Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 Assay (HPLC) 97,0-102,0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
benzol-propánsav, -(benzoil-amino)-hidroxi-, 6,12b-bisz(acetil-oxi)-12-(benzoil-oxi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodekahidro-4,11-dihidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-5-oxo-7,11-metano-1 H-ciklodeka[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-il észter, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-dodekahidro-4,6, 9,11,12,12b-hexahidroxi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciklodeka[3,4]benz[1,2-b]oxet-5-on 6, 12b-diacetát, 12-benzoát, 9-észter (2R,3S)-N-benzoil-3-fenil-izoszerinnel [33069-62-4].
A Paclitaxel legalább 97,0% és legfeljebb 102,0% C47H51NO14-et tartalmaz, vízmentes, oldószermentes alapra számítva.
[Vigyázat – a paclitaxel citotoxikus.Nagy gondot kell fordítani arra, hogy a Paclitaxel részecskéit ne lélegezze be, és ne tegye ki a bőrt ennek.]
Csomagolás és tárolás - Tárolja szoros, fényálló tartályokban, és szabályozott szobahőmérsékleten tárolja.
Címkézés – A címkézés jelzi az anyag előállításához használt eljárás típusát és azt a Kapcsolódó vegyületek tesztet, amelynek az anyag megfelel.
USP referencia szabványok <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS Kattintson a szerkezet megtekintéséhez
USP Paclitaxellel kapcsolatos vegyület A RS
Cefalomannin.
USP Paclitaxellel kapcsolatos B vegyület RS
10-dezacetil-7-epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Impurity Mixture RS
Paclitaxel és a következő rokon vegyületek keveréke: propil-analóg, cefalomannin, szek-butil-analóg, n-butil-analóg, benzil-analóg, bakkatin VI, pentil-analóg és 7-epipaclitaxel.
Azonosítás-
V: Infravörös elnyelés <197K>.
B: A vizsgálati készítmény kromatogramján a főcsúcs retenciós ideje megegyezik a standard készítmény kromatogramján lévő retenciós idejével, amint azt az Assay-ben kaptuk meg.
Fajlagos forgatóképesség 781S: 49,0 és 55,0 között 20 °C-on, vízmentes, oldószermentes alapra számítva.
Vizsgálati oldat: 10 mg/ml, metanolban.
Mikrobaszámlálási tesztek <61> és Tesztek meghatározott mikroorganizmusokra <62> - A teljes aerob mikrobiális szám nem haladja meg a 100 cfu/g értéket.Megfelel a Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella fajok és Escherichia coli hiányára vonatkozó tesztek követelményeinek.
Bakteriális endotoxinok 85 – Legfeljebb 0,4 USP Endotoxin Egységet tartalmaz mg paklitaxelenként.
Víz, Ic módszer <921>: legfeljebb 4,0%.
Izzítási maradék <281>: legfeljebb 0,2%.
Nehézfémek, II. módszer <231>: 0,002%.
Kapcsolódó vegyületek -
1. teszt (természetes forrásból izoláltként jelölt anyag esetén) – Ha az anyag megfelel ennek a tesztnek, a címkézés azt jelzi, hogy megfelel az USP-vel kapcsolatos vegyületek 1. tesztjének.
Hígító – Készítse elő az Assay-ben leírtak szerint.
A oldat – Készítsünk szűrt és gáztalanított acetonitrilt.
B megoldás – Készítsen szűrt és gáztalanított vizet.
Mozgófázis – Használja az A és B oldat változó keverékét a kromatográfiás rendszerben leírtak szerint.Szükség esetén végezze el a beállításokat (lásd: Rendszeralkalmasság a Chromatography 621 alatt).
Rendszeralkalmassági oldat – Oldjon fel pontosan kimért mennyiségű USP Paclitaxel Related Compound A RS és USP Paclitaxel Related Compound B RS vegyületet metanolban, hogy olyan oldatot kapjon, amelynek ismert koncentrációja kb. 10 µg/ml.Vigyen át ebből az oldatból 5,0 ml-t egy 50 ml-es mérőlombikba, hígítsa fel Hígítóval a térfogatra, és keverje össze.
