Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 Assay (HPLC) 97,0–102,0 %

Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
Benzolpropansäure, -(Benzoylamino)--hydroxy-, 6,12b-Bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahydro-4,11-dihydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-yl Ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahydro-4,6, 9,11,12,12b-Hexahydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-7,11-methano-5H-cyclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-on 6, 12b-Diacetat, 12-Benzoat, 9-Ester mit (2R,3S)-N-Benzoyl-3-phenylisoserin [33069-62-4].
Paclitaxel enthält nicht weniger als 97,0 Prozent und nicht mehr als 102,0 Prozent C47H51NO14, berechnet auf wasserfreier, lösungsmittelfreier Basis.
[Achtung – Paclitaxel ist zytotoxisch.Es sollte sorgfältig darauf geachtet werden, dass das Einatmen von Paclitaxel-Partikeln und der Kontakt der Haut mit diesen Partikeln vermieden werden.]
Verpackung und Lagerung – In dichten, lichtbeständigen Behältern aufbewahren und bei kontrollierter Raumtemperatur lagern.
Kennzeichnung – Die Kennzeichnung gibt die Art des zur Herstellung des Materials verwendeten Prozesses und den Test auf verwandte Verbindungen an, den das Material erfüllt.
USP-Referenzstandards <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS Klicken Sie hier, um die Struktur anzuzeigen
USP Paclitaxel-verwandte Verbindung A RS
Cephalomannin.
USP Paclitaxel-verwandte Verbindung B RS
10-Deacetyl-7-Epipaclitaxel.
USP Paclitaxel-Verunreinigungsmischung RS
Mischung aus Paclitaxel und den folgenden verwandten Verbindungen: Propylanalogon, Cephalomannin, sec-Butylanalogon, n-Butylanalog, Benzylanalogon, Baccatin VI, Pentylanalogon und 7-Epipaclitaxel.
Identifikation-
A: Infrarotabsorption <197K>.
B: Die Retentionszeit des Hauptpeaks im Chromatogramm der Testzubereitung entspricht der im Chromatogramm der Standardzubereitung, wie sie im Test erhalten wurde.
Spezifische Rotation 781S: zwischen 49,0 und 55,0 bei 20, berechnet auf wasserfreier, lösungsmittelfreier Basis.
Testlösung: 10 mg pro ml, in Methanol.
Mikrobenzählungstests <61> und Tests für bestimmte Mikroorganismen <62> – Die gesamte aerobe Mikrobenzahl überschreitet nicht 100 KBE pro g.Es erfüllt die Anforderungen der Tests auf Abwesenheit von Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella-Arten und Escherichia coli.
Bakterielle Endotoxine 85 – Es enthält nicht mehr als 0,4 USP-Endotoxineinheiten pro mg Paclitaxel.
Wasser, Methode Ic <921>: nicht mehr als 4,0 %.
Glührückstand <281>: nicht mehr als 0,2 %.
Schwermetalle, Methode II <231>: 0,002 %.
Verwandte Verbindungen-
Test 1 (für Material, das als aus natürlichen Quellen isoliert gekennzeichnet ist) – Wenn das Material diesen Test erfüllt, zeigt die Kennzeichnung an, dass es den USP-Test 1 für verwandte Verbindungen erfüllt.
Verdünnungsmittel – Bereiten Sie es wie im Test beschrieben vor.
Lösung A – Bereiten Sie filtriertes und entgastes Acetonitril vor.
Lösung B: Bereiten Sie gefiltertes und entgastes Wasser vor.
Mobile Phase – Verwenden Sie variable Mischungen von Lösung A und Lösung B gemäß den Anweisungen für das chromatographische System.Nehmen Sie bei Bedarf Anpassungen vor (siehe Systemeignung unter Chromatographie 621).
Systemeignungslösung: Lösen Sie genau abgewogene Mengen der USP Paclitaxel-verwandten Verbindung A RS und der USP Paclitaxel-verwandten Verbindung B RS in Methanol auf, um eine Lösung mit bekannten Konzentrationen von jeweils etwa 10 µg pro ml zu erhalten.Übertragen Sie 5,0 ml dieser Lösung in einen 50-ml-Messkolben, verdünnen Sie mit Verdünnungsmittel auf das Volumen und mischen Sie.
