Paklitaksel (Taxol) CAS 33069-62-4 Analiza (HPLC) 97,0~102,0%

paklitaksel
C47H51NO14 853,91
Benzenpropanska kiselina, -(benzoilamino)-hidroksi-, 6,12b-bis(acetiloksi)-12-(benzoiloksi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahidro-4,11-dihidroksi-4a,8,13,13-tetrametil-5-okso-7,11-metano-1H-ciklodeka[3,4]benz[1,2-b]okset-9-il ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-dodekahidro-4,6, 9,11,12,12b-heksahidroksi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciklodeka[3,4]-benz[1,2-b]okset-5-on 6, 12b-diacetat, 12-benzoat, 9-ester s (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilizoserinom [33069-62-4].
Paklitaksel ne sadrži manje od 97,0 posto i ne više od 102,0 posto C47H51NO14, računato na bezvodnu osnovu bez otapala.
[Oprez - paklitaksel je citotoksičan.Treba obratiti veliku pozornost na sprječavanje udisanja čestica paklitaksela i izlaganja kože njima.]
Pakiranje i skladištenje - Čuvati u zatvorenim posudama otpornim na svjetlost i čuvati na kontroliranoj sobnoj temperaturi.
Označavanje - Označavanje označava vrstu procesa korištenog za proizvodnju materijala i test povezanih spojeva s kojim je materijal u skladu.
USP referentni standardi <11>-
USP Endotoksin RS
USP Paclitaxel RS Kliknite za prikaz strukture
USP Srodni spoj paklitakselu A RS
cefalomanin.
USP Srodni spoj paklitakselu B RS
10-deacetil-7-epipaklitaksel.
USP paklitaksel mješavina nečistoća RS
Mješavina paklitaksela i sljedećih srodnih spojeva: propilni analog, cefalomanin, sek-butilni analog, n-butilni analog, benzilni analog, bakatin VI, pentilni analog i 7-epipaklitaksel.
Identifikacija-
O: Infracrvena apsorpcija <197K>.
B: Vrijeme zadržavanja glavnog pika u kromatogramu pripravka za ispitivanje odgovara onom u kromatogramu pripravka za standard, kako je dobiveno u testu.
Specifična rotacija 781S: između 49,0 i 55,0 na 20, izračunato na bezvodnoj osnovi bez otapala.
Ispitna otopina: 10 mg po mL, u metanolu.
Testovi brojanja mikroorganizama <61> i testovi za određene mikroorganizme <62> - Ukupni broj aerobnih mikroba ne prelazi 100 cfu po g.Zadovoljava zahtjeve testova na odsustvo Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella vrste i Escherichia coli.
Bakterijski endotoksini 85 - Ne sadrži više od 0,4 USP jedinice endotoksina po mg paklitaksela.
Voda, Metoda Ic <921>: ne više od 4,0%.
Ostatak nakon žarenja <281>: ne više od 0,2%.
Teški metali, Metoda II <231>: 0,002%.
Srodni spojevi-
test 1 (za materijal označen kao izoliran iz prirodnih izvora) - Ako je materijal u skladu s ovim testom, označavanje pokazuje da zadovoljava USP srodne spojeve, test 1.
Razrjeđivač - Pripremite prema uputama u testu.
Otopina A-Pripremite filtrirani i degazirani acetonitril.
Otopina B-Pripremite filtriranu i otplinjenu vodu.
Mobilna faza - Koristite varijabilne smjese otopine A i otopine B prema uputama za kromatografski sustav.Napravite prilagodbe ako je potrebno (pogledajte Prikladnost sustava pod Kromatografija 621).
Otopina za prikladnost sustava - Otopite točno izvagane količine USP paklitaksela srodnog spoja A RS i USP paklitaksela srodnog spoja B RS u metanolu kako biste dobili otopinu poznate koncentracije od oko 10 µg svakog po mL.Prenesite 5,0 mL ove otopine u odmjernu tikvicu od 50 mL, razrijedite razrjeđivačem do volumena i promiješajte.
Standardna otopina - Otopite, uz pomoć sonikacije, točno izvaganu količinu USP paklitaksela RS u razrjeđivaču i kvantitativno razrijedite, i postupno ako je potrebno, s razrjeđivačem kako biste dobili otopinu poznate koncentracije od oko 5 µg po mL.
Ispitna otopina - upotrijebite pripremu za ispitivanje.
Kromatografski sustav (vidi Kromatografija <621>) - Tekućinski kromatograf opremljen je detektorom od 227 nm i kolonom od 4,6 mm × 25 cm koja sadrži pakiranje L43 od 5 µm.Brzina protoka je oko 2,6 mL u minuti.Temperatura stupca se održava na 30°C. Kromatograf se programira kako slijedi.