Standard oldat – Oldjon fel ultrahangos kezelés segítségével pontosan kimért mennyiségű USP Paclitaxel RS-t hígítóban, és hígítsa fel mennyiségileg, és szükség esetén lépésenként Hígítóval, hogy olyan oldatot kapjon, amelynek ismert koncentrációja körülbelül 5 µg/ml.
Tesztoldat – Használja az Assay készítményt.
Kromatográfiás rendszer (lásd: Kromatográfia <621>) – A folyadékkromatográf 227 nm-es detektorral és egy 4,6 mm × 25 cm-es oszloppal van felszerelve, amely 5 µm L43 töltetet tartalmaz.Az áramlási sebesség körülbelül 2,6 ml/perc.Az oszlop hőmérsékletét 30 °C-on tartjuk. A kromatográfot a következőképpen programozzuk.
Idő (perc) A oldat (%) B oldat (%) Elúció
0–35 35 65 izokratikus
35–60 35®80 65®20 lineáris gradiens
60–70 80®35 20®65 lineáris gradiens
70–80 35 65 izokratikus Kromatografálja a rendszeralkalmassági oldatot, és rögzítse a csúcsválaszokat az eljárásnál leírtak szerint: a relatív retenciós idő körülbelül 0,78 a paklitaxellel rokon A vegyület és 0,86 a paklitaxellel rokon B vegyület esetében (a paclitaxelből kapott retenciós idejéhez viszonyítva) a tesztoldat);és az R felbontás a paclitaxellel rokon A vegyület és a paclitaxellel rokon B vegyület között nem kisebb, mint 1,0.Kromatografálja a standard oldatot, és jegyezze fel a csúcsválaszokat az eljárásnál leírtak szerint: az ismételt injekciók relatív szórása nem több, mint 2,0%.
Eljárás – Fecskendezzen be egy térfogatot (körülbelül 15 µL) a tesztoldatot a kromatográfba, rögzítse a kromatogramot, és mérje meg a fő csúcsok területét.Számítsa ki az egyes szennyeződések százalékos arányát a Paclitaxel részében a következő képlettel:
100 (Péntek / rU)
amelyben F az egyes szennyezőcsúcsok relatív válaszfaktora (az értékeket lásd az 1. táblázatban);ri az egyes szennyeződések csúcsterülete;és rU a paclitaxel csúcsterülete.
Asztal 1
Relatív megőrzési idő Relatív válaszfaktor (F) névkorlát (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-dezacetil-paklitaxel 0,5
0,57 1,00 7-xilozil-paklitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomannin (A paclitaxellel rokon vegyület) a11
0,78 1,26 2",3"-dihidrocefalomannin a21
0,86 1,00 10-dezacetil-7-epipaclitaxel (paclitaxellel rokon B vegyület) 0,5
1,10 1,00 Benzil analóg3 b12
1,10 1,00 3",4"-Dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-epicefalomannin 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Ezeknek a csúcsoknak a felbontása a jelenlévő relatív mennyiségtől függően előfordulhat, hogy nem teljes;az a1 és a2 összege nem több 0,5%-nál.
2 Ezeknek a csúcsoknak a felbontása a jelenlévő relatív mennyiségtől függően előfordulhat, hogy nem teljes;b1 és b2 összege nem több 0,5%-nál.
3 A következő kémiai név a rokon vegyülethez, a benzilanalóghoz tartozik: Baccatin III 13-ester with (2R,3S)-2-hydroxy-3-phenil-3-(2-phenylacetylamino)propionesav.
Amellett, hogy nem lépik túl az 1. táblázatban a paklitaxellel kapcsolatos szennyeződésekre vonatkozó határértékeket, legfeljebb 0,1%-ban találhatók egyéb egyedi szennyeződések;és az összes szennyeződés legfeljebb 2,0%-a található.
2. teszt (félszintetikus eljárással előállítottként megjelölt anyag esetén) – Ha az anyag megfelel ennek a tesztnek, a címkézés azt jelzi, hogy megfelel az USP-vel kapcsolatos 2. teszt követelményeinek.
