Orlistat CAS 96829-58-2 API painonpudotuslääkkeen puhtaus 98,0-101,5 %

Orlistaatti
C29H53NO5 495,73
l-leusiini, N-formyyli-, 1-[(3-heksyyli-4-okso-2-oksetanyyli)metyyli]dodekyyliesteri, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-formyyli-l-leusiini, esteri (3S,4S)-3-heksyyli-4-[(2S)-2-hydroksitridekyyli]-2-oksetanonin kanssa [96829-58-2].
MÄÄRITELMÄ
Orlistaatti sisältää NLT:tä 98,0 % ja NMT:tä 101,5 % C29H53NO5:tä vedettömänä, liuotinvapaana pohjana laskettuna.
HENKILÖLLISYYSTODISTUS
• A. Infrapuna-absorptio <197M>
• B. Näyteliuoksen pääpiikin retentioaika vastaa standardiliuoksen retentioaikaa, joka on saatu määrityksessä.
MÄÄRITYS
• Menettelytapa
[Huomautus - Vältä muovipullojen käyttöä minkä tahansa liuoksen valmistamiseen tai säilyttämiseen tässä analyysissä.]
Liikkuva faasi: asetonitriili, fosforihappo ja vesi (860:0,05:140)
Standardiliuos: 0,5 mg/ml USP Orlistat RS:ää liikkuvassa faasissa.Ruiskuta välittömästi valmistuksen jälkeen tai säilytä klo 5.
Näyteliuos: 0,5 mg/ml orlistaattia liikkuvassa faasissa.Ruiskuta välittömästi valmistuksen jälkeen tai säilytä klo 5.
Kromatografinen järjestelmä
(Katso Kromatografia <621>, Järjestelmän soveltuvuus.)
Tila: LC
Ilmaisin: UV 195
Pylväs: 3,9 mm × 15 cm;4-µm pakkaus L1
Virtausnopeus: 1,0 ml/min
Injektiokoko: 20 µL
Järjestelmän soveltuvuus
Näyte: Vakioliuos
Soveltuvuusvaatimukset
Suhteellinen keskihajonta: NMT 2,0 %
Analyysi
Näytteet: standardiliuos ja näyteliuos
Laske orlistaatin (C29H53NO5) prosenttiosuus otetusta orlistatin annoksesta:
Tulos = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = huippuvaste näyteliuoksesta
rS = standardiliuoksen huippuvaste
CS = USP Orlistat RS:n pitoisuus standardiliuoksessa (mg/ml)
CU = orlistaatin pitoisuus näyteliuoksessa (mg/ml)
Hyväksymiskriteerit: 98,0–101,5 % vedettömästä, liuotinvapaasta pohjasta
Epäpuhtaudet
Epäorgaaniset epäpuhtaudet
• Sytytysjäännös <281>: NMT 0,1 %
• Raskasmetallit, menetelmä II <231>: 20 ppm
Orgaaniset epäpuhtaudet
• Toimenpide 1: Orlistaattiin liittyvän yhdisteen A raja
Standardiliuos: 0,1 mg/ml USP Orlistat Related Compound A RS asetonissa
Näyteliuos: 50 mg/ml orlistaattia asetonissa
Kromatografinen järjestelmä
(Katso kromatografia <621>, ohutkerroskromatografia.)
Tila: TLC
Adsorbentti: 0,25 mm:n kerros kromatografista silikageeliseosta
Käyttötilavuus: 10 µL
Kehitettävä liuotinjärjestelmä: Tolueeni ja etyyliasetaatti (4:1)
Detektioliuos: Siirrä 2,5 g fosfomolybdeenihappoa ja 1 g serrisulfaattia 100 ml:n mittapulloon, liuotetaan ja laimennetaan metanolilla tilavuuteen.
Analyysi
Näytteet: standardiliuos ja näyteliuos
Poista levy ja ilmakuivaa se perusteellisesti.Suihkuta kuivattu levy Detection-liuoksella ja aseta levy uuniin 120 °C:seen 30 minuutiksi.
Hyväksymiskriteerit: Mikään näyteliuoksen toissijainen täplä, joka vastaa orlistaatin sukuista yhdistettä A, ei ole voimakkaampi kuin vastaava täplä standardiliuoksesta (0,2 %).
