Uji Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 (HPLC) 97.0~102.0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853.91
Asam benzenapropanoat, -(benzoilamina)--hidroksi-, 6,12b-bis(asetiloksi)-12-(benzoiloksi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecahydro-4,11-dihidroksi-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-yl ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecahydro-4,6, 9,11,12,12b-hexahydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-7,11-methano-5H-cyclodeca[3,4]-benz[1,2-b]okset-5-on 6, 12b-diasetat, 12-benzoat, 9-ester dengan (2R,3S)-N-benzoyl-3-phenylisoserine [33069-62-4].
Paclitaxel mengandung tidak kurang dari 97,0 persen dan tidak lebih dari 102,0 persen C47H51NO14, dihitung berdasarkan anhidrat, bebas pelarut.
[Perhatian-Paclitaxel bersifat sitotoksik.Sangat hati-hati harus diambil untuk mencegah menghirup partikel Paclitaxel dan membuat kulit terpapar.]
Pengemasan dan penyimpanan-Simpan dalam wadah yang rapat dan tahan cahaya, dan simpan pada suhu ruangan yang terkontrol.
Pelabelan-Pelabelan menunjukkan jenis proses yang digunakan untuk menghasilkan bahan dan uji senyawa terkait yang sesuai dengan bahan tersebut.
Standar Referensi USP <11>-
USP Endotoksin RS
USP Paclitaxel RS Klik untuk Melihat Struktur
Senyawa Terkait USP Paclitaxel A RS
Cephalomannine.
Senyawa Terkait USP Paclitaxel B RS
10-Deacetyl-7-Epipaclitaxel.
Campuran Pengotor USP Paclitaxel RS
Campuran Paclitaxel dan senyawa terkait berikut: analog propil, sefalomannin, analog sec-butil, analog n-butil, analog benzil, baccatin VI, analog pentil, dan 7-epipaclitaxel.
Identifikasi-
A: Penyerapan Inframerah <197K>.
B: Waktu retensi puncak utama dalam kromatogram sediaan uji sesuai dengan kromatogram sediaan standar, seperti yang diperoleh dalam penetapan kadar.
Rotasi spesifik 781S: antara 49,0 dan 55,0 pada 20, dihitung berdasarkan anhidrat, bebas pelarut.
Larutan uji: 10 mg per mL, dalam metanol.
Tes pencacahan mikroba <61> dan Tes untuk mikroorganisme tertentu <62>-Jumlah total mikroba aerobik tidak melebihi 100 cfu per g.Ini memenuhi persyaratan tes untuk tidak adanya Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, spesies Salmonella, dan Escherichia coli.
Bakteri endotoksin 85-Mengandung tidak lebih dari 0,4 USP Endotoksin Unit per mg paclitaxel.
Air, Metode Ic <921>: tidak lebih dari 4,0%.
Residu saat penyalaan <281>: tidak lebih dari 0,2%.
Logam berat, Metode II <231>: 0,002%.
Senyawa Terkait-
tes 1 (untuk bahan berlabel terisolasi dari sumber alami)-Jika bahan tersebut memenuhi tes ini, pelabelan menunjukkan bahwa bahan tersebut memenuhi Uji Senyawa Terkait USP 1.
Pengencer-Siapkan seperti yang diarahkan dalam Pengujian.
Solusi A-Siapkan asetonitril yang disaring dan dihilangkan gasnya.
Solusi B-Siapkan air yang disaring dan dihilangkan gasnya.
Fase gerak-Gunakan campuran variabel Larutan A dan Larutan B seperti yang diarahkan untuk sistem Kromatografi.Lakukan penyesuaian jika perlu (lihat Kesesuaian Sistem pada Kromatografi 621).
