سنجش پاکلیتاکسل (تاکسول) CAS 33069-62-4 (HPLC) 97.0~102.0٪

پاکلی تاکسل
C47H51NO14 853.91
بنزنپروپانوئیک اسید، -(بنزوئیلامین)--هیدروکسی-، 6،12b-bis(استیلوکسی)-12-(بنزوئیلوکسی)-2a،3،4،4a،5،6،9،10،11،12،12a،12b -دودکاهیدرو-4،11-دی هیدروکسی-4a،8،13،13-تترمتیل-5-اکسو-7،11-متانو-1H-سیکلودکا[3،4]بنز[1،2-b]oxet-9-yl استر، [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-دودکاهیدرو-4,6, 9،11،12،12b-هگزا هیدروکسی-4a،8،13،13-تترا متیل-7،11-متانو-5H-سیکلودکا[3،4]-بنز[1،2-b]oxet-5-one 6، 12b-دی استات، 12-بنزوات، 9-استر با (2R,3S)-N-benzoyl-3-phenylisoserine [33069-62-4].
پاکلیتاکسل حاوی حداقل 97 درصد و بیش از 102 درصد C47H51NO14 است که بر اساس بی آب و بدون حلال محاسبه می شود.
[احتیاط - پاکلیتاکسل سیتوتوکسیک است.برای جلوگیری از استنشاق ذرات پاکلیتاکسل و قرار گرفتن پوست در معرض آن باید دقت زیادی کرد.]
بسته بندی و نگهداری - در ظروف محکم و مقاوم در برابر نور نگهداری کنید و در دمای اتاق کنترل شده نگهداری کنید.
برچسب‌گذاری: برچسب‌گذاری نشان‌دهنده نوع فرآیند مورد استفاده برای تولید مواد و آزمایش ترکیبات مرتبط است که مواد با آن مطابقت دارد.
استانداردهای مرجع USP <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS برای مشاهده ساختار کلیک کنید
USP Paclitaxel Related Compound A RS
سفالومانین
USP Paclitaxel Related Compound B RS
10-داستیل-7-اپی پاکلیتاکسل.
USP Paclitaxel Impurity Mixture RS
مخلوط پاکلیتاکسل و ترکیبات مرتبط زیر: آنالوگ پروپیل، سفالومانین، آنالوگ ثانیه-بوتیل، آنالوگ n-بوتیل، آنالوگ بنزیل، باکاتین VI، آنالوگ پنتیل و 7-اپی‌پاکلیتاکسل.
شناسایی-
A: جذب مادون قرمز <197K>.
ب: زمان ماندن پیک اصلی در کروماتوگرام آماده سازی سنجش مطابق با زمان کروماتوگرام آماده سازی استاندارد است که در آزمون به دست آمده است.
چرخش خاص 781S: بین 49.0 و 55.0 در 20، محاسبه شده بر اساس بی آب و بدون حلال.
محلول آزمایش: 10 میلی گرم در میلی لیتر، در متانول.
تست های شمارش میکروبی <61> و آزمایشات برای میکروارگانیسم های مشخص <62> - تعداد کل میکروبی هوازی از 100 cfu در گرم تجاوز نمی کند.الزامات آزمایشات مربوط به عدم وجود استافیلوکوکوس اورئوس، سودوموناس آئروژینوزا، گونه های سالمونلا و اشریشیا کلی را برآورده می کند.
اندوتوکسین های باکتریایی 85- حاوی بیش از 0.4 واحد اندوتوکسین USP در هر میلی گرم پاکلیتاکسل نیست.
آب، روش Ic <921>: بیش از 4.0٪ نیست.
باقیمانده در احتراق <281>: نه بیشتر از 0.2٪.
فلزات سنگین، روش دوم <231>: 0.002%.
ترکیبات مرتبط-
تست 1 (برای مواد برچسب گذاری شده به عنوان جدا شده از منابع طبیعی) - اگر ماده با این آزمایش مطابقت داشته باشد، برچسب نشان می دهد که با ترکیبات مربوط به USP تست 1 مطابقت دارد.
