Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 Ensaio (HPLC) 97,0~102,0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
Ácido bencenopropanoico, -(benzoilamino)--hidroxi-, 6,12b-bis(acetiloxi)-12-(benzoiloxi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahidro-4,11-dihidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-5-oxo-7,11-metano-1H-ciclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-ilo éster, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahidro-4,6, 9,11,12,12b-hexahidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-ona 6, 12b-diacetato, 12-benzoato, 9-éster con (2R,3S)-N-benzoil-3-feniliserina [33069-62-4].
O paclitaxel contén non menos do 97,0 por cento nin máis do 102,0 por cento de C47H51NO14, calculado sobre a base anhidra e sen disolventes.
[Precaución: Paclitaxel é citotóxico.Débese ter moito coidado para evitar a inhalación de partículas de Paclitaxel e a exposición da pel a ela.]
Embalaxe e almacenamento: conservar en recipientes estancos e resistentes á luz e almacenar a temperatura ambiente controlada.
Etiquetado: a etiquetaxe indica o tipo de proceso utilizado para producir o material e a proba de compostos relacionados coa que cumpre o material.
Estándares de referencia USP <11>-
USP Endotoxina RS
USP Paclitaxel RS Fai clic para ver a estrutura
Composto A Relacionado con Paclitaxel USP
Cefalomanina.
Composto B Relacionado con Paclitaxel USP
10-Deacetil-7-Epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Mestura de impurezas RS
Mestura de paclitaxel e os seguintes compostos relacionados: análogo de propilo, cefalomanina, análogo de sec-butilo, análogo de n-butilo, análogo de bencilo, bacatina VI, análogo de pentilo e 7-epipaclitaxel.
identificación-
A: Absorción infravermella <197K>.
B: O tempo de retención do pico principal no cromatograma da preparación do Ensaio correspóndese co do cromatograma da preparación estándar, tal e como se obtén no Ensaio.
Rotación específica 781S: entre 49,0 e 55,0 en 20, calculado sobre a base anhidra, sen disolventes.
Solución de proba: 10 mg por ml, en metanol.
Probas de enumeración microbiana <61> e Probas para microorganismos especificados <62>-O reconto microbiano aeróbico total non supera os 100 ufc por g.Cumpre os requisitos das probas de ausencia de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, especies de Salmonella e Escherichia coli.
Endotoxinas bacterianas 85-Non contén máis de 0,4 unidades de endotoxinas USP por mg de paclitaxel.
Auga, método Ic <921>: non máis do 4,0 %.
Residuo ao ignición <281>: non máis do 0,2 %.
Metais pesados, Método II <231>: 0,002 %.
Compostos relacionados -
proba 1 (para material etiquetado como illado de fontes naturais): se o material cumpre con esta proba, a etiquetaxe indica que cumpre a proba 1 de compostos relacionados coa USP.
Diluyente: prepárase segundo se indica no Ensaio.
Solución A-Prepare acetonitrilo filtrado e desgasificado.
Solución B-Prepare auga filtrada e desgasificada.
Fase móbil: use mesturas variables de solución A e solución B segundo o indicado para o sistema cromatográfico.Fai axustes se é necesario (consulta Adecuación do sistema en Cromatografía 621).
Solución de adecuación do sistema: disolver cantidades pesadas con precisión de composto A RS relacionado con paclitaxel USP e composto B relacionado con paclitaxel USP RS en metanol para obter unha solución con concentracións coñecidas duns 10 µg de cada un por mL.Transfire 5,0 ml desta solución a un matraz aforado de 50 ml, dilúa con Diluyente ao volume e mestúrase.
Solución estándar: disolver, coa axuda de sonicación, unha cantidade pesada con precisión de USP Paclitaxel RS en diluyente, e diluír cuantitativamente, e gradualmente se é necesario, con diluyente para obter unha solución cunha concentración coñecida duns 5 µg por ml.
Solución de proba: use a preparación do ensaio.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía <621>): o cromatógrafo líquido está equipado cun detector de 227 nm e unha columna de 4,6 mm × 25 cm que contén un empaquetamento L43 de 5 µm.O caudal é duns 2,6 ml por minuto.A temperatura da columna mantense en 30. O cromatógrafo prográmase do seguinte xeito.
