Ursodesoxycholsäure (UDCA) CAS 128-13-2-Test 99,0–101,0 %

URSODEOXYCHOLSÄURE
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
DEFINITION
3α,7β-Dihydroxy-5β-cholan-24-säure.
Inhalt: 99,0 Prozent bis 101,0 Prozent (Trockensubstanz).
FIGUREN
Aussehen: weißes oder fast weißes Pulver.
Löslichkeit: praktisch unlöslich in Wasser, gut löslich in Ethanol (96 Prozent), schwer löslich in Aceton, praktisch unlöslich in Methylenchlorid.
Schmp.: ca. 202℃.
IDENTIFIKATION
Erste Identifizierung: A.
Zweite Identifikation: B, C.
A. Infrarot-Absorptionsspektrophotometrie (2.2.24).
Vergleich: Ursodesoxycholsäure CRS.
B. Untersuchen Sie die im Test erhaltenen Chromatogramme auf Verunreinigung C.
Ergebnisse: Der Hauptfleck im mit der Testlösung (b) erhaltenen Chromatogramm ähnelt in Position, Farbe und Größe dem Hauptfleck im mit der Referenzlösung (a) erhaltenen Chromatogramm.
C. Etwa 10 mg in 1 ml Schwefelsäure R auflösen. 0,1 ml Formaldehydlösung R hinzufügen und 5 Minuten stehen lassen.5 ml Wasser R hinzufügen. Die erhaltene Suspension ist grünlich-blau.
TESTS
Spezifische optische Drehung (2.2.7): + 58,0 bis + 62,0 (getrocknete Substanz).
0,500 g in wasserfreiem Ethanol R auflösen und mit dem gleichen Lösungsmittel auf 25,0 ml verdünnen.
Verunreinigung C. Dünnschichtchromatographie (2.2.27).
Lösungsmittelmischung: Wasser R, Aceton R (10:90 V/V).
Testlösung (a).0,40 g der zu untersuchenden Substanz im Lösungsmittelgemisch lösen und mit dem Lösungsmittelgemisch auf 10 ml verdünnen.
Testlösung (b).1 ml Testlösung (a) mit dem Lösungsmittelgemisch auf 10 ml verdünnen.
Referenzlösung (a).40 mg Ursodesoxycholsäure CRS im Lösungsmittelgemisch auflösen und mit dem Lösungsmittelgemisch auf 10 ml verdünnen.
Referenzlösung (b).Lösen Sie 20 mg Lithocholsäure CRS (Verunreinigung C) im Lösungsmittelgemisch und verdünnen Sie es mit dem Lösungsmittelgemisch (Lösung A) auf 10,0 ml.Verdünnen Sie 2,0 ml dieser Lösung mit der Lösungsmittelmischung auf 100,0 ml.
Referenzlösung (c).Zu 5 ml Lösung A 10 mg Chenodesoxycholsäure CRS (Verunreinigung A) hinzufügen und mit dem Lösungsmittelgemisch auf 50 ml verdünnen.
Platte: TLC-Kieselgelplatte R.
Mobile Phase: Eisessig R, Aceton R, MethylenChlorid R (1:30:60 V/V/V).
Anwendung: 5μL.
Entwicklung: über 2/3 der Platte.
Trocknen: 10 Min. bei 120℃.
Nachweis: Sofort mit einer 47,6 g/L Lösung von Phosphomolybdänsäure R in einer Mischung aus 1 Volumenteil Schwefelsäure R und 20 Volumenteilen Eisessig R besprühen und auf 120℃ erhitzen, bis blaue Flecken auf einem helleren Hintergrund erscheinen.
Systemeignung: Referenzlösung (c):
- Das Chromatogramm zeigt 2 deutlich getrennte Hauptflecken.
Grenzwert: Testlösung (a):
-Verunreinigung C: Jeder Fleck aufgrund der Verunreinigung C ist nicht intensiver als der Hauptfleck im Chromatogramm, das mit der Referenzlösung (b) (0,1 %) erhalten wurde.
Verwandte Substanzen.Flüssigkeitschromatographie (2.2.29).
Lösungsmittelgemisch: Methanol R, mobile Phase (10:90 V/V).
Testlösung.60 mg der zu untersuchenden Substanz im Lösungsmittelgemisch lösen und mit dem Lösungsmittelgemisch auf 20,0 mL verdünnen.
Referenzlösung (a).Lösen Sie den Inhalt einer Durchstechflasche mit Ursodesoxycholsäure für systemische Eignung CRS (enthält die Verunreinigungen A und H) in 1,0 ml der Lösungsmittelmischung.
