Ácido ursodesoxicólico (UDCA) CAS 128-13-2 Ensayo 99.0~101.0%

ÁCIDO URSODEOXICÓLICO
C24H40O4 Señor 392,6[128-13-2]
DEFINICIÓN
Ácido 3α,7β-dihidroxi-5β-colan-24-oico.
Contenido: 99,0 por ciento a 101,0 por ciento (sustancia seca).
CARACTERES
Apariencia: polvo blanco o casi blanco.
Solubilidad: prácticamente insoluble en agua, totalmente soluble en etanol (96 por ciento), ligeramente soluble en acetona, prácticamente insoluble en cloruro de metileno.
pf: aproximadamente 202 ℃.
IDENTIFICACIÓN
Primera identificación: A.
Segunda identificación: B, C.
A. Espectrofotometría de absorción infrarroja (2.2.24).
Comparación: Ácido Ursodesoxicólico CRS.
B. Examinar los cromatogramas obtenidos en la prueba de impurezas C.
Resultados: la mancha principal en el cromatograma obtenido con la solución de prueba (b) es similar en posición, color y tamaño a la mancha principal en el cromatograma obtenido con la solución de referencia (a).
C. Disolver aproximadamente 10 mg en 1 mL de ácido sulfúrico R. Agregar 0,1 mL de solución de formaldehído R y dejar reposar durante 5 min.Añadir 5 mL de agua R. La suspensión obtenida es de color azul verdoso.
PRUEBAS
Rotación óptica específica (2.2.7): + 58,0 a + 62,0 (sustancia seca).
Disolver 0,500 g en etanol anhidro R y diluir a 25,0 mL con el mismo solvente.
Impureza C. Cromatografía en capa fina (2.2.27).
Mezcla de disolventes: agua R, acetona R (10:90 V/V).
Solución de prueba (a).Disolver 0,40 g de la sustancia a examinar en la mezcla de solventes y diluir a 10 mL con la mezcla de solventes.
Solución de prueba (b).Diluya 1 mL de la solución de prueba (a) a 10 mL con la mezcla de solventes.
Solución de referencia (a).Disolver 40 mg de ácido ursodesoxicólico CRS en la mezcla de solventes y diluir a 10 mL con la mezcla de solventes.
Solución de referencia (b).Disolver 20 mg de ácido litocólico CRS (impureza C) en la mezcla de solventes y diluir a 10,0 mL con la mezcla de solventes (solución A).Diluir 2,0 mL de esta solución a 100,0 mL con la mezcla de solventes.
Solución de referencia (c).A 5 mL de solución A agregar 10 mg de ácido quenodesoxicólico CRS (impureza A) y diluir a 50 mL con la mezcla de solventes.
Placa: placa de gel de sílice TLC R.
Fase móvil: ácido acético glacial R, acetona R, metilenocloruro R (1:30:60 V/V/V).
Aplicación: 5μL.
Desarrollo: sobre 2/3 de la placa.
Secado: a 120 ℃ durante 10 min.
Detección: rocíe inmediatamente con una solución de 47,6 g/L de ácido fosfomolíbdico R en una mezcla de 1 volumen de ácido sulfúrico R y 20 volúmenes de ácido acético glacial R y caliente a 120 ℃ hasta que aparezcan manchas azules sobre un fondo más claro.
Idoneidad del sistema: solución de referencia (c):
- el cromatograma muestra 2 puntos principales claramente separados.
Límite: solución de prueba (a):
-impureza C: cualquier mancha debida a la impureza C no es más intensa que la mancha principal en el cromatograma obtenido con la solución de referencia (b) (0,1 por ciento).
Sustancias relacionadas.Cromatografía líquida (2.2.29).
Mezcla de disolventes: metanol R, fase móvil (10:90 V/V).
Solución de prueba.Disolver 60 mg de la sustancia a examinar en la mezcla de solventes y diluir a 20,0 mL con la mezcla de solventes.
Solución de referencia (a).Disolver el contenido de un vial de ácido ursodesoxicólico para CRS de idoneidad del sistema (que contiene impurezas A y H) en 1,0 ml de la mezcla de disolventes.
