Glycyrrhetinsäure (Enoxolon) CAS 471-53-4-Test 98,0–101,0 % (Potentiometrie)

Allgemeine Hinweise
(Ph Eur-Monographie 1511)
C30H46O4 470,7 471-53-4
Aktion und Verwendung
Behandlung von gutartigen Magengeschwüren.
Ph Eur
DEFINITION
(20β)-3β-Hydroxy-11-oxo-olean-12-en-29-säure.
Inhalt
98,0 Prozent bis 101,0 Prozent (Trockensubstanz).
FIGUREN
Aussehen
Weißes oder fast weißes kristallines Pulver.
Löslichkeit
In Wasser praktisch unlöslich, in Ethanol löslich, in Methylenchlorid kaum löslich.
Es zeigt Polymorphismus (5.9).
IDENTIFIKATION
Erste Identifizierung A.
Zweite Identifikation B, C.
A. Untersuchen Sie mittels Infrarot-Absorptionsspektrophotometrie (2.2.24).
Vergleich Enoxolon CRS.
Sollten die im Festkörper erhaltenen Spektren Unterschiede aufweisen, löst man 0,2 g der zu untersuchenden Substanz und 0,2 g der Referenzsubstanz getrennt in 6 ml Ethanol R und kocht unter
1 h am Rückflusskühler stehen lassen und 6 ml Wasser R hinzufügen. Es bildet sich ein Niederschlag.Auf ca. 10℃ abkühlen lassen und mit Hilfe eines Vakuums filtrieren.Waschen Sie den Niederschlag mit 10 ml Alkohol R, trocknen Sie ihn im Ofen bei 80 °C und nehmen Sie neue Spektren auf.
B. Dünnschichtchromatographie (2.2.27).
Testlösung: 10 mg der zu untersuchenden Substanz in Methylenchlorid R lösen und mit dem gleichen Lösungsmittel auf 10 ml verdünnen.
Referenzlösung: 10 mg Enoxolon CRS in Methylenchlorid R auflösen und mit dem gleichen Lösungsmittel auf 10 ml verdünnen.
Platte TLC-Kieselgelplatte R.
Mobile Phase: Eisessig R, Aceton R, Methylenchlorid R (5:10:90 V/V/V).
Anwendung 5 µl.
Entwicklung Über 2/3 der Platte.
5 Min. an der Luft trocknen.
Detektion Mit Anisaldehydlösung R besprühen und 10 Minuten lang auf 100–105 °C erhitzen.Ergebnisse: Der Hauptfleck im mit der Testlösung erhaltenen Chromatogramm ähnelt in Position, Farbe und Größe dem Hauptfleck im mit der Referenz erhaltenen Chromatogramm
Lösung.
C. 50 mg in 10 ml Methylenchlorid R auflösen. Zu 2 ml dieser Lösung 1 ml Essigsäureanhydrid R und 0,3 ml Schwefelsäure R hinzufügen. Es entsteht eine rosa Farbe.
TESTS
Aussehen der Lösung
Die Lösung ist klar (2.2.1) und nicht intensiver gefärbt als die Referenzlösung Y6 (2.2.2, Methode II).
0,1 g in Ethanol R auflösen und mit dem gleichen Lösungsmittel auf 10 ml verdünnen.
Spezifische optische Drehung (2.2.7) + 145 bis + 154 (getrocknete Substanz).
0,50 g in Dioxan R lösen und mit dem gleichen Lösungsmittel auf 50,0 ml verdünnen.
Verwandte Substanzen
Flüssigkeitschromatographie (2.2.29).
Testlösung: 0,10 g der zu untersuchenden Substanz in der mobilen Phase lösen und mit der mobilen Phase auf 100,0 ml verdünnen.
Referenzlösung (a) 2,0 ml der Testlösung mit der mobilen Phase auf 100,0 ml verdünnen.
Referenzlösung (b) 5,0 ml Referenzlösung (a) mit der mobilen Phase auf 100,0 ml verdünnen.
Referenzlösung (c) 0,1 g 18α-Glycyrrhetinsäure R in Tetrahydrofuran R lösen und mit dem gleichen Lösungsmittel auf 100,0 ml verdünnen.Zu 2,0 ml der Lösung 2,0 ml der Testlösung hinzufügen und mit der mobilen Phase auf 100,0 ml verdünnen.
Spalte:
-Größe: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm,
-stationäre Phase: Octadecylsilyl-Kieselgel für die Chromatographie R (5 µm),
-Temperatur: 30℃.
Mobile Phase Mischen Sie 430 Volumina Tetrahydrofuran R und 570 Volumina einer 1,36 g/l-Lösung von Natriumacetat R, eingestellt auf pH 4,8 mit Eisessig R.
Durchflussrate 0,8 ml/min.
Detektionsspektrophotometer bei 250 nm.
Injektion 20 µl Schleifeninjektor;Injizieren Sie die Testlösung und die Referenzlösungen.
Laufzeit 4-mal so lang wie die Retentionszeit von Enoxolon.
Systemtauglichkeit:
-Auflösung: mindestens 2,0 zwischen den Peaks von Enoxolon und 18α-Glycyrrhetinsäure im Chromatogramm der Referenzlösung (c).
Grenzen:
- etwaige Verunreinigungen: nicht mehr als das Siebenfache der Fläche des Hauptpeaks im Chromatogramm der Referenzlösung (b) (0,7 %),
-gesamt: nicht mehr als die Fläche des Hauptpeaks im mit der Referenzlösung (a) erhaltenen Chromatogramm (2,0 %),
- Nichtbeachtungsgrenze: 0,5-fache Fläche des Hauptpeaks im Chromatogramm, das mit der Referenzlösung (b) erhalten wurde (0,05 %).
Schwermetalle (2.4.8) Maximal 20 ppm.
1,0 g entspricht Grenzwerttest F. Bereiten Sie den Standard mit 2 ml Bleistandardlösung (10 ppm Pb) R vor.
Trocknungsverlust (2.2.32) Maximal 0,5 Prozent, ermittelt an 1.000 g durch 4-stündiges Trocknen in einem Ofen bei 105 °C.
Sulfatasche (2.4.14) Maximal 0,2 Prozent, bestimmt auf 1,0 g.
TEST
0,330 g werden in 40 ml Dimethylformamid R gelöst. Mit 0,1 M Tetrabutylammoniumhydroxid titriert und der Endpunkt potentiometrisch bestimmt (2.2.20).Führen Sie eine Blindtitration durch.1 ml 0,1 M Tetrabutylammoniumhydroxid entspricht 47,07 mg C30H46O4
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VERUNREINIGUNGEN
A. (20β)-3β-Hydroxy-11-oxo-18α-olean-12-en-29-säure,
B. (4β,20β)-3β,23-Dihydroxy-11-oxo-olean-12-en-29-säure.
Ph Eur