Tempo (minutos) Solución A (%) Solución B (%) Elución
0–35 35 65 isocrático
35–60 35®80 65®20 gradiente lineal
60–70 80®35 20®65 gradiente lineal
70–80 35 65 isocráticoCromatografía a solución de idoneidade do sistema e rexistra as respostas máximas segundo se indica no Procedemento: os tempos de retención relativos son de aproximadamente 0,78 para o composto A relacionado con paclitaxel e 0,86 para o composto B relacionado con paclitaxel (en relación ao tempo de retención para o paclitaxel obtido a partir de a solución de proba);e a resolución, R, entre o composto A relacionado con paclitaxel e o composto B relacionado con paclitaxel non é inferior a 1,0.Cromatografiar a solución estándar e rexistrar as respostas máximas segundo o indicado para o Procedemento: a desviación estándar relativa para as inxeccións repetidas non é superior ao 2,0 %.
Procedemento: inxecta un volume (uns 15 µl) da solución de proba no cromatógrafo, rexistra o cromatograma e mide as áreas dos picos principais.Calcule a porcentaxe de cada impureza na porción de paclitaxel tomada pola fórmula:
100 (ven / rU)
no que F é o factor de resposta relativo para cada pico de impurezas (ver Táboa 1 para os valores);ri é a área máxima de cada impureza individual;e rU é a área máxima para paclitaxel.
Táboa 1
Tempo de retención relativo Factor de resposta relativa (F) Límite de nome (%)
0,24 1,29 Baccatina III 0,2
0,53 1,00 10-desacetilpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-xilosilpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomanina (composto A relacionado con Paclitaxel) a11
0,78 1,26 2'',3''-Dihidrocefalomanina a21
0,86 1,00 10-Deacetil-7-epipaclitaxel (composto B relacionado con paclitaxel) 0,5
1,10 1,00 Análogo de bencilo3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehidropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicefalomanina 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 A resolución pode estar incompleta para estes picos, dependendo das cantidades relativas presentes;a suma de a1 e a2 non é superior ao 0,5%.
2 A resolución pode ser incompleta para estes picos, dependendo das cantidades relativas presentes;a suma de b1 e b2 non é superior ao 0,5%.
3 O seguinte nome químico asígnaselle ao composto relacionado, análogo de bencilo: 13-éster de bacatina III con ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(2-fenilacetilamino)propanoico.
Ademais de non superar os límites para as impurezas relacionadas con paclitaxel da Táboa 1, non se atopa máis do 0,1% de calquera outra impureza única;e non se atopa máis do 2,0% das impurezas totais.
proba 2 (para material etiquetado como producido por un proceso semisintético): se o material cumpre con esta proba, a etiquetaxe indica que cumpre a proba 2 de compostos relacionados coa USP.
Diluyente: use acetonitrilo.
Solución A: use unha mestura filtrada e desgasificada de auga e acetonitrilo (3:2).
Solución B-Utilizar acetonitrilo filtrado e desgasificado.
Fase móbil: use mesturas variables de solución A e solución B segundo o indicado para o sistema cromatográfico.Fai axustes se é necesario (consulta Adecuación do sistema en Cromatografía 621).
Solución de idoneidade do sistema: disolver cantidades pesadas con precisión de USP Paclitaxel RS e USP Paclitaxel Related Compound B RS en diluente, axitando e sonicándoas se é necesario, para obter unha solución con concentracións coñecidas de aproximadamente 0,96 mg e 0,008 mg por ml, respectivamente.
Solución de proba: transfira uns 10 mg de Paclitaxel, pesados ​​con precisión, a un matraz aforado de 10 ml, disolva e dilúese co Diluyente ata o volume, axitando e sonicando se é necesario, e mesturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía 621): o cromatógrafo líquido está equipado cun detector de 227 nm e unha columna de 4,6 mm × 15 cm que contén un empaquetamento L1 de 3 µm.O caudal é de aproximadamente 1,2 ml por minuto.A temperatura da columna mantense en 35. O cromatógrafo prográmase do seguinte xeito.
Tempo (minutos) Solución A (%) Solución B (%) Elución
0-20 100 0 isocrático
20-60 100®10 0®90 gradiente lineal
60-62 10®100 90®0 gradiente lineal
62-70 100 0 isocráticoCromatografía a solución de idoneidade do sistema e rexistra as respostas máximas segundo o indicado para o Procedemento: os tempos de retención relativos son de aproximadamente 0,94 para o composto B relacionado co paclitaxel e 1,0 para o paclitaxel;a resolución, R, entre o composto B relacionado co paclitaxel e o paclitaxel non é inferior a 1,2;e a desviación estándar relativa para as inxeccións repetidas non é superior ao 2,0%.
