Gewichtsverlust-Medikamentenreinheit 98,0~101,5 % Orlistat CAS 96829-58-2 API

Orlistat
C29H53NO5 495,73
l-Leucin, N-Formyl-, 1-[(3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl)methyl]dodecylester, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-Formyl-l-leucin, Ester mit (3S,4S)-3-hexyl-4-[(2S)-2-hydroxytridecyl]-2-oxetanon [96829-58-2].
DEFINITION
Orlistat enthält 98,0 % NLT und 101,5 % NMT von C29H53NO5, berechnet auf wasserfreier, lösungsmittelfreier Basis.
IDENTIFIKATION
• A. Infrarotabsorption <197M>
• B. Die Retentionszeit des Hauptpeaks der Probenlösung entspricht der der Standardlösung, wie sie im Test ermittelt wurde.
TEST
• Verfahren
[Hinweis: Vermeiden Sie die Verwendung von Plastikflaschen für die Zubereitung oder Aufbewahrung von Lösungen in dieser Analyse.]
Mobile Phase: Acetonitril, Phosphorsäure und Wasser (860: 0,05: 140)
Standardlösung: 0,5 mg/ml USP Orlistat RS in der mobilen Phase.Sofort nach der Zubereitung injizieren oder bei 5 Uhr lagern.
Probenlösung: 0,5 mg/ml Orlistat in der mobilen Phase.Sofort nach der Zubereitung injizieren oder bei 5 Uhr lagern.
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie <621>, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: UV 195
Säule: 3,9 mm × 15 cm;4-µm-Packung L1
Flussrate: 1,0 ml/min
Injektionsgröße: 20 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Standardlösung
Eignungsanforderungen
Relative Standardabweichung: NMT 2,0 %
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz von Orlistat (C29H53NO5) in der eingenommenen Portion Orlistat:
Ergebnis = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = Spitzenreaktion der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion der Standardlösung
CS = Konzentration von USP Orlistat RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Orlistat in der Probenlösung (mg/ml)
Akzeptanzkriterien: 98,0 %–101,5 % auf wasserfreier, lösungsmittelfreier Basis
VERUNREINIGUNGEN
Anorganische Verunreinigungen
• Glührückstand <281>: NMT 0,1 %
• Schwermetalle, Methode II <231>: 20 ppm
Organische Verunreinigungen
• Verfahren 1: Grenzwert der mit Orlistat verwandten Verbindung A
Standardlösung: 0,1 mg/ml USP Orlistat Related Compound A RS in Aceton
Probenlösung: 50 mg/ml Orlistat in Aceton
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie <621>, Dünnschichtchromatographie.)
Modus: TLC
Adsorptionsmittel: 0,25 mm dicke Schicht einer chromatographischen Kieselgelmischung
Auftragsvolumen: 10 µL
Entwicklungslösungsmittelsystem: Toluol und Ethylacetat (4:1)
Nachweislösung: 2,5 g Phosphomolybdänsäure und 1 g Cersulfat in einen 100-ml-Messkolben geben, darin auflösen und mit Methanol auf das Volumen verdünnen.
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Nehmen Sie die Platte heraus und trocknen Sie sie gründlich an der Luft.Besprühen Sie die getrocknete Platte mit Nachweislösung und legen Sie die Platte 30 Minuten lang in einen Ofen bei 120 °C.
Akzeptanzkriterien: Jeder sekundäre Fleck aus der Probenlösung, der der mit Orlistat verwandten Verbindung A entspricht, ist nicht intensiver als der entsprechende Fleck aus der Standardlösung (0,2 %).
• Verfahren 2: Grenzwert der mit Orlistat verwandten Verbindung B
Standardlösung: 0,025 mg/ml USP Orlistat Related Compound B RS in Methylenchlorid
Probenlösung: 50 mg/ml Orlistat in Methylenchlorid
Aufgesetzte Probenlösung: 50 mg/ml Orlistat in Standardlösung
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie <621>, Systemeignung.)
Modus: GC
Detektor: Flammenionisation
Säule: 0,32 mm x 30 m großes Quarzglas, beschichtet mit einer 0,25 µm großen G27-Stationärphase
Säulentemperatur: Siehe die Temperaturprogrammtabelle unten.
Anfangstemperatur () Temperaturrampe (/min) Endtemperatur () Haltezeit bei Endtemperatur (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Temperatur
Einspritzer: 270
Detektor: 280
Trägergas: Helium
Flussrate: 30 ml/min
Teilungsverhältnis: 10:1
Injektionsgröße: 2 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Standardlösung
Eignungsanforderungen
Relative Standardabweichung: NMT 10,0 %
Analyse
Proben: Probenlösung und angereicherte Probenlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz der mit Orlistat verwandten Verbindung B in der eingenommenen Portion Orlistat:
Ergebnis = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = Spitzenreaktion der mit Orlistat verwandten Verbindung B aus der Probenlösung
rSP = Peak-Reaktion der mit Orlistat verwandten Verbindung B aus der versetzten Probenlösung
CS = Konzentration der USP Orlistat-verwandten Verbindung B RS in der Standardlösung (mg/ml)
CT = Konzentration von Orlistat in der versetzten Probenlösung (mg/ml)
Akzeptanzkriterien: NMT 0,05 % der mit Orlistat verwandten Verbindung B werden gefunden.
