Ursodeoksikolna kiselina (UDCA) CAS 128-13-2 Analiza 99,0~101,0%

URSODEOKSIKOLNA KISELINA
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
DEFINICIJA
3α,7β-dihidroksi-5β-kolan-24-oična kiselina.
Sadržaj: 99,0 posto do 101,0 posto (osušena tvar).
LIKOVI
Izgled: bijeli ili gotovo bijeli prah.
Topivost: praktički netopljiv u vodi, lako topiv u etanolu (96 posto), slabo topljiv u acetonu, praktički netopljiv u metilen kloridu.
mp: oko 202 ℃.
IDENTIFIKACIJA
Prva identifikacija: A.
Druga identifikacija: B, C.
A. Infracrvena apsorpcijska spektrofotometrija (2.2.24).
Usporedba: Ursodeoxycholic Acid CRS.
B. Pregledajte kromatograme dobivene u ispitivanju nečistoće C.
Rezultati: glavna mrlja u kromatogramu dobivenom s ispitnom otopinom (b) slična je po položaju, boji i veličini glavnoj mrlji u kromatogramu dobivenoj s referentnom otopinom (a).
C. Otopiti oko 10 mg u 1 mL sumporne kiseline R. Dodati 0,1 mL otopine formaldehida R i ostaviti stajati 5 min.Dodati 5 mL vode R. Dobivena je suspenzija zelenkastoplave boje.
TESTOVI
Specifična optička rotacija (2.2.7): + 58,0 do + 62,0 (osušena tvar).
Otopiti 0,500 g u bezvodnom etanolu R i razrijediti do 25,0 mL istim otapalom.
Nečistoća C. Tankoslojna kromatografija (2.2.27).
Smjesa otapala: voda R, aceton R (10:90 V/V).
Ispitna otopina (a).Otopiti 0,40 g tvari koju treba ispitati u smjesi otapala i razrijediti do 10 mL sa smjesom otapala.
Otopina ispitivanja (b).Razrijedite 1 mL ispitne otopine (a) do 10 mL smjesom otapala.
Poredbena otopina (a).Otopiti 40 mg ursodeoksikolne kiseline CRS u smjesi otapala i razrijediti do 10 mL sa smjesom otapala.
Poredbena otopina (b).Otopite 20 mg litokolne kiseline CRS (nečistoća C) u smjesi otapala i razrijedite do 10,0 mL sa smjesom otapala (otopina A).Razrijedite 2,0 mL ove otopine do 100,0 mL sa smjesom otapala.
Poredbena otopina (c).U 5 mL otopine A dodajte 10 mg kenodeoksikolne kiseline CRS (nečistoća A) i razrijedite do 50 mL sa smjesom otapala.
Ploča: TLC silika gel ploča R.
Mobilna faza: ledena octena kiselina R, aceton R, metilenklorid R (1:30:60 V/V/V).
Primjena: 5μL.
Razvijenost: preko 2/3 ploče.
Sušenje: na 120℃ 10 min.
Detekcija: odmah poprskati otopinom fosfomolibdinske kiseline R od 47,6 g/L u mješavini 1 volumena sumporne kiseline R i 20 volumena ledene octene kiseline R i zagrijati na 120 ℃ dok se na svjetlijoj pozadini ne pojave plave mrlje.
Prikladnost sustava: referentna otopina (c):
- kromatogram pokazuje 2 jasno odvojene glavne mrlje.
Ograničenje: ispitna otopina (a):
-nečistoća C: nijedna točka zbog nečistoće C nije intenzivnija od glavne točke u kromatogramu dobivenom s referentnom otopinom (b) (0,1 posto).
Srodne tvari.Tekućinska kromatografija (2.2.29).
Smjesa otapala: metanol R, mobilna faza (10:90 V/V).
Test rješenje.Otopiti 60 mg tvari koju treba ispitati u smjesi otapala i razrijediti do 20,0 mL sa smjesom otapala.
Poredbena otopina (a).Otopite sadržaj bočice ursodeoksikolne kiseline za prikladnost sustava CRS (koja sadrži nečistoće A i H) u 1,0 mL smjese otapala.
Poredbena otopina (b).Razrijedite 1,0 mL ispitivane otopine do 100,0 mL sa smjesom otapala.Razrijedite 1,0 mL ove otopine do 10,0 mL sa smjesom otapala.