• Toimenpide 2: Orlistaattiin liittyvän yhdisteen B raja
Standardiliuos: 0,025 mg/ml USP Orlistat Related Compound B RS metyleenikloridissa
Näyteliuos: 50 mg/ml orlistaattia metyleenikloridissa
Piikkinäyteliuos: 50 mg/ml orlistaattia standardiliuoksessa
Kromatografinen järjestelmä
(Katso Kromatografia <621>, Järjestelmän soveltuvuus.)
Tila: GC
Ilmaisin: Liekin ionisaatio
Kolonni: 0,32 mm x 30 m sulatettu piidioksidi, päällystetty 0,25 µm:n kiinteällä G27-faasilla
Kolonnin lämpötila: Katso alla oleva lämpötilaohjelmataulukko.
Alkulämpötila () Lämpötilaramppi (/min) Loppulämpötila () Pitoaika loppulämpötilassa (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Lämpötila
Injektori: 270
Ilmaisin: 280
Kantokaasu: Helium
Virtausnopeus: 30 ml/min
Jakosuhde: 10:1
Injektiokoko: 2 µL
Järjestelmän soveltuvuus
Näyte: Vakioliuos
Soveltuvuusvaatimukset
Suhteellinen keskihajonta: NMT 10,0 %
Analyysi
Näytteet: Näyteliuos ja Piikkinäyteliuos
Laske orlistaattia vastaavan yhdisteen B prosenttiosuus otetusta orlistaatin annoksesta:
Tulos = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = orlistaattiin liittyvän yhdisteen B huippuvaste näyteliuoksesta
rSP = orlistaattiin liittyvän yhdisteen B huippuvaste piikkinäyteliuoksesta
CS = USP Orlistaattiin liittyvän yhdisteen B RS pitoisuus standardiliuoksessa (mg/ml)
CT = orlistaatin pitoisuus piikkinäyteliuoksessa (mg/ml)
Hyväksymiskriteerit: NMT Löytyy 0,05 % orlistaatin sukuista yhdistettä B.
• Toimenpide 3
[Huomautus - Vältä muovipullojen käyttöä minkä tahansa liuoksen valmistamiseen tai säilyttämiseen tässä analyysissä.]
Liikkuva faasi, standardiliuos ja näyteliuos: Valmistele määrityksen ohjeiden mukaisesti.
Järjestelmän soveltuvuusliuos: 10 µg/ml USP Orlistat RS:ää, 0,1 µg/ml USP Orlistat Related Compound C RS:ää ja 0,25 µg/ml USP Orlistaattiin liittyvää yhdistettä D RS liikkuvassa faasissa
Kromatografinen järjestelmä
(Katso Kromatografia <621>, Järjestelmän soveltuvuus.)
Jatka määrityksessä ohjeiden mukaisesti, paitsi kromatografoi järjestelmän soveltuvuusliuos.
Järjestelmän soveltuvuus
Esimerkki: Järjestelmän soveltuvuusratkaisu
Soveltuvuusvaatimukset
Signaali-kohina-suhde: NLT 3 orlistaattiin liittyvän yhdisteen C ja orlistaatin sukuisen yhdisteen D huipuissa
Suhteellinen standardipoikkeama: NMT 10,0 % orlistaatin huipukselle
Analyysi
Näytteet: standardiliuos ja näyteliuos
Laske kunkin epäpuhtauden prosenttiosuus otetusta orlistatin annoksesta:
Tulos = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = huippuvaste näyteliuoksesta jokaiselle yksittäiselle epäpuhtaudelle
rS = USP Orlistat RS:n huippuvaste standardiliuoksesta
CS = USP Orlistat RS:n pitoisuus standardiliuoksessa (mg/ml)
CU = orlistaatin pitoisuus näyteliuoksessa (mg/ml)
F = suhteellinen vastetekijä epäpuhtaustaulukon 1 mukaisesti
Hyväksymiskriteerit: Katso epäpuhtaustaulukko 1.