Hígító - Használjon acetonitrilt.
A oldat – Használjon víz és acetonitril (3:2) szűrt és gázmentesített keverékét.
B oldat – Használjon szűrt és gáztalanított acetonitrilt.
Mozgófázis – Használja az A és B oldat változó keverékét a kromatográfiás rendszerben leírtak szerint.Szükség esetén végezze el a beállításokat (lásd: Rendszeralkalmasság a Chromatography 621 alatt).
Rendszeralkalmassági oldat – Oldjon fel pontosan kimért mennyiségű USP Paclitaxel RS-t és USP Paclitaxel Related Compound B RS-t hígítóban, rázza fel és szükség esetén ultrahangos kezelést végez, hogy körülbelül 0,96 mg/ml ismert koncentrációjú oldatot kapjon, illetve 0,008 mg/ml.
Vizsgálati oldat – Vigyen át körülbelül 10 mg Paclitaxelt, pontosan lemérve egy 10 ml-es mérőlombikba, oldja fel és hígítsa térfogatra Hígítóval, rázzuk és ultrahanggal kezeljük, ha szükséges, majd keverjük össze.
Kromatográfiás rendszer (lásd: Chromatography 621) – A folyadékkromatográf 227 nm-es detektorral és egy 4,6 mm × 15 cm-es oszloppal van felszerelve, amely 3 µm L1 töltetet tartalmaz.Az áramlási sebesség körülbelül 1,2 ml/perc.Az oszlop hőmérsékletét 35 °C-on tartjuk. A kromatográfot a következőképpen programozzuk.
Idő (perc) A oldat (%) B oldat (%) Elúció
0-20 100 0 izokratikus
20-60 100®10 0®90 lineáris gradiens
60-62 10®100 90®0 lineáris gradiens
62-70 100 0 izokratikus Kromatografálja a rendszeralkalmassági oldatot, és rögzítse a csúcsválaszokat az eljárásnál leírtak szerint: a relatív retenciós idők körülbelül 0,94 a paklitaxellel rokon B vegyületnél és 1,0 a paklitaxelnél;a paclitaxellel rokon B vegyület és a paclitaxel közötti R felbontás nem kisebb, mint 1,2;és az ismételt injekciók relatív szórása nem több, mint 2,0%.
Eljárás – Külön-külön fecskendezzünk azonos térfogatú (körülbelül 15 µL) hígítót és tesztoldatot a kromatográfba, jegyezzük fel a kromatogramokat, és mérjük meg az összes csúcs területét.Hagyja figyelmen kívül a Diluens okozta csúcsokat.Számítsa ki az egyes szennyeződések százalékos arányát a Paclitaxel részében a következő képlettel:
100 (Péntek / RS)
amelyben F az egyes szennyeződések relatív válaszfaktora (az értékeket lásd a 2. táblázatban);ri a vizsgálati oldatból nyert egyes szennyeződések csúcsterülete;és rs a tesztoldatból kapott összes csúcs területének összege.
2. táblázat
Relatív megőrzési idő Relatív válaszfaktor (F) névkorlát (%)
0,11 1,24 10-dezacetil-bakkatin III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradáns2 0,1
0,47 1,00 10-dezacetil-paklitaxel 0,5
0,80 1,00 2-debenzoil-paclitaxel-2-pentenoát 0,7
0,921 1,00 Oxetán gyűrű megnyílt, acetil és benzoil vándorol 2 x 1
0,921 1,00 10-acetoacetil-paclitaxel x2
0,941 1,00 10-dezacetil-7-epipaclitaxel (B paklitaxellel rokon vegyület) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-acetil-paclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 Ezeknek a csúcsoknak a felbontása a jelenlévő relatív mennyiségtől függően előfordulhat, hogy nem teljes;x1, x2 és x3 összege nem több 0,4%-nál.