رقیق کننده - همانطور که در آزمایش آمده است آماده کنید.
محلول A-استونیتریل فیلتر شده و گاز زدایی را آماده کنید.
محلول B-آب فیلتر شده و گاز زدایی شده را آماده کنید.
فاز متحرک - از مخلوط های متغیر محلول A و محلول B مطابق دستورالعمل سیستم کروماتوگرافی استفاده کنید.در صورت لزوم تنظیمات را انجام دهید (به مناسب بودن سیستم در کروماتوگرافی 621 مراجعه کنید).
محلول مناسب سیستم - مقادیر دقیق وزن شده از USP Paclitaxel Related Compound A RS و USP Paclitaxel Related Compound B RS را در متانول حل کنید تا محلولی با غلظت های شناخته شده حدود 10 میکروگرم از هر میلی لیتر در هر میلی لیتر بدست آورید.5.0 میلی لیتر از این محلول را به یک فلاسک حجمی 50 میلی لیتری منتقل کنید، با Diluent به حجم رقیق کنید و مخلوط کنید.
محلول استاندارد- با کمک فراصوت مقداری از USP Paclitaxel RS را که دقیقاً وزن شده است در رقیق کننده حل کنید و در صورت لزوم با رقیق کننده به صورت کمی و مرحله به مرحله رقیق کنید تا محلولی با غلظت شناخته شده حدود 5 میکروگرم در میلی لیتر به دست آید.
محلول تست - از آماده سازی Assay استفاده کنید.
سیستم کروماتوگرافی (به کروماتوگرافی <621> مراجعه کنید) - کروماتوگرافی مایع مجهز به یک آشکارساز 227 نانومتری و یک ستون 4.6 میلی متر × 25 سانتی متر است که حاوی بسته بندی L43 5 میکرومتری است.سرعت جریان حدود 2.6 میلی لیتر در دقیقه است.دمای ستون در 30 حفظ می شود. کروماتوگراف به صورت زیر برنامه ریزی می شود.
زمان (دقیقه) محلول A (%) محلول B (%) شستشو
0–35 35 65 ایزوکراتیک
شیب خطی 35-60 35®80 65®20
گرادیان خطی 60-70 80®35 20®65
70-80 35 65 ایزوکراتیک محلول مناسب بودن سیستم را کروماتوگراف کنید و پاسخ های پیک را طبق دستورالعمل ثبت کنید: زمان ماند نسبی برای ترکیب A مرتبط با پاکلی تاکسل حدود 0.78 و برای ترکیب B مربوط به پاکلی تاکسل 0.86 است (نسبت به زمان ماند برای پاکلی تاکسل به دست آمده از راه حل تست)؛و وضوح، R، بین ترکیب A مرتبط با پاکلیتاکسل و ترکیب B مربوط به پاکلیتاکسل کمتر از 1.0 نیست.محلول استاندارد را کروماتوگراف کنید و پاسخ های پیک را مطابق دستورالعمل ثبت کنید: انحراف استاندارد نسبی برای تزریق های تکراری بیشتر از 2.0٪ نیست.
روش کار- حجمی (حدود 15 میکرولیتر) از محلول آزمایش را به کروماتوگراف تزریق کنید، کروماتوگرام را ثبت کنید و نواحی پیک های اصلی را اندازه گیری کنید.درصد هر ناخالصی در قسمت پاکلیتاکسل را با فرمول محاسبه کنید:
100 (جمعه / rU)
که در آن F ضریب پاسخ نسبی برای هر پیک ناخالصی است (برای مقادیر به جدول 1 مراجعه کنید).ri منطقه اوج برای هر ناخالصی فردی است.و rU ناحیه پیک پاکلی تاکسل است.