Vrijeme (minute) Otopina A (%) Otopina B (%) Eluacija
0–35 35 65 istokratski
35–60 35®80 65®20 linearni gradijent
60–70 80®35 20®65 linearni gradijent
70–80 35 65 isocraticChromatograph rješenje prikladnosti sustava i zabilježite vršne odgovore prema uputama za postupak: relativna vremena zadržavanja su oko 0,78 za spoj A koji je povezan s paklitakselom i 0,86 za spoj B koji je povezan s paklitakselom (u odnosu na vrijeme zadržavanja za paklitaksel dobiven iz test rješenje);i rezolucija, R, između spoja A srodnog paklitakselu i spoja B srodnog paklitakselu nije manja od 1,0.Kromatografirajte standardnu ​​otopinu i zabilježite vršne odgovore prema uputama za postupak: relativna standardna devijacija za ponavljanje injekcija nije veća od 2,0%.
Postupak - Ubrizgajte volumen (oko 15 µL) ispitne otopine u kromatograf, snimite kromatogram i izmjerite površine za glavne vrhove.Izračunajte postotak svake nečistoće u udjelu paklitaksela prema formuli:
100 (pet / rU)
u kojoj je F relativni faktor odziva za svaki vrh nečistoće (vidi tablicu 1 za vrijednosti);ri je površina vrha za svaku pojedinačnu nečistoću;a rU je područje pika za paklitaksel.
stol 1
Relativno vrijeme zadržavanja Faktor relativnog odgovora (F) Naziv Granica (%)
0,24 1,29 bakatin III 0,2
0,53 1,00 10-deacetilpaklitaksel 0,5
0,57 1,00 7-ksilozilpaklitaksel 0,2
0,78 1,26 Cefalomanin (spoj A srodan paklitakselu) a11
0,78 1,26 2'',3''-dihidrocefalomanin a21
0,86 1,00 10-deacetil-7-epipaklitaksel (spoj B povezan s paklitakselom) 0,5
1,10 1,00 Analog benzila3 b12
1,10 1,00 3'',4''-dehidropaklitaksel C b22
1,40 1,00 7-epicefalomanin 0,3
1,85 1,00 7-epipaklitaksel 0,5
1 Rezolucija može biti nepotpuna za ove vrhove, ovisno o prisutnim relativnim količinama;zbroj a1 i a2 nije veći od 0,5%.
2 Rezolucija može biti nepotpuna za ove vrhove, ovisno o prisutnim relativnim količinama;zbroj b1 i b2 nije veći od 0,5%.
3 Sljedeći kemijski naziv dodijeljen je srodnom spoju, analogu benzila: 13-ester bakatina III s (2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(2-fenilacetilamino)propanskom kiselinom.
Osim što ne prelazi granice za nečistoće povezane s paklitakselom u Tablici 1, nije pronađeno više od 0,1% bilo koje druge pojedinačne nečistoće;a ne nalazi se više od 2,0% ukupnih nečistoća.
test 2 (za materijal koji je označen kao proizveden polusintetskim postupkom)— Ako je materijal u skladu s ovim testom, označavanje pokazuje da ispunjava test 2 povezanih spojeva prema USP-u.
Razrjeđivač - Koristite acetonitril.
Otopina A-Upotrijebite filtriranu i otplinjenu smjesu vode i acetonitrila (3:2).
Otopina B-Upotrijebite filtrirani i degazirani acetonitril.
Mobilna faza - Koristite varijabilne smjese otopine A i otopine B prema uputama za kromatografski sustav.Napravite prilagodbe ako je potrebno (pogledajte Prikladnost sustava pod Kromatografija 621).
Otopina za prikladnost sustava - Otopite točno izvagane količine USP paklitaksela RS i USP paklitakselu srodnog spoja B RS u razrjeđivaču, protresajući i sonicirajući ako je potrebno, kako biste dobili otopinu poznate koncentracije od oko 0,96 mg odnosno 0,008 mg po ml.
Ispitna otopina - Prenesite oko 10 mg paklitaksela, točno izvaganog, u odmjernu tikvicu od 10 mL, otopite i razrijedite razrjeđivačem do volumena, protresite i sonicirajte ako je potrebno, te promiješajte.
Kromatografski sustav (vidi Kromatografija 621)— Tekućinski kromatograf opremljen je detektorom od 227 nm i kolonom od 4,6 mm × 15 cm koja sadrži pakiranje L1 od 3 µm.Brzina protoka je oko 1,2 ml u minuti.Temperatura stupca se održava na 35°C. Kromatograf se programira kako slijedi.