Stupac:
-dimenzija: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stacionarna faza: end-capped oktadecilsilil silika gel zakromatografija R (5 μm);
- temperatura: 40℃ ± 1℃.
Mobilna faza: pomiješati 30 volumena acetonitrila R, 37 volumena 0,78 g/L otopine natrijevog dihidrogenfosfata R podešenog na pH 3 s fosfornom kiselinom R i 40 volumena metanola R.
Brzina protoka: 0,8 mL/min.
Detekcija: refraktometar na 35 ± 1 ℃.
Injekcija: 150 μL.
Vrijeme rada: 4 puta duže od vremena zadržavanja ursodeoksikolne kiseline.
Identifikacija nečistoća: upotrijebite kromatogram isporučen s ursodeoksikolnom kiselinom za prikladnost sustava CRS i kromatogram dobiven s referentnom otopinom (a) za identifikaciju vršnih vrijednosti zbog nečistoća A i H.
Relativno zadržavanje u odnosu na ursodeoksikolnu kiselinu (vrijeme zadržavanja = oko 14 min): nečistoća H = oko 0,9;nečistoća A = oko 2,8.
Prikladnost sustava: referentna otopina (a):
-rezolucija: minimalno 1,5 između vrhova zbog nečistoće H i ursodeoksikolne kiseline.
Ograničenja:
- nečistoća A: ne više od 10 puta veće od površine glavnog vrha u kromatogramu dobivenom s referentnom otopinom (b) (1,0 posto);
– nespecificirane nečistoće: za svaku nečistoću ne više od površine glavnog vrha u kromatogramu dobivenom s referentnom otopinom (b) (0,10 posto);
- ukupno: ne više od 15 puta površine glavnog vrha u kromatogramu dobivenom s referentnom otopinom (b) (1,5 posto);
- granica zanemarivanja: 0,5 puta površina glavnog vrha u kromatogramu dobivena s referentnom otopinom (b) (0,05 posto).
Teški metali (2.4.8): maksimalno 20 ppm.
1,0 g odgovara ispitivanju C. Pripremite referentnu otopinu koristeći 2 mL standardne otopine olova (10 ppm Pb) R.
Gubitak sušenjem (2.2.32): najviše 1,0 posto, određeno na 1.000 g sušenjem u pećnici na 105 ℃.
Sulfatni pepeo (2.4.14): najviše 0,1 posto, određeno na 1,0 g.
ISPITIVANJE
Otopiti 0,350 g u 50 mL etanola (96 postotnog) R, prethodno neutraliziranog na 0,2 mL otopine fenolftaleina R. Dodati 50 mL vode R i titrirati s 0,1 M natrijevim hidroksidom do ružičaste boje.
1 mL 0,1 M natrijevog hidroksida je ekvivalentan 39,26 mg C24H40O4.
NEČISTOĆE
Specificirane nečistoće: A, C.
Druge nečistoće koje se mogu detektirati (sljedeće tvari bi se, ako su prisutne na dovoljnoj razini, otkrile jednim ili drugim testom u monografiji. Ograničene su općim kriterijem prihvatljivosti za druge/neodređene nečistoće i/ili općom monografijom Tvari za farmaceutsku uporabu (2034). Stoga nije potrebno identificirati ove nečistoće za dokazivanje sukladnosti. Vidi također 5.10.
Kontrola nečistoća u tvarima za farmaceutsku uporabu): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihidroksi-5β-kolan-24-oična kiselina (kenodeoksikolna kiselina),
B. 3α,7α,12α-trihidroksi-5β-kolan-24-oična kiselina (kolna kiselina),
C. 3α-hidroksi-5β-kolan-24-oična kiselina (litokolna kiselina),
D. 3α,7β,12α-trihidroksi-5β-kolan-24-oična kiselina (ursokolna kiselina),
E. 3α,12α-dihidroksi-5β-kolan-24-oična kiselina (dezoksikolna kiselina),
F. 3α-hidroksi-7-okso-5β-kolan-24-oična kiselina,
G. metil 3α,7β-dihidroksi-5β-kolan-24-oat,
H. 3β,7β-dihidroksi-5β-kolan-24-oična kiselina,
I. 5β-kolan-3α,7β,24-triol.