Larutan kesesuaian sistem - Larutkan jumlah yang akurat dari Senyawa Terkait USP Paclitaxel A RS dan USP Paclitaxel Senyawa Terkait B RS dalam metanol untuk mendapatkan larutan yang memiliki konsentrasi yang diketahui masing-masing sekitar 10 µg per mL.Pindahkan 5,0 mL larutan ini ke labu takar 50 mL, encerkan dengan Pengencer hingga tanda, dan campur.
Larutan standar - Larutkan, dengan bantuan sonikasi, sejumlah USP Paclitaxel RS yang ditimbang secara akurat dalam Pengencer, dan encerkan secara kuantitatif, dan secara bertahap jika perlu, dengan Pengencer untuk mendapatkan larutan yang memiliki konsentrasi yang diketahui sekitar 5 µg per mL.
Larutan uji-Gunakan sediaan Uji.
Sistem kromatografi (lihat Kromatografi <621>)-Kromatografi cair dilengkapi dengan detektor 227 nm dan kolom 4,6 mm × 25 cm yang berisi kemasan 5 µm L43.Laju aliran sekitar 2,6 mL per menit.Temperatur kolom dipertahankan pada 30. Kromatografi diprogram sebagai berikut.
Waktu (menit) Larutan A (%) Larutan B (%) Elusi
0–35 35 65 isokratik
35–60 35®80 65®20 gradien linier
60–70 80®35 20®65 gradien linier
70–80 35 65 isokratik Kromatografi solusi kesesuaian Sistem, dan catat respons puncak seperti yang diarahkan untuk Prosedur: waktu retensi relatif sekitar 0,78 untuk senyawa A terkait paclitaxel dan 0,86 untuk senyawa B terkait paclitaxel (relatif terhadap waktu retensi untuk paclitaxel yang diperoleh dari solusi Uji);dan resolusi, R, antara senyawa A terkait paclitaxel dan senyawa B terkait paclitaxel tidak kurang dari 1,0.Kromatografi larutan Standar, dan catat respons puncak seperti yang diarahkan pada Prosedur: standar deviasi relatif untuk injeksi ulangan tidak lebih dari 2,0%.
Prosedur-Masukkan sejumlah volume (sekitar 15 µL) Larutan uji ke dalam kromatografi, rekam kromatogram, dan ukur luas puncak utama.Hitung persentase masing-masing pengotor dalam porsi Paclitaxel yang diambil dengan rumus:
100(Jumat / rU)
di mana F adalah faktor respons relatif untuk setiap puncak pengotor (lihat Tabel 1 untuk nilai);ri adalah luas puncak untuk setiap kenajisan individu;dan rU adalah luas puncak untuk paclitaxel.
Tabel 1
Waktu Retensi Relatif Faktor Respons Relatif (F) Batas Nama (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-Xylosylpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cephalomannine (senyawa terkait Paclitaxel A) a11
0,78 1,26 2'',3''-Dihydrocephalomannine a21
0,86 1,00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (senyawa terkait Paclitaxel B) 0,5
1.10 1.00 Benzil analog3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicephalomannine 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Resolusi mungkin tidak lengkap untuk puncak ini, tergantung pada jumlah relatif yang ada;jumlah a1 dan a2 tidak lebih dari 0,5%.
2 Resolusi mungkin tidak lengkap untuk puncak ini, tergantung pada jumlah relatif yang ada;jumlah b1 dan b2 tidak lebih dari 0,5%.
3 Nama kimia berikut diberikan untuk senyawa terkait, analog benzil:Baccatin III 13-ester dengan (2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(2-fenilasetilamina)propanoat asam.
Selain tidak melebihi batas untuk pengotor terkait paclitaxel pada Tabel 1, tidak lebih dari 0,1% dari pengotor tunggal lainnya ditemukan;dan tidak lebih dari 2,0% dari total pengotor ditemukan.
uji 2 (untuk bahan yang berlabel diproduksi oleh proses semisintetik)— Jika bahan tersebut memenuhi uji ini, label menunjukkan bahwa bahan tersebut memenuhi Uji Senyawa Terkait USP 2.