Vrijeme (minute) Otopina A (%) Otopina B (%) Eluacija
0-20 100 0 izokratski
20-60 100®10 0®90 linearni gradijent
60-62 10®100 90®0 linearni gradijent
62-70 100 0 isocraticChromatograph otopine za prikladnost sustava i zabilježite vršne odgovore prema uputama za postupak: relativna vremena zadržavanja su oko 0,94 za spoj B povezan s paklitakselom i 1,0 za paklitaksel;rezolucija, R, između paklitakselu srodnog spoja B i paklitaksela nije manja od 1,2;a relativna standardna devijacija za ponovljene injekcije nije veća od 2,0%.
Postupak-Odvojeno ubrizgajte jednake volumene (oko 15 µL) razrjeđivača i testne otopine u kromatograf, zabilježite kromatograme i izmjerite površine za sve vrhove.Zanemarite sve vršne vrijednosti uzrokovane razrjeđivačem.Izračunajte postotak svake nečistoće u udjelu paklitaksela prema formuli:
100 (pet / rs)
u kojoj je F relativni faktor odziva za svaku nečistoću (vidi tablicu 2 za vrijednosti);ri je područje vrha za svaku nečistoću dobivenu iz ispitne otopine;a rs je zbroj površina svih vrhova dobivenih iz ispitne otopine.
Tablica 2
Relativno vrijeme zadržavanja Faktor relativnog odgovora (F) Naziv Granica (%)
0,11 1,24 10-deacetilbakatin III 0,1
0,20 1,29 bakatin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradant2 0,1
0,47 1,00 10-deacetilpaklitaksel 0,5
0,80 1,00 2-debenzoilpaklitaksel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Oksetanski prsten otvoren, acetil i benzoil su migrirali 2 x1
0,921 1,00 10-acetoacetilpaklitaksel x2
0,941 1,00 10-deacetil-7-epipaklitaksel (spoj B povezan s paklitakselom) x3
1,37 1,00 7-epipaklitaksel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-acetilpaklitaksel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-bakatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paklitaksel 0,3
1 Rezolucija može biti nepotpuna za ove vrhove, ovisno o prisutnim relativnim količinama;zbroj x1, x2 i x3 nije veći od 0,4%.
2 Sljedeći kemijski nazivi dodijeljeni su srodnim spojevima Fotodegradant;Oksetanski prsten otvoren, acetil i benzoil su migrirali;i 10,13-bisidelančani paklitaksel:
Fotodegradant
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetiloksi-5,13-dihidroksi-4,16,17,17-tetrametil-8-oksa- 3-okso-12-fenilkarboniloksipentaciklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-il
(2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoat
Oksetanski prsten je otvoren, acetil i benzoil su migrirali
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetiloksi-1,2,4,7-tetrahidroksi-8,12,15,15-tetrametil-9-okso- 4-(fenilkarboniloksimetil)triciklo[9.3.1.03,8]pentadek-11-en-13-il
(2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoat
10,13-bisporedni lanac paklitaksela
Baccatin III 13-ester s (2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanskom kiselinom, 10-ester s (2S,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino) )propanska kiselina
Osim što ne prelazi granice za nečistoće povezane s paklitakselom u tablici 2, nije pronađeno više od 0,1% bilo koje druge pojedinačne nečistoće;a ne nalazi se više od 2,0% ukupnih nečistoća.
test 3 (za materijal koji je označen kao proizveden postupkom fermentacije biljnih stanica)— Ako je materijal u skladu s ovim testom, označavanje pokazuje da ispunjava USP test 3 povezanih spojeva.
Otopina A-Pripremite filtriranu i otplinjenu smjesu vode i acetonitrila (3:2).
Otopina B-Pripremite filtrirani i degazirani acetonitril.
Mobilna faza - Koristite varijabilne smjese otopine A i otopine B prema uputama za kromatografski sustav.Napravite prilagodbe ako je potrebno (pogledajte Prikladnost sustava pod Kromatografija 621).
Otopina za prikladnost sustava - Otopite USP mješavinu nečistoća paklitaksela RS u acetonitrilu, sonikirajući ako je potrebno, kako biste dobili otopinu poznate koncentracije od oko 1 mg po ml.
Standardna otopina - Otopite točno izvaganu količinu USP paklitaksela RS u acetonitrilu, sonikirajući ako je potrebno, kako biste dobili otopinu poznate koncentracije od oko 1 mg po ml.
Ispitna otopina - Prenesite oko 10 mg paklitaksela, točno izvaganih, u odmjernu tikvicu od 10 ml.Otopiti i razrijediti acetonitrilom do volumena, sonikirajući ako je potrebno, i promiješati.
Kromatografski sustav (vidi Kromatografija 621)— Tekućinski kromatograf opremljen je detektorom od 227 nm i kolonom od 4,6 mm × 15 cm koja sadrži pakiranje L1 od 3 µm.Brzina protoka je oko 1,2 ml u minuti.Kromatograf je programiran na sljedeći način.
