Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 Assay (HPLC) 97,0~102,0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
Benzenpropansyre, -(benzoylamino)-hydroxy-, 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahydro-4,11-dihydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methan-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-yl ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahydro-4,6, 9,11,12,12b-hexahydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-7,11-methano-5H-cyclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-on 6, 12b-diacetat, 12-benzoat, 9-ester med (2R,3S)-N-benzoyl-3-phenylisoserin [33069-62-4].
Paclitaxel indeholder ikke mindre end 97,0 procent og ikke mere end 102,0 procent af C47H51NO14, beregnet på den vandfri, opløsningsmiddelfri basis.
[Forsigtig-Paclitaxel er cytotoksisk.Der skal udvises stor omhu for at forhindre indånding af partikler af Paclitaxel og at udsætte huden for det.]
Emballering og opbevaring - Opbevar i tætte, lysbestandige beholdere og opbevares ved kontrolleret stuetemperatur.
Mærkning - Mærkningen angiver den type proces, der er brugt til at fremstille materialet, og testen af ​​relaterede forbindelser, som materialet overholder.
USP-referencestandarder <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS Klik for at se struktur
USP Paclitaxel-relateret forbindelse A RS
Cephalomannin.
USP Paclitaxel-relateret forbindelse B RS
10-deacetyl-7-epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Urenhedsblanding RS
Blanding af Paclitaxel og følgende relaterede forbindelser: propylanalog, cephalomannin, sec-butylanalog, n-butylanalog, benzylanalog, baccatin VI, pentylanalog og 7-epipaclitaxel.
Identifikation-
A: Infrarød absorption <197K>.
B: Retentionstiden for hovedtoppen i kromatogrammet af analysepræparatet svarer til den i kromatogrammet for standardpræparatet, som opnået i analysen.
Specifik rotation 781S: mellem 49,0 og 55,0 ved 20, beregnet på vandfri, opløsningsmiddelfri basis.
Testopløsning: 10 mg pr. ml, i methanol.
Mikrobiel optællingstest <61> og test for specificerede mikroorganismer <62>-Det samlede aerobe mikrobielle antal overstiger ikke 100 cfu pr. g.Det opfylder kravene i testene for fravær af Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella-arter og Escherichia coli.
Bakterielle endotoksiner 85-Det indeholder ikke mere end 0,4 USP endotoksinenheder pr. mg paclitaxel.
Vand, Metode Ic <921>: ikke mere end 4,0 %.
Rester ved antænding <281>: ikke mere end 0,2 %.
Tungmetaller, Metode II <231>: 0,002%.
Relaterede forbindelser-
test 1 (for materiale mærket som isoleret fra naturlige kilder) - Hvis materialet overholder denne test, indikerer mærkningen, at det opfylder USP-relaterede forbindelser test 1.
Diluent-Forbered som anvist i analysen.
Opløsning A-Forbered filtreret og afgasset acetonitril.
Opløsning B-Forbered filtreret og afgasset vand.
Mobil fase-Brug variable blandinger af opløsning A og opløsning B som anvist for det kromatografiske system.Foretag justeringer om nødvendigt (se Systemegnethed under Kromatografi 621).
Systemegnet opløsning - Opløs nøjagtigt afvejede mængder af USP Paclitaxel-relateret forbindelse A RS og USP Paclitaxel-relateret forbindelse B RS i methanol for at opnå en opløsning med kendte koncentrationer på ca. 10 µg af hver pr. ml.Overfør 5,0 ml af denne opløsning til en 50 ml målekolbe, fortynd med Diluent til volumen og bland.
Standardopløsning - Opløs ved hjælp af sonikering en nøjagtigt afvejet mængde USP Paclitaxel RS i fortyndingsmiddel, og fortynd kvantitativt og trinvist om nødvendigt med fortyndingsmiddel for at opnå en opløsning med en kendt koncentration på ca. 5 µg pr. ml.
Testopløsning - Brug analysepræparatet.
Kromatografisk system (se kromatografi <621>)-Væskekromatografen er udstyret med en 227-nm-detektor og en 4,6 mm × 25-cm søjle, der indeholder 5-µm pakning L43.Strømningshastigheden er ca. 2,6 ml pr. minut.Søjletemperaturen holdes på 30°C. Kromatografen programmeres som følger.
