L-4-nitrofenüülalaniini metüülester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl test >98,5% (HPLC) tehas

L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) analüüsimeetod (CAS: 17193-40-7)
Kirjeldus: Asetage umbes 2 g proovi puhtasse ja kuiva Petri tassi ja jälgige proovi välimust.Aruandlus: teatage tähelepanekust
Identifitseerimine: võrrelda uuritava preparaadi kromatogrammi peamise piigi retentsiooniaega süsteemi sobivuse kromatogrammi peamise piigi retentsiooniajaga, mis on saadud HPLC kromatograafilise puhtuse järgi.
Kuivatamise kadu: kuivatage klaaskorgiga madalat kaalupudelit temperatuuril 105 ± 2 ℃ 30 minutit.Laske sellel eksikaatoris toatemperatuurini jahtuda.Kaalutakse korgiga kaalupudel täpselt ja registreeritakse kaal (W1).Kaalupudelisse kantakse umbes 1–2 g täpselt kaalutud uuritavat ainet.Jaotage katsekeha õrnalt külgsuunas raputades võimalikult ühtlaselt umbes 5 mm sügavusele.Kaaluge laetud kaaluklaasi ja registreerige kaal (W2).Asetage täidetud pudel kuivatusahju, eemaldades korgi ja jättes ka selle kambrisse.Kuivatage uuritavat proovi 3 tundi temperatuuril 105 ± 2 ℃.Kambri avamisel sulgege pudel koheselt ja laske sellel eksikaatoris soojeneda toatemperatuurini.Kaalutakse täpselt korgiga kaalupudel ja arvutatakse kaal uuesti (W3).Arvutage proovi kuivatamise kadu protsent järgmise valemi abil:
Arvutuskadu kuivatamisel (% w/w) = (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Enantiomeeri sisaldus HPLC järgi:
Kemikaalid ja reaktiivid:
n-heksaani AR klass
Metanool HPLC klass
Isopropüülalkoholi HPLC klass
Dietüülamiini AR klass
Standardid: L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl standard;L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl enantiomeeri standard
Liikuv faas: valmistage n-heksaani, isopropüülalkoholi, metanooli ja dietüülamiini homogeenne segu (65:20:15:0,1 v/v/v/v)
Tooriku valmistamine: 2,5 ml metanooli viia 10 ml mõõtekolbi, lahjendada liikuva faasiga märgini ja segada.
Süsteemi sobivuse ettevalmistamine:
Kaalutakse täpselt ja kantakse umbes 5 mg L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl standardit ja L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl enantiomeeri standardit 10 ml mõõtekolbi, lahustatakse umbes 2,5 ml metanoolis, lahjendatakse mobiilseadmega mahuni. faas ja segada.
Testi ettevalmistamine:
Kaalutakse täpselt ja kantakse umbes 5 mg proovi 10-moolisesse mõõtekolbi, lahustatakse umbes 2,5 ml metanoolis, lahjendatakse liikuva faasiga mahuni ja segatakse.
Instrumentaalsed parameetrid:
Instrument: HPLC, mis on varustatud injektori, pumba, UV-detektori ja salvestiga
Veerg: ChiralPak-IC (4,6 mm x 250 mm) 5 μ või samaväärne
Voolukiirus: 1,0 ml/min
Lainepikkus: 260nm
Süstimismaht: 10 μL
Kolonni temperatuur: 25℃
Tööaeg: 20 minutit
Menetlus
Süstige lahused, nagu on kirjeldatud järgmises järjestuses.Salvestage kromatogrammid ja kinnitage kriteeriumid:
Süstete kirjeldus Süstete arvu kriteeriumid
Tühi valmistamine 1 L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl või enantiomeeri retentsiooniajal ei tohi täheldada segavat piiki.
Süsteemi sobivuse ettevalmistamine 1 Eraldusvõime L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl ja enantiomeeri piigi vahel ei tohi olla väiksem kui 2,0
Katse ettevalmistamine 1 Proovi enantiomeerisisalduse määramiseks kasutatakse testkromatogrammi.
Suhtelised säilitusajad:
L-4-nitrofenüülalaniini metüülester HCl 1,0
Enantiomeer Umbes 1.11
L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl retentsiooniaeg on umbes 9,8 minutit.
Arvutamine: Katse ettevalmistamisel saadud kromatogrammil ei võeta arvesse kõiki oodatavaid L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl ja enantiomeeri piike.Teatage proovi enantiomeeride sisaldus pindala normaliseerimise meetodil.
Kromatograafiline puhtus ja lisandid HPLC järgi:
Kemikaalid ja reaktiivid:
Diammooniumfosfaat AR klass
Fosforhappe AR klass
Metanool HPLC klass
Puhastatud vesi
Standardid
L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl standard
4-nitro-L-fenüülalaniini monohüdraadi standard
Mobiilne faas-A
Lahustage 6,6 g diammooniumfosfaati 1000 ml puhastatud vees.Reguleerige selle lahuse pH fosforhappega 6,0-ni.Filter ja degaseerida.Enne lahuse pH mõõtmist kalibreerige pH-meeter standardpuhverlahusega pH 4,01 JA 7,00.
Mobiilne faas-B
Metanool HPLC klass
Süsteemi sobivuse ettevalmistamine
Kaalutakse täpselt ja kantakse umbes 25 mg L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl standardit ja 4-nitro-L-fenüülalaniini monohüdraadi standardit 50-ml mõõtekolbi, lahustatakse ja lahjendatakse metanooliga ja segatakse.
Testi ettevalmistamine:
Kaalutakse täpselt ja kantakse umbes 25 mg proovi 50-ml mõõtekolbi, lahustatakse ja lahjendatakse metanooliga märgini ja segatakse.
Instrumentaalsed parameetrid:
Instrument: HPLC, mis on varustatud injektori, pumba, UV-detektori ja salvestiga
Veerg: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 μ või samaväärne
Voolukiirus: 1,0 ml/min
Lainepikkus: 265 nm
Süstimismaht: 20 μL
Kolonni temperatuur: 25℃
Tööaeg: 45 minutit
Gradiendi programm
Aeg (min) mobiilne faas-A % mobiilne faas-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Menetlus:
Süstige lahused, nagu on kirjeldatud järgmises järjestuses.Salvestage kromatogrammid ja kinnitage kriteeriumid:
Tühipreparaat 1 L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl retentsiooniajal ei tohiks täheldada segavat piiki.
Süsteemi sobivuse ettevalmistamine 1 L-4-nitrofenüülalaniini metüülestri HCl piigi jääktegur ei tohi olla väiksem kui 2,0
Katse ettevalmistamine 1 Kromatograafilise puhtuse ja lisandite määramiseks kasutatakse testkromatogrammi.
Suhtelised säilitusajad:
L-4-nitrofenüülalaniini metüülester HCl 1,0 (peetumisaeg umbes 11,4 minutit)
4-nitro-L-fenüülalaniin Umbes 0,4
Tolueen Umbes 2,3
Arvutused:
Katse ettevalmistamisel saadud kromatogrammil jäetakse pärast pimekatse korrigeerimist tolueenist tingitud piik tähelepanuta.Märkige proovi kromatograafiline puhtus, 4-nitro-L-fenüülalaniini sisaldus ja lisandite üldsisaldus pindala normaliseerimise meetodil.