Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 prófun (HPLC) 97,0~102,0%

Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
Bensenprópansýra, -(bensóýlamínó)-hýdroxý-, 6,12b-bis(asetýloxý)-12-(bensóýloxý)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dódekahýdró-4,11-díhýdroxý-4a,8,13,13-tetrametýl-5-oxó-7,11-metanó-1H-sýklódeka[3,4]bens[1,2-b]oxet-9-ýl ester, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-dódekahýdró-4,6, 9,11,12,12b-hexahýdroxý-4a,8,13,13-tetrametýl-7,11-metanó-5H-sýklódeka[3,4]-bens[1,2-b]oxet-5-ón 6, 12b-díasetat, 12-bensóat, 9-ester með (2R,3S)-N-bensóýl-3-fenýlísóseríni [33069-62-4].
Paclitaxel inniheldur ekki minna en 97,0 prósent og ekki meira en 102,0 prósent af C47H51NO14, reiknað á vatnsfríum, leysilausum grunni.
[Varúð-Paclitaxel er frumudrepandi.Gæta skal mikillar varúðar til að koma í veg fyrir að ögnum af Paclitaxel sé andað að sér og að húðin verði fyrir því.]
Pökkun og geymsla - Geymið í þéttum, ljósþolnum ílátum og geymið við stýrðan stofuhita.
Merking-Merkingin gefur til kynna hvers konar ferli er notað til að framleiða efnið og prófun tengdra efnasambanda sem efnið uppfyllir.
USP tilvísunarstaðlar <11>-
USP Endotoxin RS
USP Paclitaxel RS Smelltu til að skoða uppbyggingu
USP Paclitaxel Tengt efnasamband A RS
Cephalomannine.
USP Paclitaxel Tengt efnasamband B RS
10-Deasetýl-7-Epipaclitaxel.
USP Paclitaxel Óhreinindablanda RS
Blanda af Paclitaxel og eftirfarandi skyldum efnasamböndum: própýl hliðstæðu, cefalómanníni, sec-bútýl hliðstæðu, n-bútýl hliðstæðum, bensýl hliðstæðum, baccatin VI, pentýl hliðstæðum og 7-epípaclitaxeli.
Auðkenning-
A: Innrautt frásog <197K>.
B: Varðveislutími aðaltoppsins í litskiljun greiningarblöndunnar samsvarar því sem er í litskiljun staðalblöndunnar, eins og fæst í greiningu.
Sérstakur snúningur 781S: á milli 49,0 og 55,0 við 20, reiknaður á vatnsfríum, leysilausum grunni.
Próflausn: 10 mg á ml, í metanóli.
Örverutalningarpróf <61> og próf fyrir tilgreindar örverur <62>-Heildarfjöldi loftháðra örvera fer ekki yfir 100 cfu á g.Það uppfyllir kröfur prófanna fyrir fjarveru Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella tegundir og Escherichia coli.
Endotoxín af bakteríum 85-Það inniheldur ekki meira en 0,4 USP endotoxíneiningar á hvert mg af paklítaxeli.
Vatn, Method Ic <921>: ekki meira en 4,0%.
Leifar við íkveikju <281>: ekki meira en 0,2%.
Þungmálmar, Aðferð II <231>: 0,002%.
Tengd efnasambönd-
próf 1 (fyrir efni merkt sem einangrað frá náttúrulegum uppruna) - Ef efnið er í samræmi við þessa prófun gefur merkingin til kynna að það standist USP tengd efnasambönd Próf 1.
Þynningarefni - Undirbúið samkvæmt leiðbeiningum í prófuninni.
Lausn A-Tilbúið síað og afgasað asetónítríl.
Lausn B-Tilbúið síað og afgasað vatn.
Farsímafasa-Notaðu breytilegar blöndur af lausn A og lausn B eins og mælt er fyrir um fyrir litskiljunarkerfi.Gerðu breytingar ef þörf krefur (sjá Kerfishæfni undir Litskiljun 621).
Lausn sem hæfir kerfi - Leysið upp nákvæmlega vegið magn af USP Paclitaxel tengdu efnasambandi A RS og USP Paclitaxel tengdu efnasambandi B RS í metanóli til að fá lausn sem hefur þekktan styrk sem er um það bil 10 µg af hvoru í hverjum ml.Flyttu 5,0 ml af þessari lausn í 50 ml mæliflösku, þynntu með þynningarefni að rúmmáli og blandaðu saman.