Pengencer-Gunakan asetonitril.
Larutan A-Gunakan campuran air dan asetonitril yang disaring dan dihilangkan gasnya (3:2).
Larutan B-Gunakan asetonitril yang disaring dan dihilangkan gasnya.
Fase gerak-Gunakan campuran variabel Larutan A dan Larutan B seperti yang diarahkan untuk sistem Kromatografi.Lakukan penyesuaian jika perlu (lihat Kesesuaian Sistem pada Kromatografi 621).
Larutan kesesuaian sistem - Larutkan secara akurat jumlah USP Paclitaxel RS dan USP Paclitaxel Related Compound B RS dalam Pengencer, kocok dan sonikasi jika perlu, untuk mendapatkan larutan yang memiliki konsentrasi masing-masing sekitar 0,96 mg dan 0,008 mg per mL.
Larutan uji - Pindahkan sekitar 10 mg Paclitaxel, timbang dengan teliti, ke dalam labu takar 10 mL, larutkan dan encerkan dengan Pengencer hingga tanda, kocok dan sonikasi jika perlu, dan campur.
Sistem kromatografi (lihat Kromatografi 621)— Kromatografi cair dilengkapi dengan detektor 227 nm dan kolom 4,6 mm × 15 cm yang berisi paking 3 µm L1.Laju aliran sekitar 1,2 mL per menit.Temperatur kolom dipertahankan pada 35. Kromatografi diprogram sebagai berikut.
Waktu (menit) Larutan A (%) Larutan B (%) Elusi
0-20 100 0 isokratik
20-60 100®10 0®90 gradien linier
60-62 10®100 90®0 gradien linier
62-70 100 0 isokratik Kromatografi solusi kesesuaian Sistem, dan catat respons puncak seperti yang diarahkan untuk Prosedur: waktu retensi relatif sekitar 0,94 untuk senyawa B terkait paclitaxel dan 1,0 untuk paclitaxel;resolusi, R, antara senyawa B terkait paclitaxel dan paclitaxel tidak kurang dari 1,2;dan standar deviasi relatif untuk suntikan ulangan tidak lebih dari 2,0%.
Prosedur-Secara terpisah, injeksikan Pengencer dengan volume yang sama (sekitar 15 µL) dan Larutan uji ke dalam kromatografi, rekam kromatogram, dan ukur luas semua puncak.Abaikan setiap puncak karena Pengencer.Hitung persentase masing-masing pengotor dalam porsi Paclitaxel yang diambil dengan rumus:
100(Jumat / rb)
di mana F adalah faktor respons relatif untuk setiap pengotor (lihat Tabel 2 untuk nilai);ri adalah luas puncak untuk setiap pengotor yang diperoleh dari Larutan uji;dan rs adalah jumlah luas semua puncak yang diperoleh dari larutan Uji.
Meja 2
Waktu Retensi Relatif Faktor Respons Relatif (F) Batas Nama (%)
0,11 1,24 10-Deacetylbaccatin III 0,1
0,20 1,29 Bakaratin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradasi2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetylpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoylpaclitaxel-2-pentenoat 0,7
0,921 1,00 Cincin oksetana dibuka, asetil dan benzoil bermigrasi2 x1
0,921 1,00 10-Acetoacetylpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-Deacetyl-7-epipaclitaxel (senyawa terkait Paclitaxel B) x3
1.37 1.00 7-Epipaclitaxel 0.4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Asetilpaklitaksel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2.14 1.00 7-Tes-paclitaxel 0.3
1 Resolusi mungkin tidak lengkap untuk puncak ini, tergantung pada jumlah relatif yang ada;jumlah x1, x2, dan x3 tidak lebih dari 0,4%.