Tid (minutter) Opløsning A (%) Opløsning B (%) Eluering
0–35 35 65 isokratisk
35–60 35®80 65®20 lineær gradient
60–70 80®35 20®65 lineær gradient
70–80 35 65 isokratiskKromatografer systemegnethedsopløsningen, og registrer topresponserne som anvist for Procedure: de relative retentionstider er ca. 0,78 for paclitaxel-relateret forbindelse A og 0,86 for paclitaxel-relateret forbindelse B (i forhold til retentionstiden for paclitaxel opnået fra testløsningen);og opløsningen, R, mellem paclitaxel-relaterede forbindelse A og paclitaxel-relaterede forbindelse B er ikke mindre end 1,0.Kromatografer standardopløsningen, og noter topresponserne som anvist for Procedure: den relative standardafvigelse for replikatinjektioner er ikke mere end 2,0 %.
Fremgangsmåde - Injicer et volumen (ca. 15 µL) af testopløsningen i kromatografen, optag kromatogrammet, og mål områderne for de største toppe.Beregn procentdelen af ​​hver urenhed i den del af Paclitaxel, der tages med formlen:
100 (fre/rU)
hvor F er den relative responsfaktor for hver urenhedstop (se tabel 1 for værdier);ri er toparealet for hver enkelt urenhed;og rU er toparealet for paclitaxel.
tabel 1
Relativ opbevaringstid Relativ responsfaktor (F) Navnegrænse (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-xylosylpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cephalomannin (Paclitaxel-relateret forbindelse A) a11
0,78 1,26 2'',3''-dihydrocephalomannin a21
0,86 1,00 10-deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel-relateret forbindelse B) 0,5
1,10 1,00 Benzylanalog3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicephalomannin 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Opløsningen kan være ufuldstændig for disse toppe, afhængigt af de relative mængder til stede;summen af ​​a1 og a2 er ikke mere end 0,5 %.
2 Opløsningen kan være ufuldstændig for disse toppe, afhængigt af de relative tilstedeværende mængder;summen af ​​b1 og b2 er ikke mere end 0,5 %.
3 Følgende kemiske navn er tildelt den relaterede forbindelse, benzylanalog: Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(2-phenylacetylamino)propansyre.
Ud over ikke at overskride grænserne for paclitaxel-relaterede urenheder i tabel 1, findes der ikke mere end 0,1 % af enhver anden enkelt urenhed;og ikke mere end 2,0 % af de samlede urenheder findes.
test 2 (for materiale mærket som fremstillet ved en semisyntetisk proces)— Hvis materialet overholder denne test, angiver mærkningen, at det opfylder USP-relaterede forbindelser Test 2.
Fortyndingsmiddel - Brug acetonitril.
Opløsning A-Brug en filtreret og afgasset blanding af vand og acetonitril (3:2).
Opløsning B-Brug filtreret og afgasset acetonitril.
Mobil fase-Brug variable blandinger af opløsning A og opløsning B som anvist for det kromatografiske system.Foretag justeringer om nødvendigt (se Systemegnethed under Kromatografi 621).
Systemegnede opløsning - Opløs nøjagtigt afvejede mængder af USP Paclitaxel RS og USP Paclitaxel-relateret forbindelse B RS i fortyndingsmiddel, ryst og soniker om nødvendigt for at opnå en opløsning med kendte koncentrationer på henholdsvis ca. 0,96 mg og 0,008 mg pr. ml.
Testopløsning - Overfør ca. 10 mg Paclitaxel, nøjagtigt vejet, til en 10 ml målekolbe, opløs i og fortynd med Diluent til volumen, ryst og soniker om nødvendigt, og bland.
Kromatografisk system (se kromatografi 621) — Væskekromatografen er udstyret med en 227-nm detektor og en 4,6 mm × 15 cm søjle, der indeholder 3-µm pakning L1.Strømningshastigheden er omkring 1,2 ml pr. minut.Søjletemperaturen holdes på 35°C. Kromatografen programmeres som følger.
Tid (minutter) Opløsning A (%) Opløsning B (%) Eluering
0-20 100 0 isokratisk
20-60 100®10 0®90 lineær gradient
60-62 10®100 90®0 lineær gradient
62-70 100 0 isokratiskKromatografer systemegnethedsopløsningen, og noter topresponserne som anvist for Procedure: de relative retentionstider er ca. 0,94 for paclitaxel-relateret forbindelse B og 1,0 for paclitaxel;opløsningen, R, mellem paclitaxel-relateret forbindelse B og paclitaxel er ikke mindre end 1,2;og den relative standardafvigelse for gentagne injektioner er ikke mere end 2,0 %.