2 A következő kémiai nevek vannak a kapcsolódó vegyületekhez rendelve: Fotodegradáns;Az oxetángyűrű felnyílt, az acetil- és a benzoil-csoport vándorolt;és 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradáns
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetil-oxi-5,13-dihidroxi-4,16,17,17-tetrametil-8-oxa- 3-oxo-12-fenil-karbonil-oxi-pentaciklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenil-karbonil-amino)-propanoát
Az oxetángyűrű megnyílt, az acetil és a benzoil vándorol
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetil-oxi-1,2,4,7-tetrahidroxi-8,12,15,15-tetrametil-9-oxo- 4-(fenil-karbonil-oxi-metil)-triciklo[9.3.1.03,8]pentadec-11-én-13-il
(2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenil-karbonil-amino)-propanoát
10,13-Bissidechain paklitaxel
Baccatin III 13-észter (2R,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenil-karbonil-amino)-propánsavval, 10-észter (2S,3S)-2-hidroxi-3-fenil-3-(fenil-karbonil-amino-val) )propánsav
Amellett, hogy nem lépi túl a 2. táblázatban a paklitaxellel kapcsolatos szennyeződésekre vonatkozó határértékeket, legfeljebb 0,1%-ban találtak egyetlen szennyeződést sem;és az összes szennyeződés legfeljebb 2,0%-a található.
3. teszt (növénysejt-fermentációs eljárással előállítottként jelölt anyag esetén) – Ha az anyag megfelel ennek a tesztnek, a címkézés azt jelzi, hogy megfelel az USP kapcsolódó vegyületek 3. tesztjének.
A oldat – Készítsen víz és acetonitril (3:2) szűrt és gázmentesített keverékét.
B oldat – Készítsünk szűrt és gáztalanított acetonitrilt.
Mozgófázis – Használja az A és B oldat változó keverékét a kromatográfiás rendszerben leírtak szerint.Szükség esetén végezze el a beállításokat (lásd: Rendszeralkalmasság a Chromatography 621 alatt).
Rendszeralkalmassági oldat – Oldja fel az USP Paclitaxel Impurity Mixture RS-t acetonitrilben, szükség esetén ultrahangos kezeléssel, hogy olyan oldatot kapjon, amelynek ismert koncentrációja körülbelül 1 mg/ml.
Standard oldat – Oldjon fel egy pontosan kimért mennyiségű USP Paclitaxel RS-t acetonitrilben, szükség esetén ultrahangos kezeléssel, hogy olyan oldatot kapjon, amelynek ismert koncentrációja körülbelül 1 mg/ml.
Vizsgálati oldat – Vigyen át körülbelül 10 mg Paclitaxelt pontosan lemérve egy 10 ml-es mérőlombikba.Oldjuk fel és hígítsuk fel acetonitrillel, szükség esetén ultrahanggal kezeljük, majd keverjük össze.
Kromatográfiás rendszer (lásd: Chromatography 621) – A folyadékkromatográf 227 nm-es detektorral és egy 4,6 mm × 15 cm-es oszloppal van felszerelve, amely 3 µm L1 töltetet tartalmaz.Az áramlási sebesség körülbelül 1,2 ml/perc.A kromatográf a következőképpen van programozva.
Idő (perc) A oldat (%) B oldat (%) Elúció
0-28 100 0 izokratikus
28-33 100®98 0®2 lineáris gradiens
33–58 98®10 2®90 lineáris gradiens
58-60 10 90 izokratikus
60-63 10®100 90®0 lineáris gradiens
63-70 100 0 izokratikus Kromatografálja a rendszeralkalmassági oldatot, és rögzítse a csúcsválaszokat az eljárásnál leírtak szerint: a paklitaxel és a benzilanalóg közötti R felbontás nem kisebb, mint 1,8.Kromatografálja a standard oldatot, és jegyezze fel a csúcsválaszokat az eljárásnál leírtak szerint: az ismételt injekciók relatív szórása nem több, mint 2,0%.[Megjegyzés – A csúcs azonosítása céljából a hozzávetőleges relatív retenciós időket a 3. táblázat tartalmazza. A relatív retenciós időket a Paclitaxelhez viszonyítva mérjük.]
