L-4-Nitrofenylalanine Methyl Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Assay>98.5% (HPLC) Fabriek

Analyzemetoade fan L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Beskriuwing: Plak sawat 2 g fan monster yn in skjinne en droege petrishaal en observearje it uterlik fan monster.Rapportearje: Rapportearje de observaasje
Identifikaasje: Fergelykje de retinsjetiid fan 'e wichtichste pyk yn' e chromatogram fan 'e testpreparaasje mei de retensjetiid fan' e grutte pyk yn it chromatogram fan systeemgeskiktheid, lykas krigen yn chromatografyske suverens troch HPLC.
Ferlies by drogen: Droege in glêzen stoppe, ûndjippe weagflesse op 105 ± 2 ℃ foar 30 minuten.Lit it koelje nei keamertemperatuer yn in desciccator.Weagje sekuer de weachflesse mei stopper en notearje it gewicht (W1).Oerstapje sa'n 1 oant 2g sekuer weage kwantiteit teststof yn 'e weachflesse.Troch sêft, sydlings skodzjen, fersprieden it testeksimplaar sa lyklik mooglik oant in djipte fan sawat 5 mm.Weagje de laden weachflesse en notearje it gewicht (W2).Plak de laden flesse yn 'e droege oven, ferwiderje de stopper en lit it ek yn' e keamer litte.Dryje it testmonster op 105 ± 2 ℃ foar 3 oeren.By it iepenjen fan 'e keamer, slút de flesse fuortendaliks, en lit it ta keamertemperatuer komme yn in desiccator.Weagje sekuer de weach flesse mei stopper en recoed it gewicht (W3).Berekkenje it persintaazje ferlies by it droegjen fan it stekproef mei de folgjende formule:
Berekkening ferlies by drogen (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Enantiomere ynhâld troch HPLC:
Gemyske en reagenzjes:
n-hexane AR klasse
Methanol HPLC klasse
Isopropylalkohol HPLC-klasse
Diethylamine AR klasse
Noarmen: L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl standert;L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl enantiomer standert
Mobile Fase: Bereid in homogeen mingsel fan n-hexane, isopropylalkohol, methanol en diethylamine (65:20:15:0.1 v/v/v/v)
Lege tarieding: Oerstapje 2,5 ml methanol yn in 10-ml volumetryske kolf, ferwiderje nei folume mei mobile faze en mingje.
Systeem geskiktheid tarieding:
Weagje sekuer en oerdrage sawat 5 mg elk fan L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl standert en L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl enantiomer standert yn in 10-ml volumetryske kolf, oplosse yn sawat 2.5ml methanol, ferwiderje oant folume mei mobile faze en mix.
Test tarieding:
Weagje sekuer en oerdrage sawat 5 mg fan it monster yn in 10-mol volumetryske kolf, oplosse yn sawat 2,5 ml methanol, ferwiderje oant folume mei mobile faze en mingje.
Ynstrumintele parameters:
Ynstrumint: HPLC útrist mei injector, pomp, UV detector en Recorder
Kolom: ChiralPak-IC (4.6mm x 250mm) 5 μ of lykweardich
Flow rate: 1,0 ml / min
Golflingte: 260nm
Ynjeksje folume: 10 μL
Column coven temperatuer: 25 ℃
Run tiid: 20 minuten
Proseduere
Inject de oplossings lykas neamd yn de folgjende folchoarder.Opnimme de chromatogrammen en befêstigje de kritearia:
Beskriuwing fan ynjeksjes Oantal ynjeksjes Kritearia
Lege tarieding 1 Gjin interfering peak moat wurde waarnommen by de retinsje tiid fan L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl of enantiomer.
Systeem geskiktheid tarieding 1 Resolúsje tusken L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl en enantiomeer peak moat net minder wêze as 2.0
Test tarieding 1 Brûk test chromatogram te bepalen enantiomere ynhâld yn it stekproef.
Relative retinsjetiden:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0
Enantiomeer Oer 1.11
Behâldtiid fan L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl is sawat 9,8 minuten.
Berekkening: Yn de chromatogram krigen út test tarieding, negearje alle peaks ferwachtsje L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl en Enantiomer.Rapportearje de enantiomere ynhâld yn 'e stekproef troch gebiet normalization metoade.
Chromatografyske suverens en ûnreinheden troch HPLC:
Gemyske en reagenzjes:
Diammoniumfosfaat AR-klasse
Phosphoric acid AR klasse
Methanol HPLC klasse
Skjin wetter
Standerts
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl standert
4-Nitro-L-Phenylalanine monohydrate standert
Mobile Fase-A
6,6 g diammoniumfosfaat oplosse yn 1000 ml suvere wetter.Pas de pH fan dizze oplossing oan 6,0 mei Phosphoric acid.Filter en degas.Foardat jo de pH fan 'e oplossing mjitten, kalibrearje de pH-meter mei standert bufferoplossing pH 4.01 EN 7.00.
Mobile Fase-B
Methanol HPLC klasse
Systeem geskiktheid Tarieding
Weagje sekuer en oerdrage sawat 25 mg elk fan L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl standert en 4-Nitro-L-Phenylalanine monohydrate standert yn in 50-ml volumetryske kolf, oplosse yn en ferdylgje oant folume mei methanol en mingje.
Test tarieding:
Weagje sekuer en oerdrage sawat 25 mg monster yn in 50-ml volumetryske kolf, oplosse yn en verdunde oant folume mei methanol en mingje.
Ynstrumintele parameters:
Ynstrumint: HPLC útrist mei injector, pomp, UV detector en Recorder
Kolom: XTerra RP-18 (4.6mm x 150mm) 5 μ of lykweardich
Flow rate: 1,0 ml / min
Golflingte: 265 nm
Ynjeksje folume: 20 μL
Column coven temperatuer: 25 ℃
Run tiid: 45 minuten
Gradient Program
Tiid (min) Mobile Fase-A % Mobile Fase-B %
0.01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Proseduere:
Inject de oplossings lykas neamd yn de folgjende folchoarder.Opnimme de chromatogrammen en befêstigje de kritearia:
Lege tarieding 1 Gjin interfering peak moat wurde waarnommen by de retinsje tiid fan L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl.
Systeem geskiktheid tarieding 1 Tailing faktor foar L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl peak moat net minder dan 2,0
Testfoarming 1 Brûk testchromatogram om chromatografyske suverens en ûnreinheden te bepalen.
Relative retinsjetiden:
L-4-Nitrofenylalanine Methyl Ester HCl 1.0 (retensjetiid sawat 11,4 minuten)
4-Nitro-L-Phenylalanine Oer 0,4
Toluene Oer 2.3
Berekkeningen:
Yn it chromatogram krigen fan testfoarming, nei lege korreksje, negearje de pyk fanwege toluene.Rapportearje de chromatografyske suverens, 4-Nitro-L-Phenylalanine-ynhâld en totale ûnreinheden yn 'e stekproef troch gebietsnormalisaasjemetoade.