Staðlað lausn - Leysið upp, með hjálp hljóðgjafar, nákvæmlega vegið magn af USP Paclitaxel RS í þynningarefni, og þynnið magnið, og í skrefum ef þörf krefur, með þynningarefni til að fá lausn með þekktan styrk sem er um það bil 5 µg á ml.
Próflausn - Notaðu prófunarundirbúninginn.
Litskiljunarkerfi (sjá Litskiljun <621>) - Vökvaskiljunin er búin 227 nm skynjara og 4,6 mm × 25 cm súlu sem inniheldur 5 µm pakkningu L43.Rennslishraði er um 2,6 ml á mínútu.Súluhitanum er haldið við 30°C. Litskiljan er forrituð sem hér segir.
Tími (mínútur) Lausn A (%) Lausn B (%) Skolun
0–35 35 65 ísókratískt
35–60 35®80 65®20 línulegur halli
60–70 80®35 20®65 línulegur halli
70–80 35 65 isocraticChromatograph the System suitability solution og skráðu hámarkssvörun eins og mælt er fyrir um í Aðferð: Hlutfallslegur varðveislutími er um 0,78 fyrir paklitaxeltengt efnasamband A og 0,86 fyrir paklitaxeltengt efnasamband B (miðað við varðveislutíma paklitaxels sem fæst frá próflausnin);og upplausnin, R, milli paklitaxeltengts efnasambands A og paklitaxeltengts efnasambands B er ekki minni en 1,0.Litskiljaðu stöðluðu lausnina og skráðu hámarkssvörun eins og mælt er fyrir um í aðferð: hlutfallslegt staðalfrávik fyrir endurteknar inndælingar er ekki meira en 2,0%.
Aðferð - Sprautaðu rúmmáli (um 15 µL) af próflausninni í litskiljuna, skráðu litskiljuna og mældu svæðin fyrir helstu toppana.Reiknaðu hlutfall hvers óhreininda í skammtinum af Paclitaxel sem tekinn er með formúlunni:
100 (fös/rU)
þar sem F er hlutfallslegur svörunarstuðull fyrir hvern óhreinindatopp (sjá töflu 1 fyrir gildi);ri er toppsvæðið fyrir hvern einstakan óhreinleika;og rU er toppsvæðið fyrir paklítaxel.
Tafla 1
Hlutfallslegur varðveislutími Hlutfallslegur svörunarstuðull (F) Nafntakmark (%)
0,24 1,29 Baccatin III 0,2
0,53 1,00 10-Deasetýlpaklítaxel 0,5
0,57 1,00 7-Xýlósýlpaklítaxel 0,2
0,78 1,26 Cephalomannine (Paclitaxel tengt efnasamband A) a11
0,78 1,26 2'',3''-Dihydrocephalomannine a21
0,86 1,00 10-Deasetýl-7-epípalítaxel (Paclitaxel tengt efnasamband B) 0,5
1,10 1,00 Bensýl hliðstæða3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Dehydropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicephalomannine 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Upplausn getur verið ófullnægjandi fyrir þessa toppa, allt eftir hlutfallslegu magni sem er til staðar;summan af a1 og a2 er ekki meiri en 0,5%.
2 Upplausn getur verið ófullnægjandi fyrir þessa toppa, allt eftir hlutfallslegu magni sem er til staðar;summan af b1 og b2 er ekki meiri en 0,5%.
3 Eftirfarandi efnaheiti er tengt við tengda efnasambandið, bensýl hliðstæða: Baccatin III 13-ester með (2R,3S)-2-hýdroxý-3-fenýl-3-(2-fenýlasetýlamínó)própansýru.
Auk þess að fara ekki yfir mörkin fyrir paklítaxel tengd óhreinindi í töflu 1, finnst ekki meira en 0,1% af einhverju öðru staku óhreinindum;og ekki finnast meira en 2,0% af heildar óhreinindum.
próf 2 (fyrir efni merkt sem framleitt með hálfgerviferli)— Ef efnið uppfyllir þessa prófun gefur merkingin til kynna að það standist USP tengd efnasambönd Próf 2.