3. táblázat
Név relatív megőrzési időkorlátja (%)
Propil analóg1 0,54 0,2
Cefalomannin (A paclitaxellel rokon vegyület) 0,76 0,5
szek-Butil analóg2 0,81 0,2
n-butil analóg3 0,89 0,1
Benzilanalóg 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentil analóg4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 A következő kémiai név a rokon propilanalóg vegyülethez tartozik: Baccatin III 13-ester with (2R,3S)-3-butanoilamino-2-hydroxy-3-phenilpropionesav.
2 A következő kémiai név a rokon szek-butil-analóghoz tartozik: Bakkatin III 13-észter (2R,3S)-2-hidroxi-3-(2-metil-butanoil-amino)-3-fenil-propánsavval.
3 A következő kémiai név a rokon n-butil-analóghoz tartozik: Baccatin III 13-észter (2S,3S)-2-hidroxi-3-(pentanoilamino)-3-fenil-propánsavval.
4 A következő kémiai név a rokon Pentil-analóg vegyülethez tartozik: Bakkatin III 13-észter (2R,3S)-3-(hexanoilamino)-2-hidroxi-3-fenil-propánsavval.
Eljárás – Fecskendezzünk be egy térfogatot (körülbelül 12 µL) a tesztoldatot a kromatográfba, jegyezzük fel a kromatogramot, és mérjük meg az összes csúcs területét.Számítsa ki az egyes szennyeződések százalékos arányát a Paclitaxel részében a következő képlettel:
100 (ri / rU)
amelyben ri az egyes szennyeződések válasza;és rU a tesztoldatból kapott összes csúcs területének összege.Amellett, hogy nem lépik túl a 3. táblázatban a paklitaxellel kapcsolatos szennyeződésekre vonatkozó határértékeket, legfeljebb 0,1%-ban találhatók egyéb egyedi szennyeződések;és az összes szennyeződés legfeljebb 2,0%-a található.
Próba-
Hígító – Készítse elő metanol és ecetsav (200:1) keverékét.
Mozgófázis: Készítsünk víz és acetonitril (11:9) szűrt és gázmentesített keverékét.Szükség esetén végezze el a beállításokat (lásd: Rendszeralkalmasság a Chromatography 621 alatt).
Szabványos készítmény – Szükség esetén ultrahangos kezeléssel oldjunk fel pontosan kimért mennyiségű USP Paclitaxel RS-t hígítóban, és hígítsuk mennyiségileg, és szükség esetén lépésenként Hígítóval, hogy körülbelül 1 mg/ml ismert koncentrációjú oldatot kapjunk.
A vizsgálat előkészítése – Vigyen át körülbelül 10 mg Paclitaxelt pontosan lemérve egy 10 ml-es mérőlombikba.Oldja fel Hígítóban, szükség esetén ultrahangos kezelést alkalmazva, hígítsa fel Hígítóval a térfogatra, és keverje össze.
Kromatográfiás rendszer (lásd: Kromatográfia <621>) – A folyadékkromatográf 227 nm-es detektorral és egy 4,6 mm × 25 cm-es oszloppal van felszerelve, amely 5 µm L43 töltetet tartalmaz.Az áramlási sebesség körülbelül 1,5 ml percenként.Kromatografálja a standard készítményt, és rögzítse a csúcsválaszokat az eljárásnál leírtak szerint: a faroktényező 0,7 és 1,3 között van;és az ismételt injekciók relatív szórása nem több, mint 1,5%.
Eljárás – Fecskendezzen be külön-külön egyenlő térfogatú (körülbelül 10 µL) standard készítményt és vizsgálati készítményt a kromatográfba, rögzítse a kromatogramokat, és mérje meg a fő csúcsok területét.Számítsa ki a C47H51NO14 mennyiségét mg-ban a paclitaxel részében a következő képlettel:
10C (rU / rS)
amelyben C a standard készítményben lévő USP Paclitaxel RS koncentrációja mg/ml-ben;és az rU és rS a vizsgálati készítményből és a standard készítményből kapott paklitaxelre adott csúcsválaszok.