Fremgangsmåde - Injicer lige store volumener (ca. 15 µL) af fortyndingsmidlet og testopløsningen separat i kromatografen, optag kromatogrammerne, og mål arealerne for alle toppe.Se bort fra eventuelle toppe på grund af fortyndingsmidlet.Beregn procentdelen af ​​hver urenhed i den del af Paclitaxel, der tages med formlen:
100 (fre/rs)
hvor F er den relative responsfaktor for hver urenhed (se tabel 2 for værdier);ri er toparealet for hver urenhed opnået fra testopløsningen;og rs er summen af ​​arealerne af alle toppe opnået fra testopløsningen.
Tabel 2
Relativ opbevaringstid Relativ responsfaktor (F) Navnegrænse (%)
0,11 1,24 10-deacetylbaccatin III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Fotonedbrydningsmiddel2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoylpaclitaxel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Oxetanring åbnet, acetyl og benzoyl migreret 2 x 1
0,921 1,00 10-Acetoacetylpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel-relateret forbindelse B) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-acetylpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 Opløsningen kan være ufuldstændig for disse toppe, afhængigt af de relative mængder til stede;summen af ​​x1, x2 og x3 er ikke mere end 0,4 %.
2 Følgende kemiske navne er tildelt de beslægtede forbindelser Photodegradant;Oxetanring åbnet, acetyl og benzoyl migrerede;og 10,13-bissidekædepaclitaxel:
Fotonedbrydningsmiddel
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloxy-5,13-dihydroxy-4,16,17,17-tetramethyl-8-oxa- 3-oxo-12-phenylcarbonyloxypentacyclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoat
Oxetanring åbnet, acetyl og benzoyl migrerede
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetyloxy-1,2,4,7-tetrahydroxy-8,12,15,15-tetramethyl-9-oxo- 4-(phenylcarbonyloxymethyl)tricyclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoat
10,13-bissidekædepaclitaxel
Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propansyre, 10-ester med (2S,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino) )propansyre
Ud over ikke at overskride grænserne for paclitaxel-relaterede urenheder i tabel 2, findes der ikke mere end 0,1 % af enhver anden enkelt urenhed;og ikke mere end 2,0 % af de samlede urenheder findes.
test 3 (for materiale mærket som produceret ved en plantecellefermenteringsproces)— Hvis materialet overholder denne test, indikerer mærkningen, at det opfylder USP-relaterede forbindelser Test 3.
Opløsning A-Forbered en filtreret og afgasset blanding af vand og acetonitril (3:2).
Opløsning B-Forbered filtreret og afgasset acetonitril.
Mobil fase-Brug variable blandinger af opløsning A og opløsning B som anvist for det kromatografiske system.Foretag justeringer om nødvendigt (se Systemegnethed under Kromatografi 621).
Systemegnet opløsning - Opløs USP Paclitaxel Urenhedsblanding RS i acetonitril, soniker om nødvendigt for at opnå en opløsning med en kendt koncentration på ca. 1 mg pr. ml.
Standardopløsning - Opløs en nøjagtigt afvejet mængde USP Paclitaxel RS i acetonitril, soniker om nødvendigt for at opnå en opløsning med en kendt koncentration på ca. 1 mg pr. ml.
Testopløsning - Overfør ca. 10 mg Paclitaxel, nøjagtigt vejet, til en 10 ml målekolbe.Opløs i og fortynd med acetonitril til volumen, soniker om nødvendigt, og bland.
Kromatografisk system (se kromatografi 621) — Væskekromatografen er udstyret med en 227-nm detektor og en 4,6 mm × 15 cm søjle, der indeholder 3-µm pakning L1.Strømningshastigheden er omkring 1,2 ml pr. minut.Kromatografen er programmeret som følger.