Þynningarefni - Notaðu asetónítríl.
Lausn A-Notaðu síaða og afgasaða blöndu af vatni og asetónítríl (3:2).
Lausn B-Notaðu síað og afgasað asetónítríl.
Farsímafasa-Notaðu breytilegar blöndur af lausn A og lausn B eins og mælt er fyrir um fyrir litskiljunarkerfi.Gerðu breytingar ef þörf krefur (sjá Kerfishæfni undir Litskiljun 621).
Lausn sem hentar fyrir kerfi - Leysið upp nákvæmlega vegið magn af USP Paclitaxel RS og USP Paclitaxel tengdu efnasambandi B RS í þynningarefni, hristið og hljóðbeitt ef nauðsyn krefur, til að fá lausn sem hefur þekktan styrk sem er um það bil 0,96 mg og 0,008 mg á mL, í sömu röð.
Prófunarlausn - Flyttu um 10 mg af paklítaxeli, nákvæmlega vegið, í 10 ml mæliflösku, leyst upp í og ​​þynnt með þynningarefni upp að rúmmáli, hrist og hljóðbeitt ef þörf krefur og blandað.
Litskiljunarkerfi (sjá litskiljun 621)— Vökvaskiljunin er búin 227 nm skynjara og 4,6 mm × 15 cm súlu sem inniheldur 3 µm pakkningu L1.Rennslishraði er um 1,2 ml á mínútu.Súluhitanum er haldið við 35°C. Litskiljan er forrituð sem hér segir.
Tími (mínútur) Lausn A (%) Lausn B (%) Skolun
0-20 100 0 ísókratískt
20-60 100®10 0®90 línulegur halli
60-62 10®100 90®0 línulegur halli
62-70 100 0 ísókratísktKromatografið kerfishæfnilausnina og skráið hámarkssvörun eins og mælt er fyrir um í Aðferð: Hlutfallslegur varðveislutími er um 0,94 fyrir paklítaxeltengt efnasamband B og 1,0 fyrir paklítaxel;upplausnin, R, á milli paklitaxeltengts efnasambands B og paclitaxels er ekki minni en 1,2;og hlutfallslegt staðalfrávik fyrir endurteknar inndælingar er ekki meira en 2,0%.
Aðferð - Sprautaðu jöfnu rúmmáli (um 15 µL) af þynningarlausninni og prófunarlausninni aðskilið í litskiljuna, skráðu litskiljunina og mældu svæðin fyrir alla toppana.Hunsa alla toppa vegna þynningarefnisins.Reiknaðu hlutfall hvers óhreininda í skammtinum af Paclitaxel sem tekinn er með formúlunni:
100 (fös / kr)
þar sem F er hlutfallslegur svörunarstuðull fyrir hvert óhreinindi (sjá töflu 2 fyrir gildi);ri er toppflatarmál fyrir hvert óhreinindi sem fæst úr prófunarlausninni;og rs er summan af flatarmáli allra toppa sem fást úr prófunarlausninni.
Tafla 2
Hlutfallslegur varðveislutími Hlutfallslegur svörunarstuðull (F) Nafntakmark (%)
0,11 1,24 10-Deasetýlbaccatin III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Ljósnedbrjótandi2 0,1
0,47 1,00 10-Deasetýlpaklítaxel 0,5
0,80 1,00 2-debensóýlpaklítaxel-2-pentenóat 0,7
0,921 1,00 Oxetan hringur opnaður, asetýl og bensóýl flutt 2 x1
0,921 1,00 10-Asetóasetýlpaklítaxel x2
0,941 1,00 10-Deasetýl-7-epípakítaxel (Paclitaxel tengt efnasamband B) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-asetýlpaklítaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatin III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 Upplausn getur verið ófullnægjandi fyrir þessa toppa, allt eftir hlutfallslegu magni sem er til staðar;summan af x1, x2 og x3 er ekki meiri en 0,4%.