Standardlösung – Lösen Sie mithilfe von Ultraschall eine genau abgewogene Menge USP Paclitaxel RS in Verdünnungsmittel auf und verdünnen Sie es quantitativ und bei Bedarf schrittweise mit Verdünnungsmittel, um eine Lösung mit einer bekannten Konzentration von etwa 5 µg pro ml zu erhalten.
Testlösung: Verwenden Sie die Testvorbereitung.
Chromatografisches System (siehe Chromatographie <621>) – Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem 227-nm-Detektor und einer 4,6 mm × 25 cm großen Säule ausgestattet, die eine 5-µm-Packung L43 enthält.Die Durchflussrate beträgt etwa 2,6 ml pro Minute.Die Säulentemperatur wird auf 30 °C gehalten. Der Chromatograph wird wie folgt programmiert.
Zeit (Minuten) Lösung A (%) Lösung B (%) Elution
0–35 35 65 isokratisch
35–60 35®80 65®20 linearer Farbverlauf
60–70 80®35 20®65 linearer Farbverlauf
70–80 35 65 isokratischChromatographieren Sie die Systemeignungslösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relativen Retentionszeiten betragen etwa 0,78 für Paclitaxel-verwandte Verbindung A und 0,86 für Paclitaxel-verwandte Verbindung B (relativ zur Retentionszeit für Paclitaxel, erhalten aus). die Testlösung);und die Auflösung R zwischen der mit Paclitaxel verwandten Verbindung A und der mit Paclitaxel verwandten Verbindung B beträgt nicht weniger als 1,0.Chromatographieren Sie die Standardlösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relative Standardabweichung für Wiederholungsinjektionen beträgt nicht mehr als 2,0 %.
Verfahren – Injizieren Sie ein Volumen (ca. 15 µL) der Testlösung in den Chromatographen, zeichnen Sie das Chromatogramm auf und messen Sie die Flächen für die Hauptpeaks.Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung im Paclitaxel-Anteil anhand der Formel:
100(Fr / RU)
wobei F der relative Reaktionsfaktor für jeden Verunreinigungspeak ist (Werte siehe Tabelle 1);ri ist die Peakfläche für jede einzelne Verunreinigung;und rU ist die Peakfläche für Paclitaxel.
Tabelle 1
Relative Retentionszeit Relativer Antwortfaktor (F) Namensgrenze (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-Xylosylpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cephalomannin (Paclitaxel-verwandte Verbindung A) a11
0,78 1,26 2'',3''-Dihydrocephalomannin a21
0,86 1,00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel-verwandte Verbindung B) 0,5
1,10 1,00 Benzylanalog3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicephalomannin 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Die Auflösung dieser Peaks kann je nach den vorhandenen relativen Mengen unvollständig sein.die Summe von a1 und a2 beträgt nicht mehr als 0,5 %.
2 Die Auflösung dieser Peaks kann je nach den vorhandenen relativen Mengen unvollständig sein.die Summe von b1 und b2 beträgt nicht mehr als 0,5 %.
3 Der verwandten Verbindung, dem Benzylanalogon, wird der folgende chemische Name zugewiesen: Baccatin III 13-Ester mit (2R,3S)-2-Hydroxy-3-phenyl-3-(2-phenylacetylamino)propansäure.
Zusätzlich zur Nichtüberschreitung der Grenzwerte für Paclitaxel-bedingte Verunreinigungen in Tabelle 1 werden nicht mehr als 0,1 % einer anderen Einzelverunreinigung gefunden;und es werden nicht mehr als 2,0 % der gesamten Verunreinigungen gefunden.
Test 2 (für Material, das als durch einen halbsynthetischen Prozess hergestellt gekennzeichnet ist) – Wenn das Material diesen Test erfüllt, weist die Kennzeichnung darauf hin, dass es den USP-Test 2 für verwandte Verbindungen erfüllt.
