Orlistat CAS 96829-58-2 API Weight Loss Drug Purity 98.0~101.5%

اورلیستات
C29H53NO5 495.73
l-لوسین، N-formyl-، 1-[(3-هگزیل-4-oxo-2-oxetanyl) متیل] دودسیل استر، [2S-[2(R*)، 3]]-.
N-Formyl-l-leucine، استر با (3S,4S)-3-hexyl-4-[(2S)-2-hydroxytridecyl]-2-oxetanone [96829-58-2].
تعریف
Orlistat حاوی NLT 98.0٪ و NMT 101.5٪ C29H53NO5 است که بر اساس بی آب و بدون حلال محاسبه می شود.
شناسایی
• A. جذب مادون قرمز <197M>
• ب. زمان نگهداری پیک اصلی محلول نمونه مطابق با زمان محلول استاندارد است که در آزمون به دست آمده است.
سنجش
• روش
[توجه-از استفاده از فلاسک های پلاستیکی برای تهیه یا نگهداری محلول در این تجزیه و تحلیل خودداری کنید.]
فاز متحرک: استونیتریل، اسید فسفریک و آب (860: 0.05: 140)
محلول استاندارد: 0.5 mg/ml USP Orlistat RS در فاز Mobile.بلافاصله پس از آماده سازی تزریق کنید یا در ساعت 5 نگهداری کنید.
محلول نمونه: 0.5 میلی گرم در میلی لیتر اورلیستات در فاز موبایل.بلافاصله پس از آماده سازی تزریق کنید یا در ساعت 5 نگهداری کنید.
سیستم کروماتوگرافی
(به کروماتوگرافی <621>، تناسب سیستم مراجعه کنید.)
حالت: LC
آشکارساز: UV 195
ستون: 3.9 میلی متر × 15 سانتی متر؛بسته بندی 4 میکرومتری L1
سرعت جریان: 1.0 میلی لیتر در دقیقه
حجم تزریق: 20 میکرولیتر
تناسب سیستم
نمونه: محلول استاندارد
الزامات مناسب بودن
انحراف استاندارد نسبی: NMT 2.0٪
تحلیل و بررسی
نمونه ها: محلول استاندارد و محلول نمونه
درصد اورلیستات (C29H53NO5) را در بخشی از اورلیستات محاسبه کنید:
نتیجه = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = پیک پاسخ از محلول نمونه
rS = پیک پاسخ از محلول استاندارد
CS = غلظت USP Orlistat RS در محلول استاندارد (mg/mL)
CU = غلظت اورلیستات در محلول نمونه (mg/mL)
معیارهای پذیرش: 98.0٪ - 101.5٪ بر اساس بی آب و بدون حلال
ناخالصی ها
ناخالصی های معدنی
• باقیمانده در احتراق <281>: NMT 0.1٪
• فلزات سنگین، روش دوم <231>: 20 ppm
ناخالصی های آلی
• رویه 1: حد ترکیب A مرتبط با اورلیستات
محلول استاندارد: 0.1 میلی گرم در میلی لیتر از USP Orlistat مربوط به ترکیب A RS در استون
محلول نمونه: 50 میلی گرم در میلی لیتر اورلیستات در استون
سیستم کروماتوگرافی
(به کروماتوگرافی <621>، کروماتوگرافی لایه نازک مراجعه کنید.)
حالت: TLC
جاذب: لایه 0.25 میلی متری مخلوط سیلیکا ژل کروماتوگرافی
حجم مصرف: 10 میکرولیتر
سیستم حلال در حال توسعه: تولوئن و اتیل استات (4:1)
محلول تشخیص: 2.5 گرم فسفومولیبدیک اسید و 1 گرم سولفات سریک را به یک بالن حجمی 100 میلی لیتری منتقل کنید، در آن حل کنید و با متانول رقیق کنید تا حجم دهید.
تحلیل و بررسی
نمونه ها: محلول استاندارد و محلول نمونه
بشقاب را بردارید و آن را با هوا کاملاً خشک کنید.صفحه خشک شده را با محلول Detection اسپری کنید و بشقاب را به مدت 30 دقیقه در فر با دمای 120 قرار دهید.
معیارهای پذیرش: هر نقطه ثانویه از محلول نمونه مربوط به ترکیب A مرتبط با اورلیستات شدیدتر از لکه مربوطه از محلول استاندارد (0.2٪) نیست.
