Paklitakseli (Taxol) CAS 33069-62-4 Assay (HPLC) 97,0-102,0 %

Paklitakseli
C47H51NO14 853,91
Bentseenipropaanihappo, -(bentsoyyliamino)-hydroksi-, 6,12b-bis(asetyylioksi)-12-(bentsoyylioksi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahydro-4,11-dihydroksi-4a,8,13,13-tetrametyyli-5-okso-7,11-metano-1 H-syklodeka[3,4]bents[1,2-b]okset-9-yyli esteri, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-dodekahydro-4,6, 9,11,12,12b-heksahydroksi-4a,8,13,13-tetrametyyli-7,11-metano-5H-syklodeka[3,4]bents[1,2-b]okset-5-oni 6, 12b-diasetaatti, 12-bentsoaatti, 9-esteri (2R,3S)-N-bentsoyyli-3-fenyyli-isoseriinin kanssa [33069-62-4].
Paklitakseli sisältää vähintään 97,0 prosenttia ja enintään 102,0 prosenttia C47H51NO14:ää vedettömänä, liuotinvapaana laskettuna.
[Varoitus - Paclitaxel on sytotoksinen.Paklitakselin hiukkasten hengittämistä ja ihon altistamista on vältettävä.]
Pakkaus ja varastointi - Säilytä tiiviissä, valonkestävissä astioissa ja säilytä valvotussa huoneenlämpötilassa.
Merkinnät – Merkinnät osoittavat materiaalin tuottamiseen käytetyn prosessin tyypin ja siihen liittyvät yhdisteet -testin, jonka materiaali täyttää.
USP-viitestandardit <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS Napsauta nähdäksesi rakenteen
USP Paclitaxel Related Compound A RS
Kefalomanniini.
USP Paclitaxel Related Compound B RS
10-deasetyyli-7-epipaklitakseli.
USP Paclitaxel Inpurity Mixture RS
Paklitakselin ja seuraavien sukulaisten yhdisteiden seos: propyylianalogi, kefalomanniini, sek-butyylianalogi, n-butyylianalogi, bentsyylianalogi, bakkatiini VI, pentyylianalogi ja 7-epipaklitakseli.
Henkilöllisyystodistus-
V: Infrapuna-absorptio <197K>.
B: Määritysvalmisteen kromatogrammin pääpiikin retentioaika vastaa määrityksessä saadun standardivalmisteen kromatogrammin retentioaikaa.
Ominaiskierto 781S: välillä 49,0 - 55,0 20 °C:ssa, laskettuna vedettömältä, liuotinvapaalta pohjalta.
Testiliuos: 10 mg/ml, metanolissa.
Mikrobien laskentatestit <61> ja testit tietyille mikro-organismeille <62> - Aerobisten mikrobien kokonaismäärä ei ylitä 100 pmy/g.Se täyttää Staphylococcus aureuksen, Pseudomonas aeruginosan, Salmonella-lajien ja Escherichia colin poissaolotestien vaatimukset.
Bakteerien endotoksiinit 85-Se sisältää enintään 0,4 USP endotoksiiniyksikköä paklitakselin milligrammaa kohden.
Vesi, menetelmä Ic <921>: enintään 4,0 %.
Sytytysjäännös <281>: enintään 0,2 %.
Raskasmetallit, menetelmä II <231>: 0,002 %.
Liittyvät yhdisteet -
testi 1 (materiaalille, joka on merkitty eristetyksi luonnollisista lähteistä) - Jos materiaali on tämän testin mukainen, merkintä osoittaa, että se täyttää USP:n liittyvien yhdisteiden testin 1.
Laimennusaine – Valmistele määrityksessä ohjeiden mukaisesti.
Liuos A – Valmista suodatettu asetonitriili, josta on poistettu kaasut.
Liuos B – Valmista suodatettu vesi, josta on poistettu kaasut.
Liikkuva faasi - Käytä liuoksen A ja liuoksen B vaihtelevia seoksia kromatografiajärjestelmää koskevien ohjeiden mukaisesti.Tee säädöt tarvittaessa (katso Järjestelmän soveltuvuus kohdassa Kromatografia 621).
Järjestelmän soveltuvuusliuos – Liuota tarkasti punnitut määrät USP Paclitaxel Related Compound A RS ja USP Paclitaxel Related Compound B RS metanoliin saadaksesi liuoksen, jonka tunnetut pitoisuudet ovat noin 10 µg/ml.Siirrä 5,0 ml tätä liuosta 50 ml:n mittapulloon, laimenna Diluentilla tilavuuteen ja sekoita.