2 Nama kimia berikut diberikan untuk senyawa terkait Fotodegradan;Cincin oksetana terbuka, asetil dan benzoil bermigrasi;dan 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradan
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetyloxy-5,13-dihidroksi-4,16,17,17-tetramethyl-8-oxa- 3-okso-12-fenilkarboniloksipentasiklo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadek-15-il
(2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoat
Cincin oksetana terbuka, asetil dan benzoil bermigrasi
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetyloxy-1,2,4,7-tetrahidroksi-8,12,15,15-tetramethyl-9-okso- 4-(fenilkarboniloksimetil)trisiklo[9.3.1.03,8]pentadeks-11-en-13-il
(2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)propanoat
10,13-Bissidechainpaclitaxel
Baccatin III 13-ester dengan (2R,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino)asam propanoat, 10-ester dengan (2S,3S)-2-hidroksi-3-fenil-3-(fenilkarbonilamino ) asam propanoat
Selain tidak melebihi batas untuk pengotor terkait paclitaxel pada Tabel 2, tidak lebih dari 0,1% dari pengotor tunggal lainnya ditemukan;dan tidak lebih dari 2,0% dari total pengotor ditemukan.
uji 3 (untuk bahan yang berlabel diproduksi oleh proses fermentasi sel tumbuhan)— Jika bahan memenuhi uji ini, label menunjukkan bahwa bahan tersebut memenuhi Uji Senyawa Terkait USP 3.
Larutan A-Siapkan campuran air dan asetonitril yang disaring dan dihilangkan gasnya (3:2).
Solusi B-Siapkan asetonitril yang disaring dan dihilangkan gasnya.
Fase gerak-Gunakan campuran variabel Larutan A dan Larutan B seperti yang diarahkan untuk sistem Kromatografi.Lakukan penyesuaian jika perlu (lihat Kesesuaian Sistem pada Kromatografi 621).
Larutan kesesuaian sistem - Larutkan Campuran Pengotor USP Paclitaxel RS dalam asetonitril, sonikasi jika perlu, untuk mendapatkan larutan yang memiliki konsentrasi yang diketahui sekitar 1 mg per mL.
Larutan standar - Larutkan sejumlah USP Paclitaxel RS yang ditimbang secara akurat dalam asetonitril, sonikasi jika perlu, untuk mendapatkan larutan yang memiliki konsentrasi yang diketahui sekitar 1 mg per mL.
Larutan uji - Pindahkan sekitar 10 mg Paclitaxel, timbang dengan teliti, ke dalam labu takar 10 mL.Larutkan dan encerkan dengan asetonitril sampai tanda, sonikasi jika perlu, dan campur.
Sistem kromatografi (lihat Kromatografi 621)— Kromatografi cair dilengkapi dengan detektor 227 nm dan kolom 4,6 mm × 15 cm yang berisi paking 3 µm L1.Laju aliran sekitar 1,2 mL per menit.Kromatografi diprogram sebagai berikut.
Waktu (menit) Larutan A (%) Larutan B (%) Elusi
0-28 100 0 isokratik
28-33 100®98 0®2 gradien linier
33–58 98®10 2®90 gradien linier
58-60 10 90 isokratik
60-63 10®100 90®0 gradien linier
63-70 100 0 isokratik Kromatografi Solusi kesesuaian sistem, dan catat respons puncak seperti yang diarahkan untuk Prosedur: resolusi, R, antara paclitaxel dan analog benzil tidak kurang dari 1,8.Kromatografi larutan Standar, dan catat respons puncak seperti yang diarahkan pada Prosedur: standar deviasi relatif untuk injeksi ulangan tidak lebih dari 2,0%.[catatan—Untuk tujuan identifikasi puncak, perkiraan waktu retensi relatif diberikan pada Tabel 3. Waktu retensi relatif diukur versus Paclitaxel.]
