Urzodezoxikólsav (UDCA) CAS 128-13-2 Assay 99,0-101,0%

URSODEOXIKOLSAV
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
MEGHATÁROZÁS
3α,7β-dihidroxi-5β-kolán-24-karbonsav.
Tartalom: 99,0-101,0% (szárított anyag).
KARAKTEREK
Megjelenés: fehér vagy csaknem fehér por.
Oldékonyság: vízben gyakorlatilag nem oldódik; etanolban (96%) bőségesen oldódik; acetonban kevéssé oldódik; diklórmetánban gyakorlatilag nem oldódik.
olvadáspont: körülbelül 202 ℃.
AZONOSÍTÁS
Első azonosítás: A.
Második azonosítás: B, C.
A. Infravörös abszorpciós spektrofotometria (2.2.24).
Összehasonlítás: Ursodeoxycholic Acid CRS.
B. Vizsgálja meg a C-szennyező vizsgálata során kapott kromatogramokat.
Értékelés: a b) vizsgálati oldat kromatogramjának főfoltja helyét, színét és méretét tekintve egyezzék meg az a) összehasonlító oldat kromatogramjának főfoltjával.
C. Kb. 10 mg anyagot 1 ml R kénsavban oldunk. Az oldathoz 0,1 ml R formaldehid-oldatot adunk, és 5 percig állni hagyjuk.5 ml R vizet adunk hozzá. A kapott szuszpenzió zöldeskék színű.
TESZTEK
Fajlagos optikai forgatóképesség (2.2.7): + 58,0 - + 62,0 (szárított anyag).
0,500 g anyagot R vízmentes etanollal 25,0 ml-re oldunk.
C-szennyező. Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27).
Oldószerelegy: víz R, aceton R (10:90 V/V).
Vizsgálati oldat (a).0,40 g vizsgálandó anyagot az oldószereleggyel 10 ml-re oldunk.
Vizsgálati oldat (b).Az a) vizsgálati oldat 1 ml-ét az oldószereleggyel 10 ml-re hígítjuk.
Összehasonlító oldat (a).Oldjunk fel 40 mg CRS urzodezoxikólsavat az oldószerelegyben, és hígítsuk fel 10 ml-re az oldószereleggyel.
Összehasonlító oldat (b).Oldjunk fel 20 mg CRS litokolsavat (C-szennyező) az oldószerelegyben, és hígítsuk fel 10,0 ml-re az oldószereleggyel (A oldat).Ebből az oldatból 2,0 ml-t 100,0 ml-re hígítunk az oldószereleggyel.
Összehasonlító oldat (c).5 ml A oldathoz adjunk 10 mg CRS kenodezoxikólsavat (A-szennyező), és hígítsuk 50 ml-re az oldószereleggyel.
Lemez: R VRK szilikagél lemez.
Mozgófázis: jégecet R, aceton R, metilénklorid R (1:30:60 V/V/V).
Felhasználás: 5μL.
Fejlődés: a lemez 2/3-a felett.
Szárítás: 120°C-on 10 percig.
Kimutatás: azonnal bepermetezzük R foszfomolibdénsav 1 térfogatrész R kénsav és 20 térfogatrész R jégecet elegyével készült 47,6 g/l töménységű oldatával, és 120 °C-on melegítjük, amíg világosabb háttéren kék foltok jelennek meg.
Rendszeralkalmasság: c) összehasonlító oldat:
- a kromatogram 2 jól elkülönülő főfoltot mutat.
Határérték: a) vizsgálati oldat:
-C-szennyező: a C-szennyezőből származó egyetlen folt sem lehet intenzívebb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramjának főfoltja (0,1%).
Kapcsolódó anyagok.Folyadékkromatográfia (2.2.29).
Oldószerelegy: R metanol, mozgófázis (10:90 V/V).
Tesztoldat.60 mg vizsgálandó anyagot az oldószereleggyel 20,0 ml-re oldunk.
Összehasonlító oldat (a).Oldja fel a CRS rendszeralkalmassági ursodeoxycholic Acid injekciós üveg tartalmát (amely A- és H-szennyezőt tartalmaz) 1,0 ml oldószerelegyben.
