L-4-Nítrófenýlalanín Metýl Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl prófun >98,5% (HPLC) Verksmiðju

Aðferð við greiningu á L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Lýsing: Settu um það bil 2 g af sýni í hreint og þurrt petrí-skál og athugaðu útlit sýnisins.Tilkynning: Tilkynntu athugunina
Auðkenning: Berið saman varðveislutíma aðaltoppsins í litskiljun prófunarblöndunnar við varðveislutíma aðaltoppsins í litskiljuninni fyrir kerfishæfisgerð eins og hann fæst í litskiljunarhreinleika með HPLC.
Tap við þurrkun: Þurrkaðu grunna vigtarflösku með glertappa við 105±2 ℃ í 30 mínútur.Leyfðu því að kólna í stofuhita í þurrkara.Vigtaðu vigtarflöskuna með tappa nákvæmlega og skráðu þyngdina (W1).Flyttu um það bil 1 til 2g nákvæmlega vegið magn af prófunarefninu í vigtunarflöskuna.Með því að hrista varlega til hliðar, dreift prófunarsýninu eins jafnt og hægt er á um það bil 5 mm dýpi.Vigtaðu hlaðna vigtarflöskuna og skráðu þyngdina (W2).Settu hlaðna flöskuna í þurrkofninn, fjarlægðu tappann og skildu hana eftir í hólfinu.Þurrkaðu prófunarsýnið við 105±2 ℃ í 3 klukkustundir.Þegar hólfið er opnað skaltu loka flöskunni tafarlaust og leyfa henni að ná stofuhita í þurrkara.Vigtið vigtarflöskuna með tappa nákvæmlega og þyngdið aftur (W3).Reiknaðu prósentutapið við þurrkun sýnisins með því að nota eftirfarandi formúlu:
Útreikningstap við þurrkun (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Innihald handhverfa með HPLC:
Efnaefni og hvarfefni:
n-Hexane AR einkunn
Metanól HPLC einkunn
Ísóprópýlalkóhól HPLC einkunn
Díetýlamín AR einkunn
Staðlar: L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl staðall;L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl handhverfa staðall
Farsímastig: Útbúið einsleita blöndu af n-hexani, ísóprópýlalkóhóli, metanóli og díetýlamíni (65:20:15:0,1 v/v/v/v)
Eyðaundirbúningur: Flytið 2,5 ml af metanóli í 10 ml mæliflösku, þynnið að rúmmáli með hreyfanlegum fasa og blandið saman.
Kerfishæfni undirbúningur:
Vigtið nákvæmlega og flytjið um 5 mg hvor af L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl staðli og L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl handhverfustaðli í 10 ml mæliflösku, leyst upp í um 2,5 ml af metanóli, þynnt að rúmmáli með farsíma fasa og blanda saman.
Próf undirbúningur:
Vegið nákvæmlega og um 5 mg af sýni flutt í 10 mól mæliflösku, leyst upp í um 2,5 ml af metanóli, þynnt að rúmmáli með hreyfanlegum fasa og blandað.
Hljóðfærisbreytur:
Tæki: HPLC með inndælingartæki, dælu, UV skynjara og upptökutæki
Dálkur: ChiralPak-IC (4,6 mm x 250 mm) 5 μ eða samsvarandi
Rennsli: 1,0 ml/mín
Bylgjulengd: 260nm
Inndælingarrúmmál: 10 μL
Dálkhitastig: 25 ℃
Sýningartími: 20 mínútur
Málsmeðferð
Sprautaðu lausnunum eins og getið er um í eftirfarandi röð.Skráðu litskiljunina og staðfestu viðmiðin:
Lýsing á inndælingum Viðmið um fjölda inndælinga
Blank undirbúningur 1 Enginn truflandi toppur ætti að sjást við varðveislutíma L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl eða handhverfu.
Kerfishæfni undirbúningur 1 Upplausn milli L-4-Nítrófenýlalaníns metýlester HCl og handhverfu topps ætti að vera ekki minni en 2,0
Prófundirbúningur 1 Notaðu prófunarskilju til að ákvarða innihald handhverfu í sýninu.
Hlutfallslegur varðveislutími:
L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl 1,0
Handhverfa Um 1.11
Varðveislutími L-4-Nítrófenýlalanín Metýlester HCl er um 9,8 mínútur.
Útreikningur: Í litskiljuninni sem fæst við undirbúning prófunar, hunsa alla toppa búast við L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl og handhverfu.Tilkynntu innihald handhverfu í sýninu eftir svæðisnormalization aðferð.
Litskiljunarhreinleiki og óhreinindi með HPLC:
Efnaefni og hvarfefni:
Díammoníumfosfat AR einkunn
Fosfórsýra AR einkunn
Metanól HPLC einkunn
Hreinsað vatn
Staðlar
L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl staðall
4-nítró-L-fenýlalanín einhýdrat staðall
Mobile Phase-A
Leysið 6,6 g af díammoníumfosfati upp í 1000 ml af hreinsuðu vatni.Stilltu pH þessarar lausnar í 6,0 með fosfórsýru.Sía og afgas.Áður en pH-gildi lausnarinnar er mælt skal kvarða pH-mælirinn með venjulegri jafnalausn pH 4,01 OG 7,00.
Farsíma Fasi-B
Metanól HPLC einkunn
Undirbúningur fyrir hæfi kerfisins
Vigtið nákvæmlega og flytjið um 25 mg hvor um sig af L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl staðli og 4-nítró-L-fenýlalanín einhýdrat staðli í 50 ml mæliflösku, leyst upp í og ​​þynnt að rúmmáli með metanóli og blandað saman.
Prófundirbúningur:
Vegið nákvæmlega og um 25 mg sýni flutt í 50 ml mæliflösku, leyst upp í og ​​þynnt að rúmmáli með metanóli og blandað saman.
Hljóðfærisbreytur:
Tæki: HPLC með inndælingartæki, dælu, UV skynjara og upptökutæki
Dálkur: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 μ eða samsvarandi
Rennsli: 1,0 ml/mín
Bylgjulengd: 265nm
Inndælingarrúmmál: 20 μL
Dálkhitastig: 25 ℃
Sýningartími: 45 mínútur
Stigullunaráætlun
Tími (mín.) Mobile Phase-A % Mobile Phase-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Málsmeðferð:
Sprautaðu lausnunum eins og getið er um í eftirfarandi röð.Skráðu litskiljunina og staðfestu viðmiðin:
Eyðaundirbúningur 1 Enginn truflandi toppur ætti að sjást við varðveislutíma L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl.
Kerfishæfni undirbúningur 1 Hlutastuðull fyrir L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl toppur ætti ekki að vera minni en 2,0
Undirbúningur prófunar 1 Notaðu prófunarskilju til að ákvarða hreinleika og óhreinindi í litskiljun.
Hlutfallslegur varðveislutími:
L-4-nítrófenýlalanín metýlester HCl 1,0 (vistunartími um 11,4 mínútur)
4-Nítró-L-fenýlalanín Um 0,4
Tólúen Um 2,3
Útreikningar:
Í litskiljuninni sem fæst við undirbúning prófunar, eftir núllleiðréttingu, skal hunsa toppinn vegna tólúens.Tilkynntu um hreinleika í litskiljun, 4-nítró-L-fenýlalaníninnihaldi og heildaróhreinindum í sýninu eftir svæðisstillingaraðferð.