Tabel 3
Nama Batas Waktu Retensi Relatif (%)
Propil analog1 0,54 0,2
Cephalomannine (senyawa terkait Paclitaxel A) 0,76 0,5
detik-Butil analog2 0,81 0,2
n-Butil analog3 0,89 0,1
Benzil analog 1,10 0,4
Bakarat VI 1.23 0.2
Pentil analog4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1.51 0.4
1 Nama kimia berikut diberikan untuk senyawa terkait Propil analog: Baccatin III 13-ester dengan (2R,3S)-3-butanoylamino-2-hydroxy-3-phenylpropanoic acid.
2 Nama kimia berikut diberikan untuk senyawa terkait sec-Butil analog:Baccatin III 13-ester dengan (2R,3S)-2-hidroksi-3-(2-metilbutanoylamino)-3-asam fenilpropanoat.
3 Nama kimia berikut diberikan untuk senyawa terkait analog n-Butil:Baccatin III 13-ester dengan asam (2S,3S)-2-hidroksi-3-(pentanoylamino)-3-fenilpropanoat.
4 Nama kimia berikut diberikan untuk senyawa analog Pentyl terkait:Baccatin III 13-ester dengan (2R,3S)-3-(hexanoylamino)-2-hydroxy-3-phenylpropanoic acid.
Prosedur-Masukkan sejumlah volume (sekitar 12 µL) Larutan uji ke dalam kromatografi, rekam kromatogram, dan ukur luas semua puncak.Hitung persentase masing-masing pengotor dalam porsi Paclitaxel yang diambil dengan rumus:
100(ri / rU)
di mana ri adalah tanggapan dari setiap kenajisan individu;dan rU adalah jumlah luas semua puncak yang diperoleh dari larutan Uji.Selain tidak melebihi batas untuk pengotor terkait paclitaxel pada Tabel 3, tidak lebih dari 0,1% dari pengotor tunggal lainnya ditemukan;dan tidak lebih dari 2,0% dari total pengotor ditemukan.
Pengujian kadar logam-
Pengencer-Siapkan campuran metanol dan asam asetat (200:1).
Fase gerak-Siapkan campuran air dan asetonitril yang disaring dan dihilangkan gasnya (11:9).Lakukan penyesuaian jika perlu (lihat Kesesuaian Sistem pada Kromatografi 621).
Persiapan standar - Larutkan, menggunakan sonikasi jika perlu, sejumlah USP Paclitaxel RS yang ditimbang secara akurat dalam Pengencer, dan encerkan secara kuantitatif, dan bertahap jika perlu, dengan Pengencer untuk mendapatkan larutan yang memiliki konsentrasi yang diketahui sekitar 1 mg per mL.
Persiapan pengujian - Pindahkan sekitar 10 mg Paclitaxel, timbang dengan teliti, ke dalam labu takar 10 mL.Larutkan dalam Pengencer, gunakan sonikasi jika perlu, encerkan dengan Pengencer hingga tanda, dan campur.
Sistem kromatografi (lihat Kromatografi <621>)-Kromatografi cair dilengkapi dengan detektor 227 nm dan kolom 4,6 mm × 25 cm yang berisi kemasan 5 µm L43.Laju aliran sekitar 1,5 mL per menit.Kromatografi sediaan Standar, dan catat respons puncak seperti yang diarahkan pada Prosedur: faktor sisa antara 0,7 dan 1,3;dan standar deviasi relatif untuk suntikan ulangan tidak lebih dari 1,5%.
Prosedur-Secara terpisah, injeksikan volume yang sama (sekitar 10 µL) Larutan standar dan Larutan uji ke dalam kromatografi, rekam kromatogram, dan ukur luas puncak utama.Hitung jumlah, dalam mg, C47H51NO14 dalam porsi Paclitaxel yang diambil dengan rumus:
10C(rU / rS)
di mana C adalah konsentrasi, dalam mg per mL, USP Paclitaxel RS dalam sediaan Standar;dan rU dan rS masing-masing adalah respons puncak untuk paclitaxel yang diperoleh dari sediaan Assay dan sediaan Standar.