Ursodeoxycholová kyselina (UDCA) CAS 128-13-2 test 99,0~101,0 %

KYSELINA URSODEOXYCHOLOVÁ
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
DEFINICE
3a,7p-dihydroxy-5p-cholan-24-ová kyselina.
Obsah: 99,0 % až 101,0 % (sušená látka).
POSTAVY
Vzhled: bílý nebo téměř bílý prášek.
Rozpustnost: prakticky nerozpustný ve vodě, snadno rozpustný v lihu 96%, těžce rozpustný v acetonu, prakticky nerozpustný v dichlormethanu.
mp: asi 202 ℃.
IDENTIFIKACE
První identifikace: A.
Druhá identifikace: B, C.
A. Infračervená absorpční spektrofotometrie (2.2.24).
Srovnání: Ursodeoxycholová kyselina CRS.
Hodnotí se chromatogramy získané ve zkoušce Nečistota C.
Výsledky: Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (b) je polohou, barvou a velikostí podobná hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
Asi 10 mg se rozpustí v 1 ml kyseliny sírové R, přidá se 0,1 ml formaldehydu RS a nechá se 5 min stát.Přidá se 5 ml vody R. Získaná suspenze je zelenomodrá.
TESTY
Specifická optická otáčivost (2.2.7): + 58,0 až + 62,0 (sušená látka).
0,500 g se rozpustí v ethanolu bezvodém R a zředí se stejným rozpouštědlem na 25,0 ml.
Nečistota C. Chromatografie na tenké vrstvě (2.2.27).
Směs rozpouštědel: voda R, aceton R (10:90 V/V).
Zkušební roztok (a).0,40 g zkoušené látky se rozpustí ve směsi rozpouštědel a zředí se směsí rozpouštědel na 10 ml.
Zkušební roztok (b).Zřeďte 1 ml zkušebního roztoku (a) na 10 ml směsí rozpouštědel.
Porovnávací roztok (a).40 mg kyseliny ursodeoxycholové CRL se rozpustí ve směsi rozpouštědel a zředí se směsí rozpouštědel na 10 ml.
Porovnávací roztok (b).Ve směsi rozpouštědel se rozpustí 20 mg kyseliny lithocholové CRL (nečistota C) a zředí se směsí rozpouštědel (roztok A) na 10,0 ml.2,0 ml tohoto roztoku se zředí na 100,0 ml směsí rozpouštědel.
Porovnávací roztok (c).K 5 ml roztoku A se přidá 10 mg kyseliny chenodeoxycholové CRS (nečistota A) a směs se zředí na 50 ml.
Deska: TLC silikagelová deska R.
Mobilní fáze: ledová kyselina octová R, aceton R, methylenchlorid R (1:30:60 V/V/V).
Aplikace: 5μL.
Vývoj: přes 2/3 desky.
Sušení: při 120 °C po dobu 10 minut.
Důkaz: Ihned se postříká roztokem kyseliny fosfomolybdenové R (47,6 g/l) ve směsi objemových dílů kyseliny sírové R a kyseliny octové ledové R (1 + 20) a zahřívá se při 120 °C, dokud se na světlejším pozadí neobjeví modré skvrny.
Vhodnost systému: referenční roztok (c):
- chromatogram ukazuje 2 jasně oddělené hlavní skvrny.
Limit: testovací roztok (a):
-nečistota C: žádná skvrna způsobená nečistotou C není intenzivnější než hlavní skvrna na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,1 %).
Příbuzné látky.Kapalinová chromatografie (2.2.29).
Směs rozpouštědel: methanol R, mobilní fáze (10:90 V/V).
Testovací roztok.60 mg zkoušené látky se rozpustí ve směsi rozpouštědel a zředí se směsí rozpouštědel na 20,0 ml.
Porovnávací roztok (a).Rozpusťte obsah lahvičky s kyselinou ursodeoxycholovou pro vhodnost systému CRS (obsahující nečistoty A a H) v 1,0 ml směsi rozpouštědel.