Procedemento: inxectar por separado volumes iguais (uns 15 µl) do diluyente e da solución de proba no cromatógrafo, rexistrar os cromatogramas e medir as áreas de todos os picos.Ignore calquera pico debido ao diluyente.Calcule a porcentaxe de cada impureza na porción de paclitaxel tomada pola fórmula:
100 (ven/rs)
no que F é o factor de resposta relativo para cada impureza (ver a táboa 2 para os valores);ri é a área de pico para cada impureza obtida da solución de proba;e rs é a suma das áreas de todos os picos obtidos da solución de Ensaio.
Táboa 2
Tempo de retención relativo Factor de resposta relativa (F) Límite de nome (%)
0,11 1,24 10-desacetilbacatina III 0,1
0,20 1,29 Baccatina III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradante2 0,1
0,47 1,00 10-desacetilpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoilpaclitaxel-2-pentenoato 0,7
0,921 1,00 Anel de oxetano aberto, migración de acetilo e benzoílo2 x1
0,921 1,00 10-Acetoacetilpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-desacetil-7-epipaclitaxel (composto B relacionado con paclitaxel) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetilpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-bacatina III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 A resolución pode estar incompleta para estes picos, dependendo das cantidades relativas presentes;a suma de x1, x2 e x3 non é superior ao 0,4%.
2 Os seguintes nomes químicos asígnanse aos compostos relacionados Fotodegradante;O anel de oxetano abriuse, o acetilo e o benzoílo migraron;e 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradante
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetiloxi-5,13-dihidroxi-4,16,17,17-tetrametil-8-oxa- 3-oxo-12-fenilcarboniloxipentaciclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-ilo
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoato
O anel de oxetano abriuse, o acetilo e o benzoílo migraron
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetiloxi-1,2,4,7-tetrahidroxi-8,12,15,15-tetrametil-9-oxo- 4-(fenilcarboniloximetil)triciclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-ilo
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoato
10,13-Bissidechainpaclitaxel
13-éster de bacatina III con ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino)propanoico, 10-éster con (2S,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenilcarbonilamino) ) ácido propanoico
Ademais de non superar os límites para as impurezas relacionadas con paclitaxel da Táboa 2, non se atopa máis do 0,1% de calquera outra impureza única;e non se atopa máis do 2,0% das impurezas totais.
proba 3 (para o material etiquetado como producido por un proceso de fermentación de células vexetais): se o material cumpre con esta proba, a etiquetaxe indica que cumpre a proba 3 de compostos relacionados coa USP.
Solución A-Prepare unha mestura filtrada e desgasificada de auga e acetonitrilo (3:2).
Solución B-Prepare acetonitrilo filtrado e desgasificado.
Fase móbil: use mesturas variables de solución A e solución B segundo o indicado para o sistema cromatográfico.Fai axustes se é necesario (consulta Adecuación do sistema en Cromatografía 621).
Solución de idoneidade do sistema: disolver a mestura de impurezas USP Paclitaxel RS en acetonitrilo, sonicando se é necesario, para obter unha solución cunha concentración coñecida de aproximadamente 1 mg por ml.
Solución estándar: disolver unha cantidade pesada con precisión de USP Paclitaxel RS en acetonitrilo, sonicando se é necesario, para obter unha solución cunha concentración coñecida de aproximadamente 1 mg por ml.
Solución de proba: transferir uns 10 mg de Paclitaxel, pesados ​​con precisión, a un matraz aforado de 10 ml.Disolver e diluír con acetonitrilo a volume, sonicando se é necesario, e mesturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía 621): o cromatógrafo líquido está equipado cun detector de 227 nm e unha columna de 4,6 mm × 15 cm que contén un empaquetamento L1 de 3 µm.O caudal é de aproximadamente 1,2 ml por minuto.O cromatógrafo está programado do seguinte xeito.