Standardiliuos - Liuota tarkasti punnittu määrä USP Paclitaxel RS:ää sonikoinnin avulla laimentimeen ja laimenna kvantitatiivisesti ja tarvittaessa vaiheittain Diluentilla, jotta saadaan liuos, jonka tunnettu konsentraatio on noin 5 µg/ml.
Testiliuos - Käytä määritysvalmistetta.
Kromatografiajärjestelmä (katso Kromatografia <621>) - Nestekromatografi on varustettu 227 nm:n detektorilla ja 4,6 mm × 25 cm:n kolonnilla, joka sisältää 5 µm:n täytteen L43.Virtausnopeus on noin 2,6 ml minuutissa.Kolonnin lämpötila pidetään 30 °C:ssa. Kromatografi ohjelmoidaan seuraavasti.
Aika (minuutit) Liuos A (%) Liuos B (%) Eluointi
0–35 35 65 isokraattinen
35–60 35®80 65®20 lineaarinen gradientti
60–70 80®35 20®65 lineaarinen gradientti
70–80 35 65 isokraattinen Kromatografoi järjestelmän soveltuvuusliuos ja tallenna huippuvasteet ohjeiden mukaisesti: suhteelliset retentioajat ovat noin 0,78 paklitakselin sukuiselle yhdisteelle A ja 0,86 paklitakselin sukuiselle yhdisteelle B (suhteessa paklitakselin retentioaikaan, joka on saatu paklitakselista). testiratkaisu);ja erotuskyky R paklitakseliin liittyvän yhdisteen A ja paklitakselin sukuisen yhdisteen B välillä ei ole pienempi kuin 1,0.Kromatografoi standardiliuos ja tallenna huippuvasteet menettelyn ohjeiden mukaisesti: suhteellinen standardipoikkeama toistetuissa injektioissa on enintään 2,0 %.
Toimenpide - Injektoidaan tilavuus (noin 15 µl) testiliuosta kromatografiin, kirjataan kromatogrammi ja mitataan tärkeimpien piikkien alueet.Laske kunkin epäpuhtauden prosenttiosuus paklitakselin osassa kaavalla:
100 (pe / ru)
jossa F on suhteellinen vastetekijä kullekin epäpuhtaushuipukselle (katso arvot taulukosta 1);ri on kunkin yksittäisen epäpuhtauden piikin pinta-ala;ja rU on paklitakselin huippualue.
pöytä 1
Suhteellinen säilytysaika Suhteellinen vastetekijä (F) nimiraja (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-deasetyylipaklitakseli 0,5
0,57 1,00 7-ksylosyylipaklitakseli 0,2
0,78 1,26 kefalomanniini (paklitakselin sukuinen yhdiste A) a11
0,78 1,26 2", 3"-dihydrokefalomanniini a21
0,86 1,00 10-deasetyyli-7-epipaklitakseli (paklitakselin sukuinen yhdiste B) 0,5
1,10 1,00 Bentsyylianalogi3 b12
1,10 1,00 3'',4''-dehydropaklitakseli C b22
1,40 1,00 7-episefalomanniini 0,3
1,85 1,00 7-epipaklitakseli 0,5
1 Resoluutio voi olla epätäydellinen näille piikeille riippuen läsnä olevista suhteellisista määristä;a1:n ja a2:n summa on enintään 0,5 %.
2 Näiden piikkien erotus voi olla epätäydellinen riippuen läsnä olevista suhteellisista määristä;b1:n ja b2:n summa on enintään 0,5 %.
3 Seuraava kemiallinen nimi on annettu vastaavalle yhdisteelle, bentsyylianalogille: Bakkatiini III 13-esteri (2R,3S)-2-hydroksi-3-fenyyli-3-(2-fenyyliasetyyliamino)propaanihapon kanssa.
Sen lisäksi, että taulukon 1 paklitakseliin liittyvien epäpuhtauksien rajoja ei ylitetä, muita yksittäisiä epäpuhtauksia ei löydy enempää kuin 0,1 %;ja enintään 2,0 % kaikista epäpuhtauksista löytyy.
testi 2 (materiaalille, joka on merkitty puolisynteettisellä prosessilla tuotetuksi) – Jos materiaali on tämän testin mukainen, merkintä osoittaa, että se täyttää USP:n liittyvien yhdisteiden testin 2.