2 Eftirfarandi efnaheiti eru úthlutað tengdum efnasamböndum Ljósniðurbrotsefni;Oxetan hringur opnaður, asetýl og bensóýl fluttu;og 10,13-bissidechainpaclitaxel:
Ljósniðurbrotsefni
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-díasetýloxý-5,13-díhýdroxý-4,16,17,17-tetrametýl-8-oxa- 3-oxó-12-fenýlkarbónýloxýpentasýkló[11.3.1.01,11.04,11.07,10]heptadec-15-ýl
(2R,3S)-2-hýdroxý-3-fenýl-3-(fenýlkarbónýlamínó)própanóat
Oxetan hringur opnaðist, asetýl og bensóýl fluttu
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-díasetýloxý-1,2,4,7-tetrahýdroxý-8,12,15,15-tetrametýl-9-oxó- 4-(fenýlkarbónýloxýmetýl)trísýkló[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-ýl
(2R,3S)-2-hýdroxý-3-fenýl-3-(fenýlkarbónýlamínó)própanóat
10,13-Bissidechain paclitaxel
Baccatin III 13-ester með (2R,3S)-2-hýdroxý-3-fenýl-3-(fenýlkarbónýlamínó)própansýru, 10-ester með (2S,3S)-2-hýdroxý-3-fenýl-3-(fenýlkarbónýlamínó) )própansýra
Auk þess að fara ekki yfir mörkin fyrir paklítaxel tengd óhreinindi í töflu 2, finnst ekki meira en 0,1% af öðru einstöku óhreinindum;og ekki finnast meira en 2,0% af heildar óhreinindum.
próf 3 (fyrir efni merkt sem framleitt með gerjunarferli plöntufrumu)— Ef efnið uppfyllir þessa prófun gefur merkingin til kynna að það uppfylli USP tengd efnasambönd Próf 3.
Lausn A-Tilbúið síaða og afgasaða blöndu af vatni og asetónítríl (3:2).
Lausn B-Tilbúið síað og afgasað asetónítríl.
Farsímafasa-Notaðu breytilegar blöndur af lausn A og lausn B eins og mælt er fyrir um fyrir litskiljunarkerfi.Gerðu breytingar ef þörf krefur (sjá Kerfishæfni undir Litskiljun 621).
Lausn sem hæfir kerfi - Leysið USP Paclitaxel Impurity Mixture RS upp í asetónítríl, hljóðgjafa ef nauðsyn krefur, til að fá lausn með þekktan styrk sem er um það bil 1 mg á ml.
Stöðluð lausn - Leysið upp nákvæmlega vegið magn af USP Paclitaxel RS í asetónítríl, hljóðbeitt ef nauðsyn krefur, til að fá lausn með þekktan styrk sem er um það bil 1 mg á mL.
Prófunarlausn - Flyttu um 10 mg af Paclitaxeli, nákvæmlega vegið, í 10 ml mæliflösku.Leysið upp í og ​​þynnt með asetónítríl upp að rúmmáli, hljóðbeitt ef þörf krefur og blandað saman.
Litskiljunarkerfi (sjá litskiljun 621)— Vökvaskiljunin er búin 227 nm skynjara og 4,6 mm × 15 cm súlu sem inniheldur 3 µm pakkningu L1.Rennslishraði er um 1,2 ml á mínútu.Litskiljan er forrituð sem hér segir.
Tími (mínútur) Lausn A (%) Lausn B (%) Skolun
0-28 100 0 ísókratískt
28-33 100®98 0®2 línulegur halli
33–58 98®10 2®90 línulegur halli
58-60 10 90 ísókratískt
60-63 10®100 90®0 línulegur halli
63-70 100 0 ísókratísktKrómatógrafið kerfishæfnilausnina og skráið hámarkssvörun eins og mælt er fyrir um í Aðferð: upplausnin, R, milli paklítaxels og bensýlhliðstæðu er ekki minni en 1,8.Litskiljaðu stöðluðu lausnina og skráðu hámarkssvörun eins og mælt er fyrir um í aðferð: hlutfallslegt staðalfrávik fyrir endurteknar inndælingar er ekki meira en 2,0%.[athugið—Í þeim tilgangi að bera kennsl á hámark er áætluð hlutfallslegur varðveislutími gefinn upp í töflu 3. Hlutfallslegur varðveislutími er mældur miðað við Paclitaxel.]
