L-tryptofaani CAS 73-22-3 (H-Trp-OH) -määritys 98,5-101,5 % tehtaan korkealaatuista

L-tryptofaani (H-Trp-OH) (CAS: 73-22-3) AJI 97 -testimenetelmä
Tunnistaminen: Vertaa näytteen infrapuna-absorptiospektriä standardin infrapuna-absorptiospektriin kaliumbromidikiekkomenetelmällä.
Ominaiskierto [α]20/D: Kuivattu näyte, C=1, H2O liukenee lämmittämällä
Liuoksen tila (transmittanssi): 0,5 g 20 ml:ssa 2 mol/l HCl:a, spektrofotometri, 430 nm, kennon paksuus 10 mm.
Kloridi (Cl): 0,7 g, A-1, viite: 0,40 ml 0,01 mol/l HCl
Ammonium (NH4): B-2
Sulfaatti (SO4): 1,2 g, (1), viite: 0,50 ml 0,005 mol/l H2SO4
Rauta (Fe): 0,75 g, (2), viite: 1,5 ml Iron Std.(0,01 mg/ml)
Raskasmetallit (Pb): 2,0 g, (4), viite: 2,0 ml Pb Std.(0,01 mg/ml)
Arseeni (As2O3): 2,0 g, (1), viite: 2,0 ml As2O3 Std.
Muut aminohapot: H2O, liuotetaan lämmittämällä (40 ℃) Testinäyte: 50 μg, A-6-a, kontrolli: L-Trp 0,25 μg
Kuivaushäviö: 105 ℃ 3 tuntia.
Jäännös syttyessä (sulfatoitu): AJI-testi 13
Määritys: kuivattu näyte, 200 mg, (1), 3 ml muurahaishappoa, 50 ml jääetikkaa, 0,1 mol/l HCLO4 1 ml = 20,423 mg C11H12N2O2
pH-testi: 1,0 g 100 ml:ssa H2O:ta

L-tryptofaani (H-Trp-OH) (CAS: 73-22-3) USP35-testimenetelmä
MÄÄRITELMÄ
Tryptofaani sisältää 98,5 % NLT:tä ja 101,5 % NMT:tä C11H12N2O2:ta L-tryptofaanina kuiva-aineesta laskettuna.
HENKILÖLLISYYSTODISTUS
A. INFRAPUNAabsorptio <197K>
MÄÄRITYS
MENETTELY
Näyteliuos: Aseta 200 mg tryptofaania 125 ml:n pulloon.Liuota seokseen, jossa on 3 ml muurahaishappoa ja 50 ml jääetikkaa.
Analyysi: Titrataan 0,1 N perkloorihapolla VS määrittämällä päätepiste potentiometrisesti.Suorita nollamääritys ja tee tarvittavat korjaukset (katso Titrimetria <541>).Jokainen ml 0,1 N perkloorihappoa vastaa 20,42 mg:aa C11H12N2O2.
Hyväksymiskriteerit: 98,5 % ~ 101,5 % kuivatusta
Epäpuhtaudet
Epäorgaaniset epäpuhtaudet
JÄÄNMÄN SYTYTYS <281>: NMT 0,1 %
KLORIDI JA SULFAATTI, kloridi <221>: 0,73 g:n annos ei sisällä enempää kloridia kuin vastaa 0,50 ml:aa 0,020 N suolahappoa (0,05 %).[HUOMAA – Lämmitä näytevalmistetta varovasti, jotta se liukenee tarvittaessa.]
KLORIDI JA SULFAATTI, Sulfaatti <221>: 0,33 g:n annos ei sisällä enempää sulfaattia kuin vastaa 0,10 ml:aa 0,020 N rikkihappoa (0,03 %).[HUOMAA - Lämmitä varovasti näytevalmistetta, jotta se liukenee tarvittaessa.
RAUTA <241>: NMT 30 ppm
RASKASMETALLIT, menetelmä II <231>: NMT 15ppm
Orgaaniset epäpuhtaudet
MENETTELY 1
Liuos A: Trifluorietikkahappo vedessä (1 ml/l)
Liuos B: Trifluorietikkahappo asetonitriili-vesiliuoksessa (80:20) (1 ml/l trifluorietikkahappoliuosta)
Vakioliuos: 1,0 mg/l USP tryptofaaniin liittyvää yhdistettä A RS ja USP tryptofaaniin liittyvää yhdistettä B RS vedessä
Näyteliuos: 10,0 mg/ml tryptofaania vedessä
Järjestelmän soveltuvuusliuos: 1,0 mg/l USP Tryptophan Related Compound B RS -yhdistettä vedessä
Liikkuva vaihe: Katso alla olevaa gradienttitaulukkoa.