Tempo (minutos) Solución A (%) Solución B (%) Elución
0-28 100 0 isocrático
28-33 100®98 0®2 gradiente lineal
33–58 98®10 2®90 gradiente lineal
58-60 10 90 isocrático
60-63 10®100 90®0 gradiente lineal
63-70 100 0 isocráticoCromatografía a solución de idoneidade do sistema e rexistra as respostas máximas segundo o indicado para o Procedemento: a resolución, R, entre paclitaxel e análogo de bencilo non é inferior a 1,8.Cromatografiar a solución estándar e rexistrar as respostas máximas segundo o indicado para o Procedemento: a desviación estándar relativa para as inxeccións repetidas non é superior ao 2,0 %.[nota: para identificar os picos, os tempos de retención relativos aproximados aparecen na Táboa 3. Os tempos de retención relativos mídense fronte ao paclitaxel.]
Táboa 3
Nome límite de tempo relativo de retención (%)
Análogo de propilo1 0,54 0,2
Cefalomanina (composto A relacionado con Paclitaxel) 0,76 0,5
análogo de sec-butilo2 0,81 0,2
Análogo de n-butilo3 0,89 0,1
Análogo de bencilo 1,10 0,4
Baccatina VI 1,23 0,2
Pentilo análogo4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 O seguinte nome químico asígnase ao composto relacionado Análogo de propilo: 13-éster de bacatina III con ácido (2R,3S)-3-butanoilamino-2-hidroxi-3-fenilpropanoico.
2 O seguinte nome químico asígnase ao composto relacionado análogo sec-butilo: 13-éster de bacatina III con ácido (2R,3S)-2-hidroxi-3-(2-metilbutanoilamino)-3-fenilpropanoico.
3 O seguinte nome químico asígnaselle ao composto relacionado análogo n-butilo: 13-éster de bacatina III con ácido (2S,3S)-2-hidroxi-3-(pentanoilamino)-3-fenilpropanoico.
4 O seguinte nome químico asígnase ao composto relacionado análogo de pentilo: 13-éster de bacatina III con ácido (2R,3S)-3-(hexanoilamino)-2-hidroxi-3-fenilpropanoico.
Procedemento: inxectar un volume (uns 12 µl) da solución de proba no cromatógrafo, rexistrar o cromatograma e medir as áreas de todos os picos.Calcule a porcentaxe de cada impureza na porción de paclitaxel tomada pola fórmula:
100 (ri/rU)
no que ri é a resposta de cada impureza individual;e rU é a suma das áreas de todos os picos obtidos da solución de Ensaio.Ademais de non superar os límites para as impurezas relacionadas con paclitaxel da Táboa 3, non se atopa máis do 0,1 % de calquera outra impureza única;e non se atopa máis do 2,0% das impurezas totais.
Ensaio-
Diluyente-Prepare unha mestura de metanol e ácido acético (200:1).
Fase móbil-Prepare unha mestura filtrada e desgasificada de auga e acetonitrilo (11:9).Fai axustes se é necesario (consulta Adecuación do sistema en Cromatografía 621).
Preparación estándar: disolver, usando sonicación se é necesario, unha cantidade pesada con precisión de USP Paclitaxel RS en diluente, e diluír cuantitativamente, e gradualmente se é necesario, con diluyente para obter unha solución cunha concentración coñecida de aproximadamente 1 mg por ml.
Preparación do ensaio: transferir uns 10 mg de Paclitaxel, pesados ​​con precisión, a un matraz aforado de 10 ml.Disolver en diluente, usando sonicación se é necesario, diluír con diluyente a volume e mesturar.
Sistema cromatográfico (ver Cromatografía <621>): o cromatógrafo líquido está equipado cun detector de 227 nm e unha columna de 4,6 mm × 25 cm que contén un empaquetamento L43 de 5 µm.O caudal é de aproximadamente 1,5 ml por minuto.Cromatografiar a preparación estándar e rexistrar as respostas máximas segundo o indicado para o Procedemento: o factor de colas está entre 0,7 e 1,3;e a desviación estándar relativa para as inxeccións repetidas non é superior ao 1,5%.
Procedemento: inxectar por separado volumes iguais (uns 10 µl) da preparación estándar e da preparación do ensaio no cromatógrafo, rexistrar os cromatogramas e medir as áreas dos picos principais.Calcule a cantidade, en mg, de C47H51NO14 na porción de paclitaxel tomada pola fórmula:
10C (rU / rS)
no que C é a concentración, en mg por ml, de USP Paclitaxel RS na preparación estándar;e rU e rS son as respostas máximas para o paclitaxel obtidos da preparación de ensaio e da preparación estándar, respectivamente.