میز 1
زمان نگهداری نسبی ضریب پاسخ نسبی (F) محدودیت نام (%)
0.24 1.29 باکاتین III 0.2
0.53 1.00 10-Deacetylpaclitaxel 0.5
0.57 1.00 7-Xylosylpaclitaxel 0.2
0.78 1.26 سفالومانین (ترکیب A مرتبط با پاکلیتاکسل) a11
0.78 1.26 2'',3''-Dihydrocephalomannine a21
0.86 1.00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (ترکیب مربوط به پاکلیتاکسل B) 0.5
1.10 1.00 بنزیل آنالوگ3 b12
1.10 1.00 3 اینچ، 4 اینچ - دهیدرواپکلیتاکسل C b22
1.40 1.00 7-اپی سفالومانین 0.3
1.85 1.00 7-Epipaclitaxel 0.5
1 بسته به مقادیر نسبی موجود، وضوح ممکن است برای این پیک ها ناقص باشد.مجموع a1 و a2 بیش از 0.5٪ نیست.
2 بسته به مقادیر نسبی موجود، وضوح ممکن است برای این پیک ها ناقص باشد.مجموع b1 و b2 بیش از 0.5٪ نیست.
3 نام شیمیایی زیر به ترکیب مرتبط، آنالوگ بنزیل اختصاص داده شده است: باکاتین III 13-استر با (2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(2-phenylacetylamino)propanoic acid.
علاوه بر تجاوز نکردن از حد مجاز ناخالصی‌های مربوط به پاکلیتاکسل در جدول 1، بیش از 0.1 درصد از ناخالصی‌های منفرد دیگر یافت نمی‌شود.و بیش از 2.0٪ از کل ناخالصی ها یافت نمی شود.
تست 2 (برای مواد برچسب‌گذاری شده به‌عنوان تولید شده توسط یک فرآیند نیمه مصنوعی) - اگر ماده با این آزمایش مطابقت داشته باشد، برچسب‌گذاری نشان می‌دهد که با ترکیبات مربوط به USP تست 2 مطابقت دارد.
رقیق کننده - از استونیتریل استفاده کنید.
راه حل الف- از مخلوط آب و استونیتریل فیلتر شده و گاز زدایی شده استفاده کنید (3:2).
راه حل B-از استونیتریل فیلتر شده و گاز زدایی استفاده کنید.
فاز متحرک - از مخلوط های متغیر محلول A و محلول B مطابق دستورالعمل سیستم کروماتوگرافی استفاده کنید.در صورت لزوم تنظیمات را انجام دهید (به مناسب بودن سیستم در کروماتوگرافی 621 مراجعه کنید).
محلول مناسب بودن سیستم - مقادیر دقیق وزن شده USP Paclitaxel RS و USP Paclitaxel Related Compound B RS را در رقیق کننده حل کنید، در صورت لزوم تکان دهید و فراصوت کنید تا محلولی با غلظت های شناخته شده حدود 0.96 میلی گرم و 0.008 میلی گرم در میلی لیتر به دست آید.
محلول آزمایش - حدود 10 میلی گرم پاکلیتاکسل را که به طور دقیق وزن شده است، به یک فلاسک حجمی 10 میلی لیتری منتقل کنید، در آن حل کنید و با Diluent تا حجم رقیق کنید، در صورت لزوم تکان دهید و سونیک کنید و مخلوط کنید.
سیستم کروماتوگرافی (نگاه کنید به کروماتوگرافی 621) - کروماتوگرافی مایع به یک آشکارساز 227 نانومتری و یک ستون 4.6 میلی متر × 15 سانتی متر مجهز است که حاوی بسته بندی L1 3 میکرومتری است.سرعت جریان حدود 1.2 میلی لیتر در دقیقه است.دمای ستون در 35 حفظ می شود. کروماتوگراف به صورت زیر برنامه ریزی می شود.
زمان (دقیقه) محلول A (%) محلول B (%) شستشو
0-20 100 0 ایزوکراتیک
20-60 100®10 0®90 گرادیان خطی
60-62 10®100 90®0 گرادیان خطی
62-70 100 0 ایزوکراتیک محلول مناسب بودن سیستم را کروماتوگراف کنید و پاسخهای پیک را طبق دستورالعمل رویه ثبت کنید: زمان نگهداری نسبی برای ترکیب B مربوط به پاکلیتاکسل 0.94 و برای پاکلیتاکسل 1.0 است.وضوح، R، بین ترکیب B مربوط به پاکلیتاکسل و پاکلیتاکسل کمتر از 1.2 نیست.و انحراف استاندارد نسبی برای تزریق های تکراری بیش از 2.0٪ نیست.