• رویه 2: حد ترکیب B مرتبط با اورلیستات
محلول استاندارد: 0.025 میلی گرم در میلی لیتر از USP Orlistat مربوط به ترکیب B RS در متیلن کلراید
محلول نمونه: 50 میلی گرم در میلی لیتر اورلیستات در متیلن کلراید
محلول نمونه اسپک شده: 50 میلی گرم بر میلی لیتر اورلیستات در محلول استاندارد
سیستم کروماتوگرافی
(به کروماتوگرافی <621>، تناسب سیستم مراجعه کنید.)
حالت: GC
آشکارساز: یونیزاسیون شعله
ستون: سیلیس ذوب شده 0.32 میلی متر x 30 متر، پوشش داده شده با فاز ثابت G27 0.25 میکرومتر
دمای ستون: جدول برنامه دما را در زیر ببینید.
دمای اولیه () رمپ دما (/ دقیقه) دمای نهایی () زمان ماندن در دمای نهایی (دقیقه)
50 4 170 -
170 30 300 30
درجه حرارت
انژکتور: 270
آشکارساز: 280
گاز حامل: هلیوم
سرعت جریان: 30 میلی لیتر در دقیقه
نسبت تقسیم: 10:1
حجم تزریق: 2 میکرولیتر
تناسب سیستم
نمونه: محلول استاندارد
الزامات مناسب بودن
انحراف استاندارد نسبی: NMT 10.0٪
تحلیل و بررسی
نمونه ها: محلول نمونه و محلول نمونه Spiked
درصد ترکیب B مربوط به اورلیستات را در بخشی از Orlistat محاسبه کنید:
نتیجه = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = پاسخ اوج ترکیب B مربوط به اورلیستات از محلول نمونه
rSP = پاسخ اوج ترکیب B مربوط به اورلیستات از محلول نمونه Spiked
CS = غلظت USP Orlistat مربوط به ترکیب B RS در محلول استاندارد (mg/mL)
CT = غلظت Orlistat در محلول نمونه Spiked (mg/mL)
معیارهای پذیرش: NMT 0.05٪ از ترکیب B مرتبط با اورلیستات یافت می شود.
• رویه 3
[توجه-از استفاده از فلاسک های پلاستیکی برای تهیه یا نگهداری محلول در این تجزیه و تحلیل خودداری کنید.]
فاز متحرک، محلول استاندارد و محلول نمونه: طبق دستورالعمل در آزمون آماده کنید.
محلول مناسب سیستم: 10 میکروگرم بر میلی لیتر USP Orlistat RS، 0.1 میکروگرم بر میلی لیتر از USP Orlistat مربوط به ترکیب C RS، و 0.25 میکروگرم بر میلی لیتر از USP Orlistat مربوط به ترکیب D RS در فاز موبایل
سیستم کروماتوگرافی
(به کروماتوگرافی <621>، تناسب سیستم مراجعه کنید.)
طبق دستورالعمل در سنجش ادامه دهید، به جز برای کروماتوگرافی محلول مناسب بودن سیستم.
تناسب سیستم
نمونه: راه حل مناسب بودن سیستم
الزامات مناسب بودن
نسبت سیگنال به نویز: NLT 3 برای ترکیب C مرتبط با اورلیستات و اوج ترکیب D مربوط به ارلیستات
انحراف استاندارد نسبی: NMT 10.0% برای پیک اورلیستات
تحلیل و بررسی
نمونه ها: محلول استاندارد و محلول نمونه
درصد هر ناخالصی را در بخشی از Orlistat محاسبه کنید:
نتیجه = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = پاسخ اوج برای هر ناخالصی منفرد از محلول نمونه
rS = پیک پاسخ USP Orlistat RS از محلول استاندارد
CS = غلظت USP Orlistat RS در محلول استاندارد (mg/mL)
CU = غلظت اورلیستات در محلول نمونه (mg/mL)
F = ضریب پاسخ نسبی همانطور که در جدول ناخالصی 1 آورده شده است
معیارهای پذیرش: به جدول ناخالصی 1 مراجعه کنید.