Epäpuhtaustaulukko 1
Nimi Suhteellinen säilytysaika Suhteellinen vastetekijän hyväksymiskriteerit, NMT (%)
Formylleusinea 0,10 4,0 0,2
Orlistaatin sukuinen yhdiste C 0,13 33 0,05
Orlistaatti avoimen renkaan epimerbi 0,44 1,0 0,2
Orlistaatin sukuinen yhdiste D* 0,90 - Laskettu
Toimenpide 4
Orlistaatti avoimen renkaan amidekki* 0,90 - Laskettu in
Toimenpide 4
Orlistaatti 1,00 - -
d-leusiiniorlistaatti 1,18 1,0 0,2
Yksittäinen tunnistamaton epäpuhtaus - 1,0 0,1
* Koeluutit tässä LC-järjestelmässä, määritetty menetelmällä 4.
N-formyyli-l-leusiini.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-formyyliamino-4-metyylipentanoyylioksi]-2-heksyyli-3-hydroksiheksadekaanihappo.
c N-formyyli-l-leusiini (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroksi-3-[1-fenyyli-R-etyylikarbomoyyli]nonyyli]dodekyyliesteri.
d N-formyyli-d-leusiini (S)-1-[[(2S,3S)-3-heksyyli-4-okso-2-oksetanyyli]metyyli]dodekyyliesteri tai enantiomeeri.
• Toimenpide 4: Orlistaattiin liittyvän yhdisteen D raja
Liikkuva faasi: metanoli ja vesi (83:17)
Järjestelmän soveltuvuusliuos: 4 mg/ml USP Orlistat RS:ää ja 2,4 µg/ml USP Orlistat Related Compound D RS:ää asetonitriilissä, vastaavasti
Standardiliuos: 5,0 mg/ml USP Orlistat RS:ää asetonitriilissä
Näyteliuos: 5,0 mg/ml orlistaattia asetonitriilissä
Kromatografinen järjestelmä
(Katso Chromatography 621, System Suitability.)
Tila: LC
Ilmaisin: 205 nm
Pylväs: 4,0 mm × 25 cm;5-µm pakkaus L7
Virtausnopeus: 0,6 ml/min
Injektiokoko: 20 µL
Järjestelmän soveltuvuus
Esimerkki: Järjestelmän soveltuvuusratkaisu
Soveltuvuusvaatimukset
Signaali-kohinasuhde: NLT 3 orlistaattiin liittyvän yhdisteen D-huipun osalta
Suhteellinen standardipoikkeama: NMT 10,0 % orlistaatin huipukselle
Analyysi
Näytteet: standardiliuos ja näyteliuos
Laske kunkin epäpuhtauden prosenttiosuus otetusta orlistatin annoksesta:
Tulos = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = huippuvaste näyteliuoksesta jokaiselle yksittäiselle epäpuhtaudelle
rS = USP Orlistat RS:n huippuvaste standardiliuoksesta
CS = USP Orlistat RS:n pitoisuus standardiliuoksessa (µg/ml)
CU = orlistaatin pitoisuus näyteliuoksessa (µg/ml)
F = suhteellinen vastetekijä, joka on saatu epäpuhtaustaulukosta 2
Hyväksymiskriteerit: Katso epäpuhtaustaulukko 2.
Epäpuhtaustaulukko 2
Nimi Suhteellinen säilytysaika Suhteellinen vastetekijän hyväksymiskriteerit, NMT (%)
Orlistaatin sukuinen yhdiste D 0,94 1,0 0,2
Orlistaatti 1,00 - -
Orlistaatti avoimen renkaan amidi 1,25 4,3 0,1
N-formyyli-l-leusiini (S)-1-[(2S,3S)-2-hydroksi-3-[1-fenyyli-R-etyylikarbomoyyli]nonyyli]dodekyyliesteri.
• Toimenpide 5: Orlistaattiin liittyvän yhdisteen E raja
Puskuri: 0,4 N boraattiliuos, säädetty pH-arvoon 10,2
Derivitoiva aine: o-ftaldehydi (OPA) -liuos.[Huomautus: jos sitä ei voida saada kaupallisesti, johdannainen voidaan valmistaa 1 %:na kumpaakin 3-merkaptopropionihappoa ja o-ftaalidialdehydiä 0,4 M boraattipuskuriliuoksessa.]