روش کار- حجم های مساوی (حدود 15 میکرولیتر) از رقیق کننده و محلول آزمایش را به طور جداگانه به کروماتوگراف تزریق کنید، کروماتوگرام ها را ثبت کنید، و مساحت تمام پیک ها را اندازه گیری کنید.به دلیل رقیق کننده، از هر قله ای صرف نظر کنید.درصد هر ناخالصی در قسمت پاکلیتاکسل را با فرمول محاسبه کنید:
100 (جمعه / rs)
که در آن F ضریب پاسخ نسبی برای هر ناخالصی است (برای مقادیر به جدول 2 مراجعه کنید).ri مساحت پیک برای هر ناخالصی به دست آمده از محلول تست است.و rs مجموع مساحت تمام قله های بدست آمده از محلول تست است.
جدول 2
زمان نگهداری نسبی ضریب پاسخ نسبی (F) محدودیت نام (%)
0.11 1.24 10-Deacetylbaccatin III 0.1
0.20 1.29 باکاتین III 0.2
0.42 1.39 Photodegradant2 0.1
0.47 1.00 10-Deacetylpaclitaxel 0.5
0.80 1.00 2-Debenzoylpaclitaxel-2-pentenoate 0.7
0.921 1.00 حلقه اکستان باز شد، استیل و بنزوئیل مهاجرت کردند2 x1
0.921 1.00 10-Acetoacetylpaclitaxel x2
0.941 1.00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (ترکیب مربوط به پاکلیتاکسل B) x3
1.37 1.00 7-Epipaclitaxel 0.4
1.45 1.00 10،13-Bissidechainpaclitaxel2 0.5
1.54 1.00 7-Acetylpaclitaxel 0.6
1.80 1.75 13-Tes-baccatin III 0.1
2.14 1.00 7-Tes-paclitaxel 0.3
1 بسته به مقادیر نسبی موجود، وضوح ممکن است برای این پیک ها ناقص باشد.مجموع x1، x2 و x3 بیش از 0.4٪ نیست.
2 نام شیمیایی زیر به ترکیبات مرتبط Photodegradant اختصاص داده شده است.حلقه اکستان باز شد، استیل و بنزوئیل مهاجرت کردند.و 10،13-Bissidechainpaclitaxel:
فتو تخریب کننده
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-دی استیلوکسی-5,13-دی هیدروکسی-4,16,17,17-تترمتیل-8-oxa- 3-oxo-12-phenylcarbonyloxypentacyclo[11.3.1.01،11.04،11.07،10]heptadec-15-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoate
حلقه اکستان باز شد، استیل و بنزوئیل مهاجرت کردند
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-دی استیلوکسی-1,2,4,7-تتراهیدروکسی-8,12,15,15-تترا متیل-9-اکسو- 4-(فنیل کربونیل اکسی متیل) تری سیکلو[9.3.1.03،8] pentadec-11-en-13-yl
(2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoate
10،13-Bissidechainpaclitaxel
باکاتین III 13-استر با (2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoic acid, 10-ester با (2S,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino) ) اسید پروپانوئیک
علاوه بر تجاوز نکردن از حد مجاز ناخالصی‌های مربوط به پاکلیتاکسل در جدول 2، بیش از 0.1 درصد از ناخالصی‌های منفرد دیگر یافت نمی‌شود.و بیش از 2.0٪ از کل ناخالصی ها یافت نمی شود.
تست 3 (برای مواد برچسب‌گذاری شده به‌عنوان تولید شده توسط فرآیند تخمیر سلولی گیاهی) - اگر این ماده با این آزمایش مطابقت داشته باشد، برچسب‌گذاری نشان می‌دهد که با ترکیبات مربوط به USP تست 3 مطابقت دارد.