Vrijeme (minute) Otopina A (%) Otopina B (%) Eluacija
0-28 100 0 izokratski
28-33 100®98 0®2 linearni gradijent
33–58 98®10 2®90 linearni gradijent
58-60 10 90 istokratski
60-63 10®100 90®0 linearni gradijent
63-70 100 0 isocraticChromatograph otopina za prikladnost sustava i zabilježite vršne odgovore prema uputama za postupak: rezolucija, R, između paklitaksela i analoga benzila nije manja od 1,8.Kromatografirajte standardnu ​​otopinu i zabilježite vršne odgovore prema uputama za postupak: relativna standardna devijacija za ponavljanje injekcija nije veća od 2,0%.[napomena—U svrhu identifikacije vrha, približna relativna vremena zadržavanja dana su u Tablici 3. Relativna vremena zadržavanja mjerena su u odnosu na Paclitaxel.]
Tablica 3
Ime Relativno vremensko ograničenje zadržavanja (%)
Propilni analog1 0,54 0,2
Cefalomanin (spoj A srodan paklitakselu) 0,76 0,5
sek-Butil analog2 0,81 0,2
n-Butil analog3 0,89 0,1
Benzil analog 1,10 0,4
Bakatin VI 1,23 0,2
Pentil analogni4 1,31 0,2
7-epipaklitaksel 1,51 0,4
1 Sljedeći kemijski naziv dodijeljen je srodnom spoju propilnog analoga: 13-ester bakatina III s (2R,3S)-3-butanoilamino-2-hidroksi-3-fenilpropanskom kiselinom.
2 Sljedeći kemijski naziv dodijeljen je srodnom analogu sek-butila: bakatin III 13-ester s (2R,3S)-2-hidroksi-3-(2-metilbutanoilamino)-3-fenilpropanskom kiselinom.
3 Sljedeći kemijski naziv dodijeljen je srodnom analogu n-butilnog spoja: 13-ester bakatina III s (2S,3S)-2-hidroksi-3-(pentanoilamino)-3-fenilpropanskom kiselinom.
4 Sljedeći kemijski naziv dodijeljen je srodnom spoju pentil analogu: bakatin III 13-ester s (2R,3S)-3-(heksanoilamino)-2-hidroksi-3-fenilpropanskom kiselinom.
Postupak - Ubrizgajte volumen (oko 12 µL) ispitne otopine u kromatograf, snimite kromatogram i izmjerite površine za sve vrhove.Izračunajte postotak svake nečistoće u udjelu paklitaksela prema formuli:
100(ri / rU)
u kojem je ri odziv svake pojedine nečistoće;a rU je zbroj površina svih vrhova dobivenih iz ispitne otopine.Osim što ne prelazi granice za nečistoće povezane s paklitakselom u tablici 3, nije pronađeno više od 0,1% bilo koje druge pojedinačne nečistoće;a ne nalazi se više od 2,0% ukupnih nečistoća.
Test-
Razrjeđivač - Pripremite smjesu metanola i octene kiseline (200:1).
Mobilna faza - Pripremite filtriranu i otplinjenu smjesu vode i acetonitrila (11:9).Napravite prilagodbe ako je potrebno (pogledajte Prikladnost sustava pod Kromatografija 621).
Standardna priprema - Otopite, koristeći sonikaciju ako je potrebno, točno izvaganu količinu USP paklitaksela RS u razrjeđivaču i razrijedite kvantitativno i postupno ako je potrebno s razrjeđivačem kako biste dobili otopinu poznate koncentracije od oko 1 mg po ml.
Priprema testa - Prenesite oko 10 mg paklitaksela, točno izvaganog, u odmjernu tikvicu od 10 ml.Otopite u razrjeđivaču, koristeći sonikaciju ako je potrebno, razrijedite razrjeđivačem do volumena i promiješajte.
Kromatografski sustav (vidi Kromatografija <621>) - Tekućinski kromatograf opremljen je detektorom od 227 nm i kolonom od 4,6 mm × 25 cm koja sadrži pakiranje L43 od 5 µm.Brzina protoka je oko 1,5 ml u minuti.Kromatografirajte standardni pripravak i zabilježite vršne odgovore prema uputama za postupak: faktor zaostatka je između 0,7 i 1,3;a relativna standardna devijacija za ponovljene injekcije nije veća od 1,5%.
Postupak - Odvojeno ubrizgajte jednake volumene (oko 10 µL) standardnog pripravka i pripravka za analizu u kromatograf, zabilježite kromatograme i izmjerite površine za glavne vrhove.Izračunajte količinu, u mg, C47H51NO14 u udjelu paklitaksela uzetu formulom:
10C(rU / rS)
gdje je C koncentracija, u mg po mL, USP paklitaksela RS u standardnom pripravku;a rU i rS su vršni odgovori za paklitaksel dobiveni iz pripravka za ispitivanje i standardnog pripravka, redom.