Porovnávací roztok (b).Zřeďte 1,0 ml testovaného roztoku na 100,0 ml směsí rozpouštědel.1,0 ml tohoto roztoku se zředí na 10,0 ml směsí rozpouštědel.
Sloupec:
-rozměr: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stacionární fáze: na konci uzavřený oktadecylsilyl silikagel prochromatografie R (5 um);
- teplota: 40 ℃ ± 1 ℃.
Mobilní fáze: smíchá se 30 objemových dílů acetonitrilu R, 37 objemových dílů roztoku 0,78 g/l dihydrogenfosforečnanu sodného R upraveného na pH 3 kyselinou fosforečnou R a 40 objemových dílů methanolu R.
Průtok: 0,8 ml/min.
Detekce: refraktometr při 35 ± 1℃.
Injekce: 150 μL.
Doba zpracování: 4násobek retenčního času kyseliny ursodeoxycholové.
Identifikace nečistot: k identifikaci píků nečistot A a H se použije chromatogram dodaný s kyselinou ursodeoxycholovou pro vhodnost systému CRL a chromatogram porovnávacího roztoku (a).
Relativní retence vzhledem ke kyselině ursodeoxycholové (doba retence = přibližně 14 minut): nečistota H = přibližně 0,9;nečistota A = asi 2,8.
Vhodnost systému: referenční roztok (a):
-rozlišení: minimálně 1,5 mezi píky v důsledku nečistoty H a kyseliny ursodeoxycholové.
Limity:
- nečistota A: ne více než 10násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (1,0 %);
-nespecifikované nečistoty: pro každou nečistotu nejvýše plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,10 %);
- celkem: ne více než 15násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (1,5 %);
- nerespektovat limit: 0,5násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,05 %).
Těžké kovy (2.4.8): maximálně 20 ppm.
1,0 g vyhovuje zkoušce C. Porovnávací roztok se připraví za použití 2 ml základního roztoku olova (10 µg Pb/ml).
Ztráta sušením (2.2.32): maximálně 1,0 %, stanoveno na 1,000 g sušením v sušárně při 105 °C.
Síranový popel (2.4.14): maximálně 0,1 %, stanoveno s 1,0 g.
TEST
0,350 g se rozpustí v 50 ml ethanolu (96%) R, předem zneutralizovaného na 0,2 ml fenolftaleinu RS. Přidá se 50 ml vody R a titruje se hydroxidem sodným 0,1 mol/l VS do růžového zbarvení.
1 ml 0,1 M hydroxidu sodného odpovídá 39,26 mg C24H40O4.
NEČISTOTY
Specifikované nečistoty: A, C.
Jiné zjistitelné nečistoty (následující látky by, pokud by byly přítomny na dostatečné úrovni, byly detekovány jedním nebo druhým z testů v monografii. Jsou omezeny obecným kritériem přijatelnosti pro jiné/nespecifikované nečistoty a/nebo obecnou monografií Látky pro farmaceutické použití (2034). Pro prokázání shody proto není nutné tyto nečistoty identifikovat.Viz také 5.10.
Kontrola nečistot v látkách pro farmaceutické použití: B, D, E, F, G, H, I.
A. Kyselina 3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-24-ová (kyselina chenodeoxycholová),
B. Kyselina 3a,7a,12a-trihydroxy-5p-cholan-24-ová (kyselina cholová),
C. 3α-hydroxy-5β-cholan-24-ová kyselina (lithocholová kyselina),
D. Kyselina 3α,7β,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-ová (kyselina ursocholová),
E. kyselina 3a,12a-dihydroxy-5p-cholan-24-ová (kyselina deoxycholová),
F. kyselina 3a-hydroxy-7-oxo-5p-cholan-24-ová,
G. methyl-3a,7p-dihydroxy-5p-cholan-24-oát,
H. kyselina 3p,7p-dihydroxy-5p-cholan-24-ová,
I. 5p-cholan-3a,7p,24-triol.