L-4-Nitrophenylalanine Metil Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe (4-NO2) -OMe·HCl Assay > 98.5% (HPLC) Fabriko

Metodo de Analizo de L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Priskribo: Metu ĉirkaŭ 2 g da specimeno en pura kaj seka Petri-plado kaj observu la aspekton de specimeno.Raportado: Raportu la observon
Identigo: Komparu la retentempon de la plej grava pinto en la kromatogramo de la testpreparo kun la retentempo de la plej grava pinto en la kromatogramo de sistema taŭgeco-preparo kiel akirite en kromatografia pureco per HPLC.
Perdo dum Sekiĝo: Sekigu vitroŝtopitan, malprofundan pezan botelon je 105±2℃ dum 30 minutoj.Lasu ĝin malvarmigi al ĉambra temperaturo en descicator.Pezu precize la pezilon kun ŝtopilo kaj notu la pezon (W1).Transmetu ĉirkaŭ 1 ĝis 2 g precize pezitan kvanton da testa substanco en la pezilon.Per milda, flanka skuado, disdonu la testan specimenon kiel eble plej egale ĝis profundo de ĉirkaŭ 5 mm.Pezu la ŝarĝitan pezbotelon kaj registri la pezon (W2).Metu la ŝarĝitan botelon en la sekigan fornon, forigante la ŝtopilon kaj lasante ĝin ankaŭ en la ĉambro.Sekigu la provan specimenon je 105±2℃ dum 3 horoj.Malferminte la ĉambron, fermu la botelon senprokraste kaj lasu ĝin veni al ĉambra temperaturo en elsekigilo.Pezu precize la pezbotelo kun ŝtopilo kaj rekodu la pezon (W3).Kalkulu la elcentan perdon dum sekiĝo de la specimeno uzante jenan formulon:
Kalkula Perdo dum sekiĝo (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Enantiomer Enhavo de HPLC:
Kemiaj & Reakciiloj:
n-Hexane AR-grado
Metanola HPLC-grado
Izopropila alkoholo HPLC-grado
Dietilamina AR-grado
Normoj: L-4-Nitrophenylalanine Metil Ester HCl-normo;L-4-Nitrophenylalanine Metil Ester HCl enantiomer normo
Movebla Fazo: Preparu homogenan miksaĵon de n-heksano, izopropila alkoholo, metanolo kaj dietilamino (65:20:15:0.1 v/v/v/v)
Blanka Preparo: Transmetu 2.5ml da Metanolo en 10-ml-a volumetra flakono, diluu al volumeno per movebla fazo kaj miksu.
Preparado de sistema taŭgeco:
Pezu precize kaj transdonu ĉirkaŭ 5 mg ĉiun el L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl-normo kaj L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl-enantiomer-normo en 10-ml-a volumetra flakono, solvu en ĉirkaŭ 2.5ml da metanolo, diluu al volumeno per poŝtelefono. fazo kaj miksi.
Testpreparo:
Pezu precize kaj transdonu ĉirkaŭ 5 mg da specimeno en 10-mol-flakonon, solvu en ĉirkaŭ 2,5 ml da metanolo, diluu al volumeno per mova fazo kaj miksu.
Instrumentaj parametroj:
Instrumento: HPLC ekipita per injektilo, Pumpilo, UV-detektilo kaj Registrilo
Kolumno: ChiralPak-IC (4.6mm x 250mm) 5 μ aŭ ekvivalento
Fluo: 1,0 ml/minuto
Ondolongo: 260 nm
Injekta volumo: 10 μL
Temperaturo de la kolumno: 25℃
Rultempo: 20 minutoj
Proceduro
Injektu la solvojn kiel menciite en la sekva sinsekvo.Registru la kromatogramojn kaj konfirmu la kriteriojn:
Priskribo de Injektoj Nombro de Injektoj Kriterioj
Blanka Preparo 1 Neniu interfera pinto devas esti observita ĉe la retentempo de L-4-Nitrophenylalanine Metil Ester HCl aŭ enantiomero.
Preparo de sistema taŭgeco 1 Rezolucio inter L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl kaj enantiomera pinto devus esti ne malpli ol 2.0
Testpreparo 1 Uzu testan kromatogramon por determini enantiomerenhavon en la specimeno.
Relativaj Retenaj Tempoj:
L-4-Nitrofenilalanina Metil Estero HCl 1.0
Enantiomero Pri 1.11
Retenda tempo de L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl estas proksimume 9.8 minutoj.
Kalkulo: En la kromatogramo akirita de testa preparado, ignoru ĉiujn pintojn atendu L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl kaj Enantiomer.Raportu la enantiomerenhavon en la specimeno per areonormaliga metodo.
Kromatograma Pureco kaj Malpuraĵoj de HPLC:
Kemiaj & Reakciiloj:
Diamonia fosfato AR-grado
Fosfora acido AR-grado
Metanola HPLC-grado
Purigita Akvo
Normoj
L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl-normo
4-Nitro-L-fenilalanina monohidrata normo
Poŝtelefona Fazo-A
Solvu 6,6 g da diamonia fosfato en 1000 ml da purigita akvo.Alĝustigu la pH de ĉi tiu solvo al 6.0 kun fosfora acido.Filtrilo kaj degas.Antaŭ mezuri la pH de solvaĵo, kalibru la pH-mezurilon kun norma bufra solvaĵo pH 4.01 KAJ 7.00.
Poŝtelefona Fazo-B
Metanola HPLC-grado
Sistemo Taŭgeco Preparado
Pezu precize kaj transdonu ĉirkaŭ 25 mg ĉiu el normo L-4-Nitrophenylalanine Metil Ester HCl kaj 4-Nitro-L-Phenylalanine monohidrata normo en 50-ml volumetra flakono, solvu kaj diluu al volumeno kun metanolo kaj miksi.
Testa Preparado:
Pezu precize kaj transdonu ĉirkaŭ 25 mg-specimenon en 50-ml-a volumetra flakono, solvu kaj diluu al volumeno per metanolo kaj miksi.
Instrumentaj parametroj:
Instrumento: HPLC ekipita per injektilo, Pumpilo, UV-detektilo kaj Registrilo
Kolumno: XTerra RP-18 (4.6mm x 150mm) 5 μ aŭ ekvivalento
Fluo: 1,0 ml/minuto
Ondolongo: 265 nm
Injekta volumo: 20 μL
Temperaturo de la kolumno: 25℃
Rultempo: 45 minutoj
Gradienta Programo
Tempo (min) Movebla Fazo-A % Movebla Fazo-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Proceduro:
Injektu la solvojn kiel menciite en la sekva sinsekvo.Registru la kromatogramojn kaj konfirmu la kriteriojn:
Blanka Preparo 1 Neniu interfera pinto devas esti observita ĉe la retentempo de L-4-Nitrophenylalanine Metil Ester HCl.
Sistema taŭgeca preparo 1 Vostofaktoro por L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl-pinto devus esti ne malpli ol 2.0
Testpreparo 1 Uzu testan kromatogramon por determini kromatografian purecon kaj malpuraĵojn.
Relativaj Retenaj Tempoj:
L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl 1.0 (retenda tempo ĉirkaŭ 11.4 minutoj)
4-Nitro-L-fenilalanino Ĉirkaŭ 0,4
Tolueno Ĉirkaŭ 2.3
Kalkuloj:
En la kromatogramo akirita de testa preparado, post malplena korekto, ignoru la pinton pro tolueno.Raportu la kromatografian purecon, 4-Nitro-L-Phenylalanine enhavon kaj totalajn malpuraĵojn en la specimeno per areonormaliga metodo.