Verdünnungsmittel: Acetonitril verwenden.
Lösung A – Verwenden Sie eine gefilterte und entgaste Mischung aus Wasser und Acetonitril (3:2).
Lösung B: Verwenden Sie gefiltertes und entgastes Acetonitril.
Mobile Phase – Verwenden Sie variable Mischungen von Lösung A und Lösung B gemäß den Anweisungen für das chromatographische System.Nehmen Sie bei Bedarf Anpassungen vor (siehe Systemeignung unter Chromatographie 621).
Lösung zur Systemeignung – Lösen Sie genau abgewogene Mengen von USP Paclitaxel RS und USP Paclitaxel Related Compound B RS in Verdünnungsmittel auf, schütteln und beschallen Sie sie bei Bedarf, um eine Lösung mit bekannten Konzentrationen von etwa 0,96 mg bzw. 0,008 mg pro ml zu erhalten.
Testlösung: Etwa 10 mg genau abgewogenes Paclitaxel in einen 10-ml-Messkolben überführen, darin auflösen und mit Verdünnungsmittel auf das Volumen verdünnen, bei Bedarf schütteln und mit Ultraschall behandeln und mischen.
Chromatografisches System (siehe Chromatographie 621) – Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem 227-nm-Detektor und einer 4,6 mm × 15 cm großen Säule ausgestattet, die eine 3-µm-Packung L1 enthält.Die Flussrate beträgt etwa 1,2 ml pro Minute.Die Säulentemperatur wird bei 35 °C gehalten. Der Chromatograph wird wie folgt programmiert.
Zeit (Minuten) Lösung A (%) Lösung B (%) Elution
0-20 100 0 isokratisch
20-60 100®10 0®90 linearer Farbverlauf
60-62 10®100 90®0 linearer Farbverlauf
62-70 100 0 isokratischChromatographieren Sie die Systemeignungslösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relativen Retentionszeiten betragen etwa 0,94 für Paclitaxel-verwandte Verbindung B und 1,0 für Paclitaxel;die Auflösung R zwischen der mit Paclitaxel verwandten Verbindung B und Paclitaxel beträgt nicht weniger als 1,2;und die relative Standardabweichung für wiederholte Injektionen beträgt nicht mehr als 2,0 %.
Verfahren: Injizieren Sie getrennt gleiche Volumina (ca. 15 µL) des Verdünnungsmittels und der Testlösung in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Flächen aller Peaks.Eventuelle Spitzen aufgrund des Verdünnungsmittels ignorieren.Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung im Paclitaxel-Anteil anhand der Formel:
100 (Fr / RS)
wobei F der relative Reaktionsfaktor für jede Verunreinigung ist (Werte siehe Tabelle 2);ri ist die Peakfläche für jede aus der Testlösung erhaltene Verunreinigung;und rs ist die Summe der Flächen aller aus der Testlösung erhaltenen Peaks.
Tabelle 2
Relative Retentionszeit Relativer Antwortfaktor (F) Namensgrenze (%)
0,11 1,24 10-Deacetylbaccatin III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Photodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoylpaclitaxel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Oxetanring geöffnet, Acetyl und Benzoyl migriert2 x1
0,921 1,00 10-Acetoacetylpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (Paclitaxel-verwandte Verbindung B) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetylpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-Paclitaxel 0,3
1 Die Auflösung dieser Peaks kann je nach den vorhandenen relativen Mengen unvollständig sein.die Summe von x1, x2 und x3 beträgt nicht mehr als 0,4 %.
