L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe (4-NO2)-OMe·HCl Saiakera >% 98,5 (HPLC) Fabrika

L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) aztertzeko metodoa (CAS: 17193-40-7)
Deskribapena: Jarri 2 g lagin inguru petri-ontzi garbi eta lehor batean eta behatu laginaren itxura.Txostena: behaketaren berri eman
Identifikazioa: Konparatu proba-prestaketaren kromatogramako gailur nagusiaren atxikipen-denbora eta HPLC bidezko garbitasun kromatografikoan lortutako sistema-egokitasunerako kromatogramako gailur nagusiaren atxikipen-denbora.
Lehortzean galtzea: Lehortu beirazko tapoidun eta sakonera gutxiko botila bat 105 ± 2 ℃-tan 30 minutuz.Utzi giro-tenperaturara hozten deskribagailu batean.Pisatu zehatz-mehatz pisatzeko botila tapoiarekin eta erregistratu pisua (W1).Jarri 1 eta 2 g inguru probako substantzia kantitate zehatza pisatzeko botilara.Leun eta alderantz astinduz, banatu probako probeta ahalik eta modu berdinean 5 mm inguruko sakoneran.Pisatu kargatutako pisatzeko botila eta erregistratu pisua (W2).Jarri kargatutako botila lehortzeko labean, tapoia kendu eta ganbaran ere utziz.Lehortu probako lagina 105 ± 2 ℃-tan 3 orduz.Ganbera irekitzean, itxi botila berehala, eta utzi giro-tenperaturara iristen lehorgailu batean.Pisatu zehatz-mehatz pisatzeko botila tapoiarekin eta jaso pisua (W3).Kalkulatu lagina lehortzean galera portzentajea honako formula erabiliz:
Kalkulua lehortzean galera (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Enantiomeroen edukia HPLC bidez:
Kimika eta erreaktiboak:
n-Hexano AR kalifikazioa
Metanola HPLC kalifikazioa
Alkohol isopropilikoaren HPLC kalifikazioa
Dietilamina AR gradua
Estandarrak: L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl estandarra;L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl enantiomero estandarra
Fase mugikorra: n-hexano, alkohol isopropilikoaren, metanolaren eta dietilaminaren nahasketa homogeneo bat prestatu (65:20:15:0,1 v/v/v/v)
Prestaketa hutsa: 2,5 ml Metanol transferitu 10 ml-ko matraz aforatu batean, bolumenera diluitu fase mugikorrean eta nahastu.
Sistemaren egokitasuna prestatzea:
Pisatu zehaztasunez eta transferitu 5 mg inguru L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl estandarraren eta L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl enantiomero estandarraren 10 ml-ko matraze bolumetriko batean, disolbatu 2,5 ml metanol inguru, bolumenera diluitu mugikorrarekin. fasea eta nahasketa.
Proba prestatzea:
Zehaztasunez pisatu eta 5 mg inguru lagin transferitu 10 moleko matraze aforatu batean, 2,5 ml inguru metanoletan disolbatu, bolumenera diluitu fase mugikorrean eta nahastu.
Parametro instrumentalak:
Tresna: HPLC injektore, ponpa, UV detektagailu eta grabagailuz hornitua
Zutabea: ChiralPak-IC (4,6 mm x 250 mm) 5 μ edo baliokidea
Emaria: 1,0 ml/minutu
Uhin-luzera: 260 nm
Injekzio bolumena: 10 μL
Zutabe-koven tenperatura: 25 ℃
Iraupena: 20 minutu
Prozedura
Injektatu disoluzioak hurrengo sekuentzian aipatzen den moduan.Grabatu kromatogramak eta baieztatu irizpideak:
Injekzioen deskribapena Injekzio kopurua Irizpideak
Blankaren prestaketa 1 L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl edo enantiomeroaren atxikipen-denboran ez da inolako interferentziarik ikusi behar.
Sistemaren egokitasuna prestatzea 1 L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl eta enantiomero gailurraren arteko bereizmena ez da 2,0 baino txikiagoa izan behar.
Proba prestatzea 1 Erabili proba-kromatograma laginaren enantiomero-edukia zehazteko.
Atxikipen-denbora erlatiboak:
L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl 1,0
Enantiomeroa 1.11
L-4-nitrofenilalanina metil ester HClren atxikipen-denbora 9,8 minutu ingurukoa da.
Kalkulua: probaren prestaketatik lortutako kromatograman, alde batera utzi gailur guztiak espero diren L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl eta enantiomeroa.Eman laginaren enantiomero-edukia eremuaren normalizazio-metodoaren arabera.
Garbitasun kromaografikoa eta ezpurutasunak HPLC bidez:
Kimika eta erreaktiboak:
Diamonio fosfato AR gradua
Azido fosforikoa AR gradua
Metanola HPLC kalifikazioa
Ur araztua
Arauak
L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl estandarra
4-Nitro-L-Fenilalanina monohidrato estandarra
Mugikorra Fase-A
6,6 g diamonio fosfato disolbatu 1000 ml ur araztuetan.Doitu disoluzio honen pH-a 6,0ra azido fosforikoarekin.Iragazi eta desgasifikatu.Disoluzioaren pH-a neurtu aurretik, kalibratu pH-neurgailua 4,01 ETA 7,00 pH-ko soluzio tampon estandar batekin.
Mugikorra Fase-B
Metanola HPLC kalifikazioa
Sistemaren egokitasuna prestatzea
Pisatu zehaztasunez eta transferitu 25 mg inguru L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl estandarraren eta 4-nitro-L-fenilalanina monohidrato estandarraren 50 ml-ko matraz aforatu batean, disolbatu eta bolumenera diluitu metanolarekin eta nahastu.
Proba prestatzea:
Zehaztasunez pisatu eta 25 mg inguru lagina 50 ml-ko matraz aforatu batean transferitu, disolbatu eta bolumenera diluitu metanolarekin eta nahastu.
Parametro instrumentalak:
Tresna: HPLC injektore, ponpa, UV detektagailu eta grabagailuz hornitua
Zutabea: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 μ edo baliokidea
Emaria: 1,0 ml/minutu
Uhin-luzera: 265 nm
Injekzio bolumena: 20 μL
Zutabe-koven tenperatura: 25 ℃
Iraupena: 45 minutu
Gradiente Programa
Denbora (min) Mugikorra Fase-A % Mugikorra Fase-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Prozedura:
Injektatu disoluzioak hurrengo sekuentzian aipatzen den moduan.Grabatu kromatogramak eta baieztatu irizpideak:
Blankaren prestaketa 1 L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl-aren atxikipen-denboran ez da interferentzia-punturik ikusi behar.
Sistemaren egokitasuna prestatzea 1 L-4-nitrofenilalanina metil ester HCl gailurraren isats-faktorea ez da 2,0 baino txikiagoa izan behar
Proba prestatzea 1 Erabili proba-kromatograma garbitasun kromatografikoa eta ezpurutasunak zehazteko.
Atxikipen-denbora erlatiboak:
L-4-Nitrofenilalanina Metil Ester HCl 1.0 (atxikipen-denbora 11.4 minutu inguru)
4-Nitro-L-fenilalanina 0,4 inguru
Toluenoa 2.3
Kalkuluak:
Proba prestatzetik lortutako kromatograman, hutsunea zuzendu ondoren, toluenoaren ondoriozko gailurra baztertu.Eman garbitasun kromatografikoa, 4-Nitro-L-Fenilalanina edukia eta laginaren guztizko ezpurutasunak eremuaren normalizazio metodoaren arabera.