جدول ناخالصی 1
نام زمان ماندگاری نسبی معیارهای پذیرش عامل پاسخ نسبی، NMT (%)
Formylleucinea 0.10 4.0 0.2
ترکیب مرتبط با اورلیستات C 0.13 33 0.05
حلقه باز اورلیستات epimerb 0.44 1.0 0.2
ترکیب مرتبط با اورلیستات D* 0.90 - محاسبه شده در
رویه 4
حلقه باز Orlistat amidec* 0.90 - محاسبه شده در
رویه 4
Orlistat 1.00 - -
d-Leucine orlistatd 1.18 1.0 0.2
ناخالصی ناشناس فردی - 1.0 0.1
* کولوت ها در این سیستم LC، با استفاده از روش 4 تعیین می شوند.
یک N-Formyl-l-leucine.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-Formylamino-4-methyl-pentanoyloxy]-2-hexyl-3-hydroxy-hexadecanoic اسید.
c N-Formyl-l-leucine (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[1-phenyl-R-ethylcarbomoyl]nonyl]-dodecyl ester.
d N-Formyl-d-لوسین (S)-1-[[(2S,3S)-3-hexyl-4-oxo-2-oxetanyl]متیل]دودسیل استر یا انانتیومر.
• رویه 4: حد ترکیب D مرتبط با اورلیستات
فاز متحرک: متانول و آب (83:17)
محلول مناسب سیستم: به ترتیب 4 میلی گرم در میلی لیتر USP Orlistat RS و 2.4 میکروگرم در میلی لیتر USP Orlistat مربوط به ترکیب D RS در استونیتریل
محلول استاندارد: 5.0 میلی گرم در میلی لیتر USP Orlistat RS در استونیتریل
محلول نمونه: 5.0 mg/ml اورلیستات در استونیتریل
سیستم کروماتوگرافی
(به کروماتوگرافی 621، مناسب بودن سیستم مراجعه کنید.)
حالت: LC
آشکارساز: 205 نانومتر
ستون: 4.0 میلی متر × 25 سانتی متر؛بسته بندی 5 میکرومتری L7
سرعت جریان: 0.6 میلی لیتر در دقیقه
حجم تزریق: 20 میکرولیتر
تناسب سیستم
نمونه: راه حل مناسب بودن سیستم
الزامات مناسب بودن
نسبت سیگنال به نویز: NLT 3 برای پیک D ترکیب مرتبط با اورلیستات
انحراف استاندارد نسبی: NMT 10.0% برای پیک اورلیستات
تحلیل و بررسی
نمونه ها: محلول استاندارد و محلول نمونه
درصد هر ناخالصی را در بخشی از Orlistat محاسبه کنید:
نتیجه = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = پاسخ اوج برای هر ناخالصی منفرد از محلول نمونه
rS = پیک پاسخ برای USP Orlistat RS از محلول استاندارد
CS = غلظت USP Orlistat RS در محلول استاندارد (μg/mL)
CU = غلظت Orlistat در محلول نمونه (μg/mL)
F = ضریب پاسخ نسبی همانطور که در جدول ناخالصی 2 به دست آمده است
معیارهای پذیرش: جدول ناخالصی 2 را ببینید.
جدول ناخالصی 2
نام زمان ماندگاری نسبی معیارهای پذیرش عامل پاسخ نسبی، NMT (%)
ترکیب مرتبط با اورلیستات D 0.94 1.0 0.2
Orlistat 1.00 - -
حلقه باز Orlistat amidea 1.25 4.3 0.1
یک N-Formyl-l-leucine (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroxy-3-[1-phenyl-R-ethylcarbomoyl]nonyl]-dodecyl استر.
• رویه 5: محدودیت ترکیب E مرتبط با اورلیستات
بافر: محلول بورات 0.4 N، تنظیم شده به pH 10.2
عامل مشتق: محلول o-phthaldehyde (OPA).[توجه- در صورت عدم امکان به دست آوردن تجاری، عامل مشتق‌کننده را می‌توان به‌صورت 1 درصد از اسید 3 مرکاپتوپروپیونیک و اُفتالدی‌آلدئید در محلول بافر 0.4 مولار بورات تهیه کرد.]