Referenzlösung (b).1,0 ml der Testlösung mit der Lösungsmittelmischung auf 100,0 ml verdünnen.Verdünnen Sie 1,0 ml dieser Lösung mit der Lösungsmittelmischung auf 10,0 ml.
Spalte:
-Größe: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stationäre Phase: endverschlossenes Octadecylsilyl-Kieselgel fürChromatographie R (5 μm);
- Temperatur: 40℃ ± 1℃.
Mobile Phase: Mischen Sie 30 Volumenteile Acetonitril R, 37 Volumenteile einer 0,78 g/l-Lösung von Natriumdihydrogenphosphat R, eingestellt auf pH 3 mit Phosphorsäure R, und 40 Volumenteile Methanol R.
Flussrate: 0,8 ml/min.
Erkennung: Refraktometer bei 35 ± 1℃.
Injektion: 150 μL.
Laufzeit: 4-fache Retentionszeit von Ursodesoxycholsäure.
Identifizierung von Verunreinigungen: Verwenden Sie das mit Ursodesoxycholsäure gelieferte Chromatogramm für die Systemeignung CRS und das mit Referenzlösung (a) erhaltene Chromatogramm, um die Peaks aufgrund der Verunreinigungen A und H zu identifizieren.
Relative Retention bezogen auf Ursodesoxycholsäure (Retentionszeit = ca. 14 min): Verunreinigung H = ca. 0,9;Verunreinigung A = etwa 2,8.
Systemeignung: Referenzlösung (a):
-Auflösung: mindestens 1,5 zwischen den Peaks aufgrund der Verunreinigung H und Ursodesoxycholsäure.
Grenzen:
- Verunreinigung A: nicht mehr als das Zehnfache der Fläche des Hauptpeaks im Chromatogramm der Referenzlösung (b) (1,0 Prozent);
-nicht spezifizierte Verunreinigungen: für jede Verunreinigung nicht mehr als die Fläche des Hauptpeaks im Chromatogramm, das mit der Referenzlösung (b) erhalten wurde (0,10 %);
- insgesamt: nicht mehr als das 15-fache der Fläche des Hauptpeaks im mit der Referenzlösung (b) erhaltenen Chromatogramm (1,5 Prozent);
- Nichtbeachtungsgrenze: 0,5-fache Fläche des Hauptpeaks im Chromatogramm, das mit der Referenzlösung (b) erhalten wurde (0,05 Prozent).
Schwermetalle (2.4.8): maximal 20 ppm.
1,0 g entspricht Test C. Bereiten Sie die Referenzlösung mit 2 ml Bleistandardlösung (10 ppm Pb) R vor.
Trocknungsverlust (2.2.32): maximal 1,0 Prozent, ermittelt an 1.000 g durch Trocknen im Ofen bei 105 °C.
Sulfatasche (2.4.14): maximal 0,1 Prozent, bestimmt auf 1,0 g.
TEST
Lösen Sie 0,350 g in 50 ml Ethanol (96 Prozent) R, das zuvor mit 0,2 ml Phenolphthaleinlösung R neutralisiert wurde. Geben Sie 50 ml Wasser R hinzu und titrieren Sie mit 0,1 M Natriumhydroxid, bis eine rosa Farbe erhalten wird.
1 ml 0,1 M Natriumhydroxid entspricht 39,26 mg C24H40O4.
VERUNREINIGUNGEN
Spezifizierte Verunreinigungen: A, C.
Andere nachweisbare Verunreinigungen (die folgenden Stoffe würden, wenn sie in ausreichender Menge vorhanden wären, durch den einen oder anderen Test in der Monographie nachgewiesen werden. Sie sind durch das allgemeine Akzeptanzkriterium für andere/nicht spezifizierte Verunreinigungen und/oder durch die allgemeine Monographie „Stoffe“ begrenzt für pharmazeutische Zwecke (2034). Es ist daher nicht erforderlich, diese Verunreinigungen zum Nachweis der Konformität zu identifizieren. Siehe auch 5.10.
Kontrolle von Verunreinigungen in Substanzen für pharmazeutische Zwecke): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-Dihydroxy-5β-cholan-24-säure (Chenodesoxycholsäure),
B. 3α,7α,12α-Trihydroxy-5β-cholan-24-säure (Cholsäure),
C. 3α-Hydroxy-5β-cholan-24-säure (Lithocholsäure),
D. 3α,7β,12α-Trihydroxy-5β-cholan-24-säure (Ursocholsäure),
E. 3α,12α-Dihydroxy-5β-cholan-24-säure (Desoxycholsäure),
F. 3α-Hydroxy-7-oxo-5β-cholan-24-säure,
G. Methyl-3α,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oat,
H. 3β,7β-Dihydroxy-5β-cholan-24-säure,
I. 5β-Cholan-3α,7β,24-triol.