Kromatografinen järjestelmä (katso Kromatografia <621>, Järjestelmän soveltuvuus.)
Tila: LC
Ilmaisin: UV 220 nm
Pylväs: 4,6 mm × 25 cm;5-µm pakkaus L1
Kolonnin lämpötila: 30°
Virtausnopeus: 1 ml/min
Injektiokoko: 20 µL
Järjestelmän soveltuvuus
Esimerkki: Järjestelmän soveltuvuusratkaisu
Soveltuvuusvaatimus
Suhteellinen keskihajonta: NMT 5,0 %
Analyysi
Näytteet: standardiliuos ja näyteliuos
Laske kunkin määrittelemättömän epäpuhtauden prosenttiosuus otetusta tryptofaanin annoksesta:
Tulos = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = kunkin määrittämättömän epäpuhtauden piikin pinta-ala näyteliuoksessa
rS = tryptofaaniin liittyvän yhdisteen B piikin pinta-ala standardiliuoksessa
CS = USP tryptofaaniin liittyvän yhdisteen B RS pitoisuus standardiliuoksessa (µg/ml)
CU = tryptofaanin pitoisuus näyteliuoksessa (µg/ml)
Hyväksymisperusteet
Epäpuhtauksien kokonaismäärä 1: NMT 0,01 % kaikista epäpuhtauksista, jotka eluoituvat ennen tryptofaanin huippua
Kokonaisepäpuhtaudet 2: NMT 0,03 % kaikista epäpuhtauksista, jotka eluoituvat tryptofaanipiikin jälkeen.[HUOM. Jätä pois tryptofaaniin liittyvän yhdisteen B huippu.]
Tryptofaaniin liittyvä yhdiste A: Jos näyteliuoksessa havaitaan tryptofaaniin liittyvän yhdisteen A huippu, suorita alla oleva testi menetelmää 2 varten: tryptofaaniin liittyvän yhdisteen A raja.
TOIMENPITEET 2: TRYPTOFAANIN LIITTYVÄN YHDISTEEN A RAJA
Liuos A: 18 mM yksiemäksinen natriumfosfaatti, suodatettu ja poistettu kaasusta (pH 2,5) ja asetonitriili (9:1)
Liuos B: 10 mM yksiemäksinen natriumfosfaatti, suodatettu ja poistettu kaasusta (pH 2,5) ja asetonitriili (1:1)
Liuos C: asetonitriili vedessä (7:3)
Standardiliuos: 0,1 mg/l USP Tryptophan Related Compound A RS -yhdistettä vedessä
Näyteliuos: 10,0 mg/ml tryptofaania vedessä
Liikkuva vaihe: Katso alla olevaa gradienttitaulukkoa

Kromatografinen järjestelmä
(Katso Kromatografia <621>, Järjestelmän soveltuvuus.)
Tila: LC
Ilmaisin: UV 216 nm
Pylväs: 3,9 mm × 15 cm;5-µm pakkaus L1
Kolonnin lämpötila: 30°
Virtausnopeus: 1 ml/min
Injektiokoko: 20 µL
Järjestelmän soveltuvuus
Näyte: Vakioliuos
Soveltuvuusvaatimus
Suhteellinen keskihajonta: NMT 5,0 %
Analyysi
Näytteet: standardiliuos ja näyteliuos
Laske tryptofaaniin liittyvän yhdisteen prosenttiosuus
A osa tryptofaania otettu:
Tulos = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = tryptofaaniin liittyvän yhdisteen A piikin pinta-ala näyteliuoksessa
rS = tryptofaaniin liittyvän yhdisteen A piikin pinta-ala standardiliuoksessa
CS = USP tryptofaaniin liittyvän yhdisteen A RS pitoisuus standardiliuoksessa (µg/ml)
CU = tryptofaanin pitoisuus näyteliuoksessa (µg/ml)
Hyväksymiskriteerit: NMT 10 ppm
ERITYISET TESTIT
OPTINEN KÄÄNTÖ, Ominaiskierto <781S>: -29,4° - -32,8°
Näyteliuos: 10 mg/ml, vedessä.[HUOM. Kuumenna varovasti, jotta se liukenee tarvittaessa.]
PH <791>: 5,5-7,0 liuoksessa (1:100)
Kuivaushäviö <731>: Kuivaa näytettä 105°:ssa 3 tuntia: se menettää NMT:tä 0,3 % painostaan.
LISÄVAATIMUKSET
PAKKAUS JA VARASTOINTI: Säilytä hyvin suljetuissa astioissa
USP:N VIITESTANDARDIT <11>
USP L-Tryptophan RS
USP tryptofaaniin liittyvä yhdiste A RS
3,3'-[etylideenibis(1H-indoli-1,3-diyyli)]bis[2S)-2-aminopropaani]happo.C24H26N4O4 432,49
USP tryptofaaniin liittyvä yhdiste B RS
2-asetamido-3-(1 H-indol-3-yyli)propaanihappo.C13H14N2O3 246,3