• Verfahren 3
[Hinweis: Vermeiden Sie die Verwendung von Plastikflaschen für die Zubereitung oder Aufbewahrung von Lösungen in dieser Analyse.]
Mobile Phase, Standardlösung und Probenlösung: Bereiten Sie sie wie im Test beschrieben vor.
Systemeignungslösung: 10 µg/ml USP Orlistat RS, 0,1 µg/ml USP Orlistat Related Compound C RS und 0,25 µg/ml USP Orlistat Related Compound D RS in der mobilen Phase
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie <621>, Systemeignung.)
Gehen Sie wie im Test beschrieben vor, mit der Ausnahme, dass Sie die für das System geeignete Lösung chromatographieren.
Systemtauglichkeit
Beispiel: Systemgerechte Lösung
Eignungsanforderungen
Signal-Rausch-Verhältnis: NLT 3 für die Peaks der Orlistat-bezogenen Verbindung C und der Orlistat-bezogenen Verbindung D
Relative Standardabweichung: NMT 10,0 % für den Orlistat-Peak
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung in der eingenommenen Portion Orlistat:
Ergebnis = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = Spitzenreaktion für jede einzelne Verunreinigung aus der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion von USP Orlistat RS aus der Standardlösung
CS = Konzentration von USP Orlistat RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Orlistat in der Probenlösung (mg/ml)
F = relativer Reaktionsfaktor gemäß Verunreinigungstabelle 1
Akzeptanzkriterien: Siehe Verunreinigungstabelle 1.
Verunreinigungstabelle 1
Name Relative Retentionszeit Relativer Reaktionsfaktor Akzeptanzkriterien, NMT (%)
Formylleucinea 0,10 4,0 0,2
Orlistat-verwandte Verbindung C 0,13 33 0,05
Orlistat-Epimerb mit offenem Ring 0,44 1,0 0,2
Orlistat-verwandte Verbindung D* 0,90 – Berechnet in
Verfahren 4
Orlistat offener Ring Amidec* 0,90 – Berechnet in
Verfahren 4
Orlistat 1,00 - -
d-Leucin orlistatd 1,18 1,0 0,2
Einzelne nicht identifizierte Verunreinigung - 1,0 0,1
* Koeluiert in diesem LC-System, bestimmt mit Verfahren 4.
ein N-Formyl-l-leucin.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-Formylamino-4-methylpentanoyloxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecansäure.
c N-Formyl-l-leucin (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[1-phenyl-R-ethylcarbomoyl]nonyl]-dodecylester.
d N-Formyl-d-leucin (S)-1-[[(2S,3S)-3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl]methyl]dodecylester oder Enantiomer.
• Verfahren 4: Grenzwert der mit Orlistat verwandten Verbindung D
Mobile Phase: Methanol und Wasser (83:17)
Systemgeeignete Lösung: 4 mg/ml USP Orlistat RS bzw. 2,4 µg/ml USP Orlistat Related Compound D RS in Acetonitril
Standardlösung: 5,0 mg/ml USP Orlistat RS in Acetonitril
Probenlösung: 5,0 mg/ml Orlistat in Acetonitril
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie 621, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: 205 nm
Säule: 4,0 mm × 25 cm;5-µm-Packung L7
Flussrate: 0,6 ml/min
Injektionsgröße: 20 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Systemgerechte Lösung
Eignungsanforderungen
Signal-Rausch-Verhältnis: NLT 3 für den mit Orlistat verbundenen Peak der Verbindung D
Relative Standardabweichung: NMT 10,0 % für den Orlistat-Peak
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung in der eingenommenen Portion Orlistat:
Ergebnis = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = Spitzenreaktion für jede einzelne Verunreinigung aus der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion für USP Orlistat RS aus der Standardlösung
CS = Konzentration von USP Orlistat RS in der Standardlösung (µg/ml)
CU = Konzentration von Orlistat in der Probenlösung (µg/ml)
F = relativer Reaktionsfaktor gemäß Verunreinigungstabelle 2
Akzeptanzkriterien: Siehe Verunreinigungstabelle 2.
Verunreinigungstabelle 2
Name Relative Retentionszeit Relativer Reaktionsfaktor Akzeptanzkriterien, NMT (%)
Orlistat-verwandte Verbindung D 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1,00 - -
Orlistat offener Ring Amidea 1,25 4,3 0,1
ein N-Formyl-l-leucin-(S)-1-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[1-phenyl-R-ethylcarbomoyl]nonyl]-dodecylester.