2 Die folgenden chemischen Namen werden den verwandten Verbindungen zugewiesen: Photodegradant;Der Oxetanring öffnete sich, Acetyl und Benzoyl wanderten;und 10,13-Bissidechain-Paclitaxel:
Photoabbauend
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloxy-5,13-dihydroxy-4,16,17,17-tetramethyl-8-oxa- 3-Oxo-12-phenylcarbonyloxypentacyclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-yl
(2R,3S)-2-Hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoat
Der Oxetanring öffnete sich, Acetyl und Benzoyl wanderten
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetyloxy-1,2,4,7-tetrahydroxy-8,12,15,15-tetramethyl-9-oxo- 4-(Phenylcarbonyloxymethyl)tricyclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-yl
(2R,3S)-2-Hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoat
10,13-Bissidechain-Paclitaxel
Baccatin III 13-Ester mit (2R,3S)-2-Hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propansäure, 10-Ester mit (2S,3S)-2-Hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino). )Propansäure
Zusätzlich zur Nichtüberschreitung der Grenzwerte für Paclitaxel-bedingte Verunreinigungen in Tabelle 2 werden nicht mehr als 0,1 % einer anderen Einzelverunreinigung gefunden;und es werden nicht mehr als 2,0 % der gesamten Verunreinigungen gefunden.
Test 3 (für Material, das als durch einen Fermentationsprozess von Pflanzenzellen hergestellt gekennzeichnet ist) – Wenn das Material diesen Test erfüllt, weist die Kennzeichnung darauf hin, dass es den USP-Test 3 für verwandte Verbindungen erfüllt.
Lösung A – Bereiten Sie eine filtrierte und entgaste Mischung aus Wasser und Acetonitril (3:2) vor.
Lösung B – Bereiten Sie filtriertes und entgastes Acetonitril vor.
Mobile Phase – Verwenden Sie variable Mischungen von Lösung A und Lösung B gemäß den Anweisungen für das chromatographische System.Nehmen Sie bei Bedarf Anpassungen vor (siehe Systemeignung unter Chromatographie 621).
Lösung zur Systemeignung: USP Paclitaxel Impurity Mixture RS in Acetonitril auflösen, ggf. mit Ultraschall behandeln, um eine Lösung mit einer bekannten Konzentration von etwa 1 mg pro ml zu erhalten.
Standardlösung – Lösen Sie eine genau abgewogene Menge USP Paclitaxel RS in Acetonitril und behandeln Sie es bei Bedarf mit Ultraschall, um eine Lösung mit einer bekannten Konzentration von etwa 1 mg pro ml zu erhalten.
Testlösung: Übertragen Sie etwa 10 mg genau abgewogenes Paclitaxel in einen 10-ml-Messkolben.In Acetonitril auflösen und auf das Volumen verdünnen, ggf. mit Ultraschall behandeln und mischen.
Chromatografisches System (siehe Chromatographie 621) – Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem 227-nm-Detektor und einer 4,6 mm × 15 cm großen Säule ausgestattet, die eine 3-µm-Packung L1 enthält.Die Flussrate beträgt etwa 1,2 ml pro Minute.Der Chromatograph wird wie folgt programmiert.
Zeit (Minuten) Lösung A (%) Lösung B (%) Elution
0-28 100 0 isokratisch
28-33 100®98 0®2 linearer Farbverlauf
33–58 98®10 2®90 linearer Farbverlauf
58-60 10 90 isokratisch
60-63 10®100 90®0 linearer Farbverlauf
63-70 100 0 isokratischChromatographieren Sie die Systemeignungslösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die Auflösung R zwischen Paclitaxel und Benzylanalogon beträgt nicht weniger als 1,8.Chromatographieren Sie die Standardlösung und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen gemäß den Anweisungen für das Verfahren auf: Die relative Standardabweichung für Wiederholungsinjektionen beträgt nicht mehr als 2,0 %.[Hinweis: Zum Zweck der Peakidentifizierung sind die ungefähren relativen Retentionszeiten in Tabelle 3 angegeben. Die relativen Retentionszeiten werden im Vergleich zu Paclitaxel gemessen.]
Tisch 3
Name Relative Aufbewahrungsfrist (%)
Propylanalog1 0,54 0,2
Cephalomannin (Paclitaxel-verwandte Verbindung A) 0,76 0,5
sec-Butylanalog2 0,81 0,2
n-Butylanalog3 0,89 0,1
Benzylanalogon 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentylanalogon4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Die folgende chemische Bezeichnung wird der verwandten Verbindung Propylanalogon zugewiesen: Baccatin III 13-ester mit (2R,3S)-3-Butanoylamino-2-hydroxy-3-phenylpropansäure.