راه حل الف- مخلوطی از آب و استونیتریل فیلتر شده و گاز زدایی شده تهیه کنید (3:2).
محلول B-استونیتریل فیلتر شده و گاز زدایی را آماده کنید.
فاز متحرک - از مخلوط های متغیر محلول A و محلول B مطابق دستورالعمل سیستم کروماتوگرافی استفاده کنید.در صورت لزوم تنظیمات را انجام دهید (به مناسب بودن سیستم در کروماتوگرافی 621 مراجعه کنید).
محلول مناسب بودن سیستم- USP Paclitaxel Impurity Mixture RS را در استونیتریل حل کنید، در صورت لزوم، فراصوت را انجام دهید تا محلولی با غلظت شناخته شده حدود 1 میلی گرم در میلی لیتر به دست آید.
محلول استاندارد- مقدار دقیق وزن شده USP Paclitaxel RS را در استونیتریل حل کنید، در صورت لزوم با فراصوت انجام دهید تا محلولی با غلظت شناخته شده حدود 1 میلی گرم در میلی لیتر به دست آید.
محلول آزمایش - حدود 10 میلی گرم پاکلیتاکسل را که به طور دقیق وزن شده است، به یک فلاسک حجمی 10 میلی لیتری منتقل کنید.حل شده و با استونیتریل به حجم رقیق می شود، در صورت لزوم فراصوت می شود و مخلوط می شود.
سیستم کروماتوگرافی (نگاه کنید به کروماتوگرافی 621) - کروماتوگرافی مایع به یک آشکارساز 227 نانومتری و یک ستون 4.6 میلی متر × 15 سانتی متر مجهز است که حاوی بسته بندی L1 3 میکرومتری است.سرعت جریان حدود 1.2 میلی لیتر در دقیقه است.کروماتوگراف به صورت زیر برنامه ریزی می شود.
زمان (دقیقه) محلول A (%) محلول B (%) شستشو
0-28 100 0 ایزوکراتیک
28-33 100®98 0®2 گرادیان خطی
33-58 98®10 2®90 گرادیان خطی
58-60 10 90 ایزوکراتیک
60-63 10®100 90®0 گرادیان خطی
63-70 100 0 ایزوکراتیک محلول مناسب بودن سیستم را کروماتوگراف کنید و پاسخ های پیک را طبق دستورالعمل رویه ثبت کنید: وضوح، R، بین پاکلی تاکسل و آنالوگ بنزیل کمتر از 1.8 نیست.محلول استاندارد را کروماتوگراف کنید و پاسخ های پیک را مطابق دستورالعمل ثبت کنید: انحراف استاندارد نسبی برای تزریق های تکراری بیشتر از 2.0٪ نیست.[توجه- به منظور شناسایی پیک، زمان‌های نگهداری نسبی تقریبی در جدول 3 آورده شده است. زمان‌های ماند نسبی در مقابل پاکلیتاکسل اندازه‌گیری می‌شوند.]
جدول 3
نام محدودیت زمان نگهداری نسبی (%)
پروپیل آنالوگ 1 0.54 0.2
سفالومانین (ترکیب A مرتبط با پاکلیتاکسل) 0.76 0.5
sec-Butyl analog2 0.81 0.2
n-Butyl analog3 0.89 0.1
آنالوگ بنزیل 1.10 0.4
باکاتین VI 1.23 0.2
Pentyl analog4 1.31 0.2
7-اپی پاکلیتاکسل 1.51 0.4
1 نام شیمیایی زیر به ترکیب مرتبط آنالوگ پروپیل اختصاص داده شده است: باکاتین III 13-استر با (2R,3S)-3-butanoylamino-2-hydroxy-3-phenylpropanoic acid.
2 نام شیمیایی زیر به ترکیب مرتبط sec-Butyl آنالوگ اختصاص داده شده است: باکاتین III 13-استر با (2R,3S)-2-hydroxy-3-(2-methylbutanoylamino)-3-phenylpropanoic acid.