راه حل A: 4.1 گرم تری هیدرات استات سدیم و 40 میلی گرم اتیلن دی آمین تترا استیک اسید (EDTA) را به یک فلاسک حجمی 1 لیتری منتقل کنید.در 950 میلی لیتر آب حل کنید و با 0.1 نیوتن هیدروکسید سدیم تا PH 7.2 تنظیم کنید.با آب به حجم رقیق کنید، 2.5 میلی لیتر تتراهیدروفوران اضافه کنید و مخلوط کنید.فیلتر و گاز زدایی
محلول B: 2.7 گرم تری هیدرات استات سدیم و 40 میلی گرم EDTA را به یک فلاسک حجمی 1 لیتری منتقل کنید.در 200 میلی لیتر آب حل کنید و با 0.1 نیوتن هیدروکسید سدیم تا PH 7.2 تنظیم کنید.800 میلی لیتر استونیتریل، فیلتر و گاز زدایی اضافه کنید.
فاز موبایل: جدول گرادیان زیر را ببینید.
زمان (دقیقه) راه حل A (%) راه حل B (%)
0 96.7 3.3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96.7 3.3
45 96.7 3.3
محلول استاندارد: مقدار وزن شده حدود 0.2 میلی گرم از ترکیب E RS مربوط به USP Orlistat را به یک ویال فضای سر 20 میلی لیتری منتقل کنید.10 میلی لیتر هیدروکسید سدیم 4 نیوتن را اضافه کنید و در ویال را ببندید.ویال را به مدت 1 ساعت تا 100 گرم کنید، سپس بگذارید تا دمای اتاق خنک شود.2 میلی لیتر از محلول به دست آمده را به یک فلاسک حجمی 50 میلی لیتری منتقل کنید و با آب به حجم رقیق کنید.به 0.5 میلی لیتر از این محلول، 2.0 میلی لیتر بافر و 0.5 میلی لیتر از عامل مشتق کننده اضافه کنید.
محلول نمونه: طبق دستورالعمل محلول استاندارد عمل کنید، اما در عوض از 25 میلی گرم اورلیستات برای جایگزینی 0.2 میلی گرم از USP Orlistat Related Compound E RS استفاده کنید.
سیستم کروماتوگرافی
(به کروماتوگرافی <621>، تناسب سیستم مراجعه کنید.)
حالت: LC
آشکارساز: فلورسانس 340 نانومتر (تحریک).450 نانومتر (گسیل)
ستون ها
حفاظ: 2.1 میلی متر × 2 سانتی متر؛بسته بندی 50 میکرومتری L1
تحلیلی: 2.1 میلی متر × 20 سانتی متر؛بسته بندی L1
سرعت جریان: 0.5 میلی لیتر در دقیقه
حجم تزریق: 20 میکرولیتر
تناسب سیستم
نمونه: محلول استاندارد
الزامات مناسب بودن
انحراف استاندارد نسبی: NMT 6.0% برای پیک E ترکیب مرتبط با اورلیستات
تحلیل و بررسی
نمونه ها: محلول استاندارد و محلول نمونه
درصد این ناخالصی را در بخشی از Orlistat محاسبه کنید:
نتیجه = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = پیک پاسخ برای ترکیب E مرتبط با اورلیستات در محلول نمونه
rS = پیک پاسخ برای USP Orlistat Related Compound E RS در محلول استاندارد
CS = غلظت USP Orlistat Related Compound E RS در محلول استاندارد (mg/mL)
CU = غلظت اورلیستات در محلول نمونه (mg/mL)
ملاک پذیرش
ناخالصی فردی: NMT 0.2٪ از ترکیب E مرتبط با اورلیستات یافت می شود.
کل ناخالصی ها: NMT 1.0٪ از کل ناخالصی ها یافت می شود، نتایج برای رویه های 1، 2، 3، 4، و 5 اضافه می شود.
تست های خاص
• چرخش نوری، چرخش خاص <781>
محلول نمونه: 30 میلی گرم در میلی لیتر در الکل دهیدراته
معیارهای پذیرش: بین -48.0 و -51.0، در 20
• تعیین آب، روش Ic <921>: NMT 0.2٪
الزامات اضافی
بسته بندی و نگهداری: در ظروف در بسته بین 2 تا 8 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
• استانداردهای مرجع USP <11>
USP Orlistat RS
USP Orlistat Related Compound A RS
USP Orlistat مربوط به ترکیب B RS
USP Orlistat مربوط به ترکیب C RS
USP Orlistat مربوط به ترکیب D RS
USP Orlistat Related Compound E RS
USP35