Laimennusaine - Käytä asetonitriiliä.
Liuos A - Käytä suodatettua ja kaasuttomaa seosta, jossa on vettä ja asetonitriiliä (3:2).
Liuos B - Käytä suodatettua asetonitriiliä, josta on poistettu kaasut.
Liikkuva faasi - Käytä liuoksen A ja liuoksen B vaihtelevia seoksia kromatografiajärjestelmää koskevien ohjeiden mukaisesti.Tee säädöt tarvittaessa (katso Järjestelmän soveltuvuus kohdassa Kromatografia 621).
Järjestelmän soveltuvuusliuos - Liuota tarkasti punnitut määrät USP Paclitaxel RS:ää ja USP Paclitaxel Related Compound B RS:ää laimennusaineeseen, ravista ja sonikoi tarvittaessa, jotta saadaan liuos, jonka tunnetut pitoisuudet ovat vastaavasti noin 0,96 mg ja 0,008 mg/ml.
Testiliuos - Siirrä noin 10 mg tarkasti punnittua paklitakselia 10 ml:n mittapulloon, liuotetaan ja laimennetaan Diluentilla tilavuuteen, ravistetaan ja sonikoidaan tarvittaessa ja sekoitetaan.
Kromatografiajärjestelmä (katso Kromatografia 621) – Nestekromatografi on varustettu 227 nm:n detektorilla ja 4,6 mm × 15 cm:n kolonnilla, joka sisältää 3 µm:n täytteen L1.Virtausnopeus on noin 1,2 ml minuutissa.Kolonnin lämpötila pidetään 35 °C:ssa. Kromatografi ohjelmoidaan seuraavasti.
Aika (minuutit) Liuos A (%) Liuos B (%) Eluointi
0-20 100 0 isokraattinen
20-60 100®10 0®90 lineaarinen gradientti
60-62 10®100 90®0 lineaarinen gradientti
62-70 100 0 isokraattinen Kromatografoi järjestelmän soveltuvuusliuos ja tallenna huippuvasteet menettelyn ohjeiden mukaisesti: suhteelliset retentioajat ovat noin 0,94 paklitakseliin liittyvälle yhdisteelle B ja 1,0 paklitakselille;erotuskyky R paklitakseliin liittyvän yhdisteen B ja paklitakselin välillä on vähintään 1,2;ja suhteellinen standardipoikkeama toistuville injektioille on enintään 2,0 %.
Toimenpide - Injektoidaan erikseen yhtä suuret tilavuudet (noin 15 µl) laimennusainetta ja testiliuosta kromatografiin, kirjataan kromatogrammit ja mitataan kaikkien piikkien pinta-alat.Älä huomioi laimennusaineesta johtuvia huippuja.Laske kunkin epäpuhtauden prosenttiosuus paklitakselin osassa kaavalla:
100 (pe / rs)
jossa F on suhteellinen vastetekijä kullekin epäpuhtaudelle (katso arvot taulukosta 2);ri on kunkin testiliuoksesta saadun epäpuhtauden piikin pinta-ala;ja rs on kaikkien testiliuoksesta saatujen piikkien pintojen summa.
Taulukko 2
Suhteellinen säilytysaika Suhteellinen vastetekijä (F) nimiraja (%)
0,11 1,24 10-deasetyylibakkatiini III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Valohajoava 2 0,1
0,47 1,00 10-deasetyylipaklitakseli 0,5
0,80 1,00 2-debentsoyylipaklitakseli-2-pentenoaatti 0,7
0,921 1,00 Oksetaanirengas avattu, asetyyli ja bentsoyyli siirtyneet 2 x 1
0,921 1,00 10-asetoasetyylipaklitakseli x2
0,941 1,00 10-deasetyyli-7-epipaklitakseli (paklitakselin sukuinen yhdiste B) x3
1,37 1,00 7-epipaklitakseli 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechain paklitakseli2 0,5
1,54 1,00 7-asetyylipaklitakseli 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paklitakseli 0,3
1 Resoluutio voi olla epätäydellinen näille piikeille riippuen läsnä olevista suhteellisista määristä;x1, x2 ja x3 summa on enintään 0,4 %.