3 نام شیمیایی زیر به ترکیب مرتبط آنالوگ n-Butyl اختصاص داده شده است: باکاتین III 13-استر با (2S,3S)-2-hydroxy-3-(pentanoylamino)-3-phenylpropanoic acid.
4 نام شیمیایی زیر به ترکیب مرتبط پنتیل آنالوگ اختصاص داده شده است: باکاتین III 13-استر با (2R,3S)-3-(هگزانوآمینو)-2-هیدروکسی-3-فنیل پروپانوئیک اسید.
روش کار- حجمی (حدود 12 میکرولیتر) از محلول آزمایش را به کروماتوگراف تزریق کنید، کروماتوگرام را ثبت کنید و نواحی تمام پیک ها را اندازه گیری کنید.درصد هر ناخالصی در قسمت پاکلیتاکسل را با فرمول محاسبه کنید:
100 (ri / rU)
که در آن ری پاسخ هر ناخالصی فردی است.و rU مجموع مساحت تمام قله های بدست آمده از محلول تست است.علاوه بر تجاوز نکردن از حد مجاز ناخالصی‌های مربوط به پاکلیتاکسل در جدول 3، بیش از 0.1 درصد از ناخالصی‌های منفرد دیگر یافت نمی‌شود.و بیش از 2.0٪ از کل ناخالصی ها یافت نمی شود.
سنجش -
رقیق کننده- مخلوطی از متانول و اسید استیک تهیه کنید (200:1).
فاز متحرک - مخلوطی از آب و استونیتریل فیلتر شده و گاز زدایی شده تهیه کنید (11:9).در صورت لزوم تنظیمات را انجام دهید (به مناسب بودن سیستم در کروماتوگرافی 621 مراجعه کنید).
آماده سازی استاندارد - در صورت لزوم، با استفاده از فراصوت، مقدار دقیق وزن شده USP Paclitaxel RS را در رقیق کننده حل کنید و به صورت کمی و در صورت لزوم به تدریج با رقیق کننده رقیق کنید تا محلولی با غلظت شناخته شده حدود 1 میلی گرم در میلی لیتر به دست آید.
آماده سازی آزمایش - حدود 10 میلی گرم پاکلیتاکسل را که به طور دقیق وزن شده است، به یک فلاسک حجمی 10 میلی لیتری منتقل کنید.در Diluent حل کنید، در صورت لزوم با استفاده از سونیکاسیون، با Diluent به حجم رقیق شده و مخلوط کنید.
سیستم کروماتوگرافی (به کروماتوگرافی <621> مراجعه کنید) - کروماتوگرافی مایع مجهز به یک آشکارساز 227 نانومتری و یک ستون 4.6 میلی متر × 25 سانتی متر است که حاوی بسته بندی L43 5 میکرومتری است.سرعت جریان حدود 1.5 میلی لیتر در دقیقه است.آماده‌سازی استاندارد را کروماتوگراف کنید و پاسخ‌های پیک را طبق دستور رویه ثبت کنید: فاکتور باطله بین 0.7 و 1.3 است.و انحراف استاندارد نسبی برای تزریق های تکراری بیش از 1.5٪ نیست.
روش کار- حجم های مساوی (حدود 10 میکرولیتر) از آماده سازی استاندارد و آماده سازی سنجش را به طور جداگانه به کروماتوگراف تزریق کنید، کروماتوگرام ها را ثبت کنید و مناطق پیک های اصلی را اندازه گیری کنید.مقدار C47H51NO14 را بر حسب میلی گرم در بخشی از پاکلیتاکسل با فرمول محاسبه کنید:
10C (rU/rS)
که در آن C غلظت، بر حسب میلی گرم در میلی لیتر، USP Paclitaxel RS در آماده سازی استاندارد است.و rU و rS پاسخ‌های پیک برای پاکلیتاکسل به‌دست‌آمده از آماده‌سازی سنجش و آماده‌سازی استاندارد هستند.