Összehasonlító oldat (b).A vizsgálati oldat 1,0 ml-ét az oldószereleggyel 100,0 ml-re hígítjuk.Ebből az oldatból 1,0 ml-t 10,0 ml-re hígítunk az oldószereleggyel.
Oszlop:
-méret: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-stacionárius fázis: végzáró oktadecilszilil szilikagél forkromatográfia R (5 μm);
- hőmérséklet: 40℃ ± 1℃.
Mozgófázis: 30 térfogatrész R acetonitril, R nátrium-dihidrogén-foszfát 0,78 g/l töménységű, R foszforsavval 3-ra beállított oldata 37 térfogatrész és 40 térfogatrész R metanol elegye.
Áramlási sebesség: 0,8 ml/perc.
Detektálás: refraktométer 35 ± 1 ℃-on.
Injekció: 150 μL.
Kromatografálási idő: az ursodeoxycholic Acid retenciós idejének 4-szerese.
Szennyeződések azonosítása: az A- és H-szennyező csúcsainak azonosításához használja a CRS rendszeralkalmassági vizsgálathoz urzodezoxikólsavhoz mellékelt kromatogramot és az a) összehasonlító oldat kromatogramját.
Relatív retenció az urzodezoxikólsavra vonatkoztatva (retenciós idő kb. 14 perc): H-szennyező kb. 0,9;A-szennyező = kb. 2,8.
Rendszeralkalmasság: a) összehasonlító oldat:
-felbontás: minimum 1,5 a csúcsok között a H-szennyező és az urzodezoxikólsav miatt.
Korlátok:
- A-szennyező: csúcsterülete nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének tízszerese (1,0%);
- meghatározatlan szennyeződések: csúcsterületük egyenként nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területe (0,10%);
- összesen: csúcsterületük nem lehet nagyobb, mint a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 15-szöröse (1,5%);
- figyelmen kívül hagyási határ: a b) összehasonlító oldat kromatogramján látható főcsúcs területének 0,5-szerese (0,05%).
Nehézfémek (2.4.8): maximum 20 ppm.
1,0 g anyagot vizsgálunk. Az összehasonlító oldatot 2 ml R ólom-mértékoldattal (10 ppm Pb) készítjük.
Szárítási veszteség (2.2.32): legfeljebb 1,0 %, 1000 g-on kemencében 105 °C-on történő szárítással meghatározva.
Szulfázott hamu (2.4.14): maximum 0,1%, 1,0 g-on meghatározva.
PRÓBA
0,350 g anyagot 50 ml (96%-os) R etanolban oldunk, amelyet előzőleg 0,2 ml R fenolftalein-oldattal semlegesítettünk. 50 ml R vizet adunk hozzá, és 0,1 M nátrium-hidroxid-mérőoldattal rózsaszínűvé titráljuk.
1 ml 0,1 M nátrium-hidroxid 39,26 mg C24H40O4-nek felel meg.
SZENNYEZŐDÉSEK
Meghatározott szennyeződések: A, C.
Egyéb kimutatható szennyeződések (a következő anyagokat, ha elegendő mennyiségben vannak jelen, a monográfia egyik vagy másik vizsgálata kimutatja. Ezeket korlátozza az egyéb/nem meghatározott szennyeződésekre vonatkozó általános elfogadási kritérium és/vagy az Anyagok általános monográfia gyógyszerészeti felhasználásra (2034). Ezért nem szükséges azonosítani ezeket a szennyeződéseket a megfelelőség bizonyításához. Lásd még 5.10.
Szennyeződések ellenőrzése gyógyszerészeti felhasználású anyagokban): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-dihidroxi-5β-kolán-24-karbonsav (kenodezoxikólsav),
B. 3α,7α,12α-trihidroxi-5β-kolán-24-karbonsav (kólsav),
C. 3α-hidroxi-5β-kolán-24-karbonsav (litokólsav),
D. 3α,7β,12α-trihidroxi-5β-kolán-24-onsav (ursocholic sav),
E. 3α,12α-dihidroxi-5β-kolán-24-karbonsav (dezoxikólsav),
F. 3α-hidroxi-7-oxo-5β-kolán-24-karbonsav,
G. metil-3α,7β-dihidroxi-5β-kolán-24-oát,
H. 3β,7β-dihidroxi-5β-kolán-24-karbonsav,
I. 5p-kolán-3a,7p,24-triol.