Tafla 3
Nafn hlutfallslegt varðveislutakmark (%)
Própýl hliðstæða1 0,54 0,2
Cephalomannine (Paclitaxel tengt efnasamband A) 0,76 0,5
sek-bútýl hliðstæða2 0,81 0,2
n-bútýl hliðstæða3 0,89 0,1
Bensýl hliðstæða 1,10 0,4
Baccatin VI 1,23 0,2
Pentýl hliðstæða4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Eftirfarandi efnaheiti er úthlutað tengdu efnasambandinu Própýl hliðstæða: Baccatin III 13-ester með (2R,3S)-3-bútanóýlamínó-2-hýdroxý-3-fenýlprópansýru.
2 Eftirfarandi efnaheiti er úthlutað tengdu efnasambandinu sec-Butyl hliðstæða: Baccatin III 13-ester með (2R,3S)-2-hýdroxý-3-(2-metýlbútanóýlamínó)-3-fenýlprópansýru.
3 Eftirfarandi efnaheiti er úthlutað tengdu efnasambandinu n-bútýl hliðstæðu: Baccatin III 13-ester með (2S,3S)-2-hýdroxý-3-(pentanóýlamínó)-3-fenýlprópansýru.
4 Eftirfarandi efnaheiti er úthlutað tengdu efnasambandinu Pentyl hliðstæðu: Baccatin III 13-ester með (2R,3S)-3-(hexanóýlamínó)-2-hýdroxý-3-fenýlprópansýru.
Aðferð-Sprautaðu rúmmáli (um 12 µL) af próflausninni í litskiljuna, skráðu litskiljuna og mældu svæðin fyrir alla toppana.Reiknaðu hlutfall hvers óhreininda í skammtinum af Paclitaxel sem tekinn er með formúlunni:
100(ri/rU)
þar sem ri er viðbrögð hvers einstaks óhreininda;og rU er summan af flatarmáli allra toppa sem fást úr prófunarlausninni.Auk þess að fara ekki yfir mörkin fyrir paklítaxel tengd óhreinindi í töflu 3, finnst ekki meira en 0,1% af öðru einstöku óhreinindum;og ekki finnast meira en 2,0% af heildar óhreinindum.
Próf-
Þynningarefni-Tilbúið blöndu af metanóli og ediksýru (200:1).
Hreyfanlegur fasi-Tilbúið síaða og afgasaða blöndu af vatni og asetónítríl (11:9).Gerðu breytingar ef þörf krefur (sjá Kerfishæfni undir Litskiljun 621).
Hefðbundin undirbúningur - Leysið upp, með því að nota hljóðgjafa ef nauðsyn krefur, nákvæmlega vegið magn af USP Paclitaxel RS í þynningarefni og þynnið magnið, og í skrefum ef nauðsyn krefur, með þynningarefni til að fá lausn með þekktan styrk sem er um það bil 1 mg á ml.
Undirbúningur greiningar - Flyttu um 10 mg af paklitaxeli, nákvæmlega vegið, í 10 ml mæliflösku.Leysið upp í þynningarefni, notaðu hljóðgjafa ef nauðsyn krefur, þynntu með þynningarefni að rúmmáli og blandaðu saman.
Litskiljunarkerfi (sjá Litskiljun <621>) - Vökvaskiljunin er búin 227 nm skynjara og 4,6 mm × 25 cm súlu sem inniheldur 5 µm pakkningu L43.Rennslishraði er um 1,5 ml á mínútu.Litskiljaðu staðlaða undirbúninginn og skráðu hámarkssvörun eins og mælt er fyrir um í aðferð: skottstuðullinn er á milli 0,7 og 1,3;og hlutfallslegt staðalfrávik fyrir endurteknar inndælingar er ekki meira en 1,5%.
Aðferð - Dælið jöfnu rúmmáli (um 10 µL) af staðalblöndunni og prófunarblöndunni sérstaklega inn í litskiljuna, skráið litskiljunina og mælið svæðin fyrir helstu toppana.Reiknaðu magnið, í mg, af C47H51NO14 í skammtinum af Paclitaxeli sem tekinn er með formúlunni:
10C(rU / rS)
þar sem C er styrkur, í mg á mL, af USP Paclitaxel RS í stöðluðu blöndunni;og rU og rS eru hámarkssvörun fyrir paklítaxel sem fæst úr prófunarblöndunni og staðalblöndunni, í sömu röð.