2 Seuraavat kemialliset nimet on annettu vastaaville yhdisteille Valohajoava aine;Oksetaanirengas avautui, asetyyli ja bentsoyyli siirtyivät;ja 10,13-Bissidechain paklitakseli:
Valohajoava aine
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diasetyylioksi-5,13-dihydroksi-4,16,17,17-tetrametyyli-8-oksa- 3-okso-12-fenyylikarbonyylioksipentasyklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadek-15-yyli
(2R,3S)-2-hydroksi-3-fenyyli-3-(fenyylikarbonyyliamino)propanoaatti
Oksetaanirengas avautui, asetyyli ja bentsoyyli siirtyivät
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diasetyylioksi-1,2,4,7-tetrahydroksi-8,12,15,15-tetrametyyli-9-okso- 4-(fenyylikarbonyylioksimetyyli)trisyklo[9.3.1.03,8]pentadek-11-en-13-yyli
(2R,3S)-2-hydroksi-3-fenyyli-3-(fenyylikarbonyyliamino)propanoaatti
10,13-Bissidechain paklitakseli
Baccatin III 13-esteri (2R,3S)-2-hydroksi-3-fenyyli-3-(fenyylikarbonyyliamino)propaanihapon kanssa, 10-esteri (2S,3S)-2-hydroksi-3-fenyyli-3-(fenyylikarbonyyliamino) kanssa )propaanihappo
Sen lisäksi, että paklitakseliin liittyvien epäpuhtauksien raja-arvot eivät ylity taulukossa 2, muita yksittäisiä epäpuhtauksia ei löydy enempää kuin 0,1 %;ja enintään 2,0 % kaikista epäpuhtauksista löytyy.
testi 3 (materiaalille, joka on merkitty kasvisolufermentaatioprosessilla tuotetuksi) – Jos materiaali on tämän testin mukainen, merkintä osoittaa, että se täyttää USP:n liittyvien yhdisteiden testin 3.
Liuos A – Valmista suodatettu ja kaasuttomaksi tehty veden ja asetonitriilin seos (3:2).
Liuos B – Valmista suodatettu asetonitriili, josta on poistettu kaasut.
Liikkuva faasi - Käytä liuoksen A ja liuoksen B vaihtelevia seoksia kromatografiajärjestelmää koskevien ohjeiden mukaisesti.Tee säädöt tarvittaessa (katso Järjestelmän soveltuvuus kohdassa Kromatografia 621).
Järjestelmän soveltuvuusliuos - Liuota USP Paclitaxel Impurity Mixture RS asetonitriiliin, sonikoidaan tarvittaessa, jotta saadaan liuos, jonka tunnettu pitoisuus on noin 1 mg/ml.
Vakioliuos - Liuota tarkasti punnittu määrä USP Paclitaxel RS:ää asetonitriiliin, sonikoidaan tarvittaessa, jotta saadaan liuos, jonka tunnettu konsentraatio on noin 1 mg/ml.
Testiliuos - Siirrä noin 10 mg tarkasti punnittua paklitakselia 10 ml:n mittapulloon.Liuota ja laimenna asetonitriilillä tilavuuteen, sonikoidaan tarvittaessa ja sekoita.
Kromatografiajärjestelmä (katso Kromatografia 621) – Nestekromatografi on varustettu 227 nm:n detektorilla ja 4,6 mm × 15 cm:n kolonnilla, joka sisältää 3 µm:n täytteen L1.Virtausnopeus on noin 1,2 ml minuutissa.Kromatografi ohjelmoidaan seuraavasti.
Aika (minuutit) Liuos A (%) Liuos B (%) Eluointi
0-28 100 0 isokraattinen
28-33 100®98 0®2 lineaarinen gradientti
33–58 98®10 2®90 lineaarinen gradientti
58-60 10 90 isokraattinen
60-63 10®100 90®0 lineaarinen gradientti
63-70 100 0 isokraattinen Kromatografoi järjestelmän soveltuvuusliuos ja tallenna huippuvasteet ohjeiden mukaisesti: paklitakselin ja bentsyylianalogin välinen erotuskyky R on vähintään 1,8.Kromatografoi standardiliuos ja tallenna huippuvasteet menettelyn ohjeiden mukaisesti: suhteellinen standardipoikkeama toistetuissa injektioissa on enintään 2,0 %.[huomautus—Piikin tunnistamista varten likimääräiset suhteelliset retentioajat on annettu taulukossa 3. Suhteelliset retentioajat on mitattu verrattuna paklitakseliin.]
