zaznamenejte chromatogram a změřte plochy všech píků.Vypočítejte procento každé nečistoty v části paklitaxelu podle vzorce:
100 (ri / rU)
kde ri je odezva každé jednotlivé nečistoty;a rU je součet ploch všech píků získaných ze zkušebního roztoku.Kromě nepřekročení limitů pro nečistoty související s paclitaxelem v tabulce 3 nebylo zjištěno více než 0,1 % jakékoli jiné jednotlivé nečistoty;a není nalezeno více než 2,0 % celkových nečistot.
Zkouška-
Ředidlo - Připravte směs methanolu a kyseliny octové (200:1).
Mobilní fáze - Připravte zfiltrovanou a odplyněnou směs vody a acetonitrilu (11:9).V případě potřeby proveďte úpravy (viz Vhodnost systému v části Chromatografie 621).
Standardní příprava - Rozpusťte, v případě potřeby sonikací, přesně odvážené množství USP Paclitaxel RS v ředidle a kvantitativně a v případě potřeby postupně zřeďte ředidlem, abyste získali roztok o známé koncentraci asi 1 mg na ml.
Příprava testu - Přeneste přibližně 10 mg paclitaxelu, přesně odváženého, ​​do 10ml odměrné baňky.Rozpusťte v Diluentu, v případě potřeby použijte sonikaci, nařeďte Diluentem na požadovaný objem a promíchejte.
Chromatografický systém (viz Chromatografie <621>) - Kapalinový chromatograf je vybaven 227 nm detektorem a kolonou 4,6 mm x 25 cm, která obsahuje 5 µm náplň L43.Průtok je asi 1,5 ml za minutu.Chromatografujte standardní přípravek a zaznamenejte odezvy píku podle pokynů pro postup: faktor tailingu je mezi 0,7 a 1,3;a relativní směrodatná odchylka pro opakované injekce není větší než 1,5 %.
Postup – Samostatně nastříkněte stejné objemy (asi 10 µl) standardního přípravku a přípravku testu do chromatografu, zaznamenejte chromatogramy a změřte plochy hlavních píků.Vypočítejte množství C47H51NO14 v mg v části paklitaxelu podle vzorce:
10C(rU / rS)
ve kterém C je koncentrace, v mg na ml, USP Paclitaxel RS ve standardním přípravku;a rU a rS jsou maximální odezvy pro paclitaxel získané z testovacího přípravku a standardního přípravku, v daném pořadí.