• Verfahren 5: Grenzwert der mit Orlistat verwandten Verbindung E
Puffer: 0,4 N Boratlösung, eingestellt auf einen pH-Wert von 10,2
Derivatisierungsmittel: o-Phthaldehyd (OPA)-Lösung.[Hinweis: Wenn es nicht im Handel erhältlich ist, kann das Derivatisierungsmittel als jeweils 1 % 3-Mercaptopropionsäure und o-Phthaldialdehyd in 0,4 M Boratpufferlösung hergestellt werden.]
Lösung A: Übertragen Sie 4,1 g Natriumacetat-Trihydrat und 40 mg Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA) in einen 1-L-Messkolben.In 950 ml Wasser auflösen und mit 0,1 N Natriumhydroxid einen pH-Wert von 7,2 einstellen.Mit Wasser auf das Volumen verdünnen, 2,5 ml Tetrahydrofuran hinzufügen und mischen.Filtern und entgasen.
Lösung B: Übertragen Sie 2,7 g Natriumacetat-Trihydrat und 40 mg EDTA in einen 1-L-Messkolben.In 200 ml Wasser auflösen und mit 0,1 N Natriumhydroxid auf einen pH-Wert von 7,2 einstellen.800 ml Acetonitril hinzufügen, filtrieren und entgasen.
Mobile Phase: Siehe die Gradiententabelle unten.
Zeit (Min.) Lösung A (%) Lösung B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3.3
45 96,7 3.3
Standardlösung: Übertragen Sie eine abgewogene Menge von etwa 0,2 mg USP Orlistat-verwandter Verbindung E RS in ein 20-ml-Headspace-Fläschchen.Geben Sie 10 ml 4 N Natriumhydroxid hinzu und verschließen Sie das Fläschchen.Erhitzen Sie das Fläschchen 1 Stunde lang auf 100 °C und lassen Sie es dann auf Raumtemperatur abkühlen.Übertragen Sie 2 ml der resultierenden Lösung in einen 50-ml-Messkolben und verdünnen Sie ihn mit Wasser auf das Volumen.Zu 0,5 ml dieser Lösung 2,0 ml Puffer und 0,5 ml Derivatisierungsmittel hinzufügen.
Probenlösung: Gehen Sie wie für die Standardlösung beschrieben vor, verwenden Sie jedoch stattdessen 25 mg Orlistat, um die 0,2 mg USP Orlistat Related Compound E RS zu ersetzen.
Chromatographisches System
(Siehe Chromatographie <621>, Systemeignung.)
Modus: LC
Detektor: Fluoreszenz 340 nm (Anregung);450 nm (Emission)
Säulen
Schutz: 2,1 mm × 2 cm;50-µm-Packung L1
Analytisch: 2,1 mm × 20 cm;Verpackung L1
Flussrate: 0,5 ml/min
Injektionsgröße: 20 µL
Systemtauglichkeit
Beispiel: Standardlösung
Eignungsanforderungen
Relative Standardabweichung: NMT 6,0 % für den Orlistat-bezogenen Peak der Verbindung E
Analyse
Proben: Standardlösung und Musterlösung
Berechnen Sie den Prozentsatz dieser Verunreinigung in der eingenommenen Portion Orlistat:
Ergebnis = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = Spitzenreaktion für Orlistat-verwandte Verbindung E in der Probenlösung
rS = Spitzenreaktion für USP Orlistat-verwandte Verbindung E RS in der Standardlösung
CS = Konzentration der USP Orlistat-verwandten Verbindung E RS in der Standardlösung (mg/ml)
CU = Konzentration von Orlistat in der Probenlösung (mg/ml)
Akzeptanzkriterium
Einzelne Verunreinigung: NMT 0,2 % der mit Orlistat verwandten Verbindung E werden gefunden.
Gesamtverunreinigungen: NMT 1,0 % der Gesamtverunreinigungen werden gefunden, wobei die Ergebnisse für die Verfahren 1, 2, 3, 4 und 5 hinzugefügt werden.
SPEZIFISCHE TESTS
• Optische Drehung, spezifische Drehung <781>
Probenlösung: 30 mg/ml in dehydriertem Alkohol
Akzeptanzkriterien: Zwischen -48,0 und -51,0, bei 20
• Wasserbestimmung, Methode Ic <921>: NMT 0,2 %
ZUSÄTZLICHE ANFORDERUNGEN
• Verpackung und Lagerung: In gut verschlossenen Behältern bei 2 bis 8 °C aufbewahren.
• USP-Referenzstandards <11>
USP Orlistat RS
USP Orlistat-verwandte Verbindung A RS
USP Orlistat-verwandte Verbindung B RS
USP Orlistat-verwandte Verbindung C RS
USP Orlistat-verwandte Verbindung D RS
USP Orlistat-verwandte Verbindung E RS
USP35