Taulukko 3
Nimen suhteellinen säilytysaika (%)
Propyylianalogi1 0,54 0,2
Kefalomanniini (paklitakselin sukuinen yhdiste A) 0,76 0,5
sek-butyylianalogi2 0,81 0,2
n-butyylianalogi3 0,89 0,1
Bentsyylianalogi 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentyylianalogi4 1,31 0,2
7-epipaklitakseli 1,51 0,4
1 Seuraava kemiallinen nimi on annettu samankaltaiselle yhdisteelle Propyylianalogi: Bakkatiini III 13-esteri (2R,3S)-3-butanoyyliamino-2-hydroksi-3-fenyylipropaanihapon kanssa.
2 Seuraava kemiallinen nimi on annettu samankaltaiselle yhdisteelle sec-butyylianalogi: Bakkatiini III 13-esteri (2R,3S)-2-hydroksi-3-(2-metyylibutanoyyliamino)-3-fenyylipropaanihapon kanssa.
3 Seuraava kemiallinen nimi on annettu samankaltaiselle yhdisteelle n-butyylianalogi: Bakkatiini III 13-esteri (2S,3S)-2-hydroksi-3-(pentanoyyliamino)-3-fenyylipropaanihapon kanssa.
4 Seuraava kemiallinen nimi on annettu samankaltaiselle yhdisteelle Pentyylianalogi: Bakkatiini III 13-esteri (2R,3S)-3-(heksanoyyliamino)-2-hydroksi-3-fenyylipropaanihapon kanssa.
Toimenpide - Ruiskuta tilavuus (noin 12 µl) testiliuosta kromatografiin, kirjaa kromatogrammi ja mittaa kaikkien piikkien pinta-alat.Laske kunkin epäpuhtauden prosenttiosuus paklitakselin osassa kaavalla:
100 (ri / ruU)
jossa ri on kunkin yksittäisen epäpuhtauden vaste;ja rU on kaikkien testiliuoksesta saatujen piikkien pintojen summa.Sen lisäksi, että paklitakseliin liittyvien epäpuhtauksien rajoja ei ylitetä taulukossa 3, muita yksittäisiä epäpuhtauksia ei löydy enempää kuin 0,1 %;ja enintään 2,0 % kaikista epäpuhtauksista löytyy.
Määritys-
Laimennusaine – Valmista metanolin ja etikkahapon seos (200:1).
Liikkuva faasi - Valmista suodatettu ja kaasuttomaksi veden ja asetonitriilin seos (11:9).Tee säädöt tarvittaessa (katso Järjestelmän soveltuvuus kohdassa Kromatografia 621).
Standardivalmistus - Liuota tarkasti punnittu määrä USP Paclitaxel RS:ää laimentimeen ja laimenna kvantitatiivisesti ja tarvittaessa vaiheittain laimentimella, jotta saadaan liuos, jonka tunnettu konsentraatio on noin 1 mg/ml.
Määrityksen valmistelu - Siirrä noin 10 mg paklitakselia tarkasti punnittua 10 ml:n mittapulloon.Liuota Diluent-aineeseen käyttämällä tarvittaessa sonikointia, laimenna Diluentilla tilavuuteen ja sekoita.
Kromatografiajärjestelmä (katso Kromatografia <621>) - Nestekromatografi on varustettu 227 nm:n detektorilla ja 4,6 mm × 25 cm:n kolonnilla, joka sisältää 5 µm:n täytteen L43.Virtausnopeus on noin 1,5 ml minuutissa.Kromatografoi standardivalmiste ja tallenna huippuvasteet menettelyn ohjeiden mukaisesti: hännän kerroin on välillä 0,7 - 1,3;ja suhteellinen standardipoikkeama toistuville injektioille on enintään 1,5 %.
Toimenpide - Injektoi kromatografiin erikseen yhtä suuret tilavuudet (noin 10 µl) standardivalmistetta ja määritysvalmistetta, kirjaa kromatogrammit ja mittaa tärkeimpien piikkien alueet.Laske C47H51NO14:n määrä milligrammoina paklitakselin annoksessa kaavalla:
10C (rU / rS)
jossa C on USP Paclitaxel RS:n pitoisuus, mg/ml, standardivalmisteessa;ja rU ja rS ovat paklitakselin huippuvasteet, jotka on saatu määritysvalmisteesta ja standardivalmisteesta, vastaavasti.