Liuos A: Siirrä 4,1 g natriumasetaattitrihydraattia ja 40 mg etyleenidiamiinitetraetikkahappoa (EDTA) 1 litran mittapulloon.Liuota 950 ml:aan vettä ja säädä pH 7,2 0,1 N natriumhydroksidilla.Laimenna vedellä tilavuuteen, lisää 2,5 ml tetrahydrofuraania ja sekoita.Suodata ja kaasuttele.
Liuos B: Siirrä 2,7 g natriumasetaattitrihydraattia ja 40 mg EDTA:ta 1 litran mittapulloon.Liuota 200 ml:aan vettä ja säädä pH 7,2 0,1 N natriumhydroksidilla.Lisää 800 ml asetonitriiliä, suodata ja poista kaasut.
Liikkuva vaihe: Katso alla olevaa gradienttitaulukkoa.
Aika (min) Liuos A (%) Liuos B (%)
0 96,7 3.3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3.3
45 96,7 3.3
Standardiliuos: Siirrä punnittu määrä noin 0,2 mg USP-orlistat-sukuista yhdistettä E RS 20 ml:n head-space-pulloon.Lisää 10 ml 4 N natriumhydroksidia ja sulje pullo.Kuumenna injektiopulloa 100 °C:seen 1 tunnin ajan ja anna sen jäähtyä huoneenlämpötilaan.Siirrä 2 ml saatua liuosta 50 ml:n mittapulloon ja laimenna vedellä tilavuuteen.Lisää 0,5 ml:aan tätä liuosta 2,0 ml puskuria ja 0,5 ml derivatisointiainetta.
Näyteliuos: Jatka standardiliuoksen ohjeiden mukaan, mutta käytä sen sijaan 25 mg orlistattia korvaamaan 0,2 mg USP Orlistat Related Compound E RS.
Kromatografinen järjestelmä
(Katso Kromatografia <621>, Järjestelmän soveltuvuus.)
Tila: LC
Detektori: Fluoresenssi 340 nm (viritys);450 nm (emissio)
Sarakkeet
Suoja: 2,1 mm × 2 cm;50-µm pakkaus L1
Analyyttinen: 2,1 mm × 20 cm;pakkaus L1
Virtausnopeus: 0,5 ml/min
Injektiokoko: 20 µL
Järjestelmän soveltuvuus
Näyte: Vakioliuos
Soveltuvuusvaatimukset
Suhteellinen standardipoikkeama: NMT 6,0 % orlistaattiin liittyvän yhdisteen E huipun osalta
Analyysi
Näytteet: standardiliuos ja näyteliuos
Laske tämän epäpuhtauden prosenttiosuus otetusta orlistatin annoksesta:
Tulos = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = huippuvaste orlistaattiin liittyvälle yhdisteelle E näyteliuoksessa
rS = huippuvaste USP Orlistat Related Compound E RS:lle standardiliuoksessa
CS = USP Orlistaattiin liittyvän yhdisteen E RS pitoisuus standardiliuoksessa (mg/ml)
CU = orlistaatin pitoisuus näyteliuoksessa (mg/ml)
Hyväksymisperusteet
Yksittäinen epäpuhtaus: NMT 0,2 % orlistaatin sukuista yhdistettä E löytyy.
Epäpuhtauksien kokonaismäärä: NMT 1,0 % epäpuhtauksien kokonaismäärästä löytyy, ja menetelmien 1, 2, 3, 4 ja 5 tulokset lisätään.
ERITYISET TESTIT
• Optinen kierto, ominaiskierto <781>
Näyteliuos: 30 mg/ml dehydratoidussa alkoholissa
Hyväksymisehdot: -48,0 ja -51,0 välillä klo 20
• Veden määritys, menetelmä Ic <921>: NMT 0,2 %
LISÄVAATIMUKSET
• Pakkaus ja varastointi: Säilytä hyvin suljetuissa astioissa 2-8 ℃.
• USP-viitestandardit <11>
USP Orlistat RS
USP Orlistat Related Compound A RS
USP Orlistat Related Compound B RS
USP Orlistat Related Compound C RS
USP Orlistat Related Compound D RS
USP Orlistat Related Compound E RS
USP35