Tid (minutter) Opløsning A (%) Opløsning B (%) Eluering
0-28 100 0 isokratisk
28-33 100®98 0®2 lineær gradient
33–58 98®10 2®90 lineær gradient
58-60 10 90 isokratisk
60-63 10®100 90®0 lineær gradient
63-70 100 0 isokratiskKromatografer systemegnethedsopløsningen, og noter topresponserne som anvist for Procedure: opløsningen, R, mellem paclitaxel og benzylanalog er ikke mindre end 1,8.Kromatografer standardopløsningen, og noter topresponserne som anvist for Procedure: den relative standardafvigelse for replikatinjektioner er ikke mere end 2,0 %.[note-Med henblik på topidentifikation er de omtrentlige relative retentionstider angivet i tabel 3. De relative retentionstider er målt versus Paclitaxel.]
Tabel 3
Navn Relativ opbevaringstidsgrænse (%)
Propylanalog1 0,54 0,2
Cephalomannin (Paclitaxel-relateret forbindelse A) 0,76 0,5
sec-butylanalog2 0,81 0,2
n-butylanalog3 0,89 0,1
Benzylanalog 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentylanalog4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Følgende kemiske navn er tildelt den relaterede forbindelse Propylanalog: Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-3-butanoylamino-2-hydroxy-3-phenylpropansyre.
2 Følgende kemiske navn er tildelt den relaterede forbindelse sec-Butylanalog: Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-2-hydroxy-3-(2-methylbutanoylamino)-3-phenylpropansyre.
3 Følgende kemiske navn er tildelt den beslægtede forbindelse n-Butylanalog: Baccatin III 13-ester med (2S,3S)-2-hydroxy-3-(pentanoylamino)-3-phenylpropansyre.
4 Følgende kemiske navn er tildelt den relaterede forbindelse Pentylanalog: Baccatin III 13-ester med (2R,3S)-3-(hexanoylamino)-2-hydroxy-3-phenylpropansyre.
Fremgangsmåde - Injicer et volumen (ca. 12 µL) af testopløsningen i kromatografen, optag kromatogrammet, og mål arealerne for alle toppe.Beregn procentdelen af ​​hver urenhed i den del af Paclitaxel, der tages med formlen:
100(ri/rU)
hvor ri er responsen af ​​hver enkelt urenhed;og rU er summen af ​​arealerne af alle toppe opnået fra testopløsningen.Ud over ikke at overskride grænserne for paclitaxel-relaterede urenheder i tabel 3, findes der ikke mere end 0,1 % af enhver anden enkelt urenhed;og ikke mere end 2,0 % af de samlede urenheder findes.
Assay-
Fortyndingsmiddel-Forbered en blanding af methanol og eddikesyre (200:1).
Mobil fase-Forbered en filtreret og afgasset blanding af vand og acetonitril (11:9).Foretag justeringer om nødvendigt (se Systemegnethed under Kromatografi 621).
Standardpræparat - Opløs, ved hjælp af sonikering om nødvendigt, en nøjagtigt afvejet mængde USP Paclitaxel RS i fortyndingsmiddel, og fortynd kvantitativt og trinvist om nødvendigt med fortyndingsmiddel for at opnå en opløsning med en kendt koncentration på ca. 1 mg pr. ml.
Analyseforberedelse - Overfør ca. 10 mg Paclitaxel, nøjagtigt vejet, til en 10 ml målekolbe.Opløs i fortynder, ved hjælp af lydbehandling om nødvendigt, fortynd med fortynder til volumen og bland.
Kromatografisk system (se kromatografi <621>)-Væskekromatografen er udstyret med en 227-nm-detektor og en 4,6 mm × 25-cm søjle, der indeholder 5-µm pakning L43.Strømningshastigheden er ca. 1,5 ml pr. minut.Kromatografer standardpræparatet, og noter peak-responserne som anvist for procedure: tailing-faktoren er mellem 0,7 og 1,3;og den relative standardafvigelse for gentagne injektioner er ikke mere end 1,5 %.
Fremgangsmåde - Injicer lige store volumener (ca. 10 µL) af standardpræparatet og analysepræparatet separat i kromatografen, optag kromatogrammerne, og mål områderne for de største toppe.Beregn mængden, i mg, af C47H51NO14 i den del af Paclitaxel, der tages med formlen:
10C(rU/rS)
hvori C er koncentrationen, i mg pr. ml, af USP Paclitaxel RS i standardpræparatet;og rU og rS er topresponserne for paclitaxel opnået fra henholdsvis analysepræparatet og standardpræparatet.