Solución de referencia (b).Diluir 1,0 mL de la solución de prueba a 100,0 mL con la mezcla de solventes.Diluir 1,0 mL de esta solución a 10,0 mL con la mezcla de solventes.
Columna:
-tamaño: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-fase estacionaria: gel de sílice de octadecilsililo rematado en los extremos paracromatografía R (5 μm);
- temperatura: 40 ℃ ± 1 ℃.
Fase móvil: mezclar 30 volúmenes de acetonitrilo R, 37 volúmenes de una solución de 0,78 g/L de dihidrogenofosfato de sodio R ajustado a pH 3 con ácido fosfórico R y 40 volúmenes de metanol R.
Caudal: 0,8 ml/min.
Detección: refractómetro a 35 ± 1℃.
Inyección: 150 μL.
Tiempo de ejecución: 4 veces el tiempo de retención del Ácido Ursodesoxicólico.
Identificación de impurezas: utilice el cromatograma suministrado con ácido ursodesoxicólico para la idoneidad del sistema CRS y el cromatograma obtenido con la solución de referencia (a) para identificar los picos debidos a las impurezas A y H.
Retención relativa con referencia al ácido ursodesoxicólico (tiempo de retención = alrededor de 14 min): impureza H = alrededor de 0,9;impureza A = alrededor de 2,8.
Idoneidad del sistema: solución de referencia (a):
-resolución: mínimo 1,5 entre los picos debido a la impureza H y al ácido ursodesoxicólico.
Límites:
- impureza A: no más de 10 veces el área del pico principal en el cromatograma obtenido con la solución de referencia (b) (1,0 por ciento);
- impurezas no especificadas: para cada impureza, no más del área del pico principal en el cromatograma obtenido con la solución de referencia (b) (0,10 por ciento);
- total: no más de 15 veces el área del pico principal en el cromatograma obtenido con la solución de referencia (b) (1,5 por ciento);
-límite de desprecio: 0,5 veces el área del pico principal en el cromatograma obtenido con la solución de referencia (b) (0,05 por ciento).
Metales pesados ​​(2.4.8): máximo 20 ppm.
1,0 g cumple con la prueba C. Preparar la solución de referencia utilizando 2 mL de solución estándar de plomo (10 ppm Pb) R.
Pérdida por secado (2.2.32): máximo 1,0 por ciento, determinado en 1.000 g por secado en un horno a 105 ℃.
Cenizas sulfatadas (2.4.14): máximo 0,1 por ciento, determinado sobre 1,0 g.
ENSAYO
Disolver 0,350 g en 50 mL de etanol (96 por ciento) R, previamente neutralizado a 0,2 mL de solución de fenolftaleína R. Agregar 50 mL de agua R y titular con hidróxido de sodio 0,1 M hasta obtener color rosa.
1 ml de hidróxido de sodio 0,1 M equivale a 39,26 mg de C24H40O4.
IMPUREZAS
Impurezas especificadas: A, C.
Otras impurezas detectables (las siguientes sustancias, si estuvieran presentes en un nivel suficiente, serían detectadas por una u otra de las pruebas de la monografía. Están limitadas por el criterio de aceptación general para otras impurezas/no especificadas y/o por las sustancias de la monografía general para uso farmacéutico (2034). Por lo tanto, no es necesario identificar estas impurezas para demostrar el cumplimiento. Véase también 5.10.
Control de impurezas en sustancias de uso farmacéutico): B, D, E, F, G, H, I.
A. Ácido 3α,7α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (ácido quenodesoxicólico),
B. Ácido 3α,7α,12α-trihidroxi-5β-colan-24-oico (ácido cólico),
C. Ácido 3α-hidroxi-5β-colan-24-oico (ácido litocólico),
D. Ácido 3α,7β,12α-trihidroxi-5β-colan-24-oico (ácido ursocólico),
E. Ácido 3α,12α-dihidroxi-5β-colan-24-oico (ácido desoxicólico),
F. ácido 3α-hidroxi-7-oxo-5β-colan-24-oico,
G. 3α,7β-dihidroxi-5β-colan-24-oato de metilo,
H. ácido 3β,7β-dihidroxi-5β-colan-24-oico,
I. 5β-colano-3α,7β,24-triol.