2 Der verwandten Verbindung sec-Butylanalogon wird der folgende chemische Name zugewiesen: Baccatin III 13-ester mit (2R,3S)-2-hydroxy-3-(2-methylbutanoylamino)-3-phenylpropansäure.
3 Der folgende chemische Name wird der verwandten Verbindung n-Butylanalogon zugewiesen: Baccatin III 13-ester mit (2S,3S)-2-hydroxy-3-(pentanoylamino)-3-phenylpropansäure.
4 Die folgende chemische Bezeichnung wird der verwandten Verbindung Pentylanalog zugewiesen: Baccatin III 13-Ester mit (2R,3S)-3-(Hexanoylamino)-2-hydroxy-3-phenylpropansäure.
Vorgehensweise – Injizieren Sie ein Volumen (ca. 12 µL) der Testlösung in den Chromatographen, zeichnen Sie das Chromatogramm auf und messen Sie die Flächen aller Peaks.Berechnen Sie den Prozentsatz jeder Verunreinigung im Paclitaxel-Anteil anhand der Formel:
100(ri / rU)
wobei ri die Reaktion jeder einzelnen Verunreinigung ist;und rU ist die Summe der Flächen aller Peaks, die aus der Testlösung erhalten wurden.Zusätzlich zur Nichtüberschreitung der Grenzwerte für Paclitaxel-bedingte Verunreinigungen in Tabelle 3 werden nicht mehr als 0,1 % einer anderen Einzelverunreinigung gefunden;und es werden nicht mehr als 2,0 % der gesamten Verunreinigungen gefunden.
Assay-
Verdünnungsmittel: Bereiten Sie eine Mischung aus Methanol und Essigsäure (200:1) vor.
Mobile Phase: Bereiten Sie eine filtrierte und entgaste Mischung aus Wasser und Acetonitril (11:9) vor.Nehmen Sie bei Bedarf Anpassungen vor (siehe Systemeignung unter Chromatographie 621).
Standardzubereitung: Lösen Sie eine genau abgewogene Menge USP Paclitaxel RS in Verdünnungsmittel auf, ggf. unter Verwendung von Ultraschall, und verdünnen Sie es quantitativ und bei Bedarf schrittweise mit Verdünnungsmittel, um eine Lösung mit einer bekannten Konzentration von etwa 1 mg pro ml zu erhalten.
Testvorbereitung: Etwa 10 mg genau abgewogenes Paclitaxel in einen 10-ml-Messkolben überführen.In Verdünnungsmittel auflösen, bei Bedarf Ultraschall verwenden, mit Verdünnungsmittel auf das Volumen verdünnen und mischen.
Chromatografisches System (siehe Chromatographie <621>) – Der Flüssigkeitschromatograph ist mit einem 227-nm-Detektor und einer 4,6 mm × 25 cm großen Säule ausgestattet, die eine 5-µm-Packung L43 enthält.Die Durchflussrate beträgt etwa 1,5 ml pro Minute.Chromatographieren Sie das Standardpräparat und zeichnen Sie die Peak-Reaktionen wie für das Verfahren angegeben auf: Der Tailing-Faktor liegt zwischen 0,7 und 1,3;und die relative Standardabweichung für wiederholte Injektionen beträgt nicht mehr als 1,5 %.
Verfahren: Injizieren Sie getrennt gleiche Volumina (ca. 10 µL) der Standardzubereitung und der Testzubereitung in den Chromatographen, zeichnen Sie die Chromatogramme auf und messen Sie die Flächen für die Hauptpeaks.Berechnen Sie die Menge (in mg) an C47H51NO14 in der Paclitaxel-Portion anhand der Formel:
10C(rU / rS)
wobei C die Konzentration von USP Paclitaxel RS in der Standardzubereitung in mg pro ml ist;und rU und rS sind die Spitzenreaktionen für Paclitaxel, die mit der Testvorbereitung bzw. der Standardvorbereitung erhalten wurden.