Ursodeoxycholic Acid (UDCA) CAS 128-13-2 prófun 99,0~101,0%

URSODEOXYCHOLIC SÝRA
C24H40O4 Mr 392,6[128-13-2]
SKILGREINING
3α,7β-díhýdroxý-5β-kólan-24-ósýra.
Innihald: 99,0 prósent til 101,0 prósent (þurrkað efni).
STEFNIR
Útlit: hvítt eða næstum hvítt duft.
Leysni: nánast óleysanlegt í vatni, óleysanlegt í etanóli (96 prósent), örlítið leysanlegt í asetoni, nánast óleysanlegt í metýlenklóríði.
mp: um 202 ℃.
AÐSKIPTI
Fyrsta auðkenni: A.
Önnur auðkenni: B, C.
A. Innrauð frásog litrófsmæling (2.2.24).
Samanburður: Ursodeoxycholic Acid CRS.
B. Skoðaðu litskiljunina sem fengust í prófuninni með tilliti til óhreininda C.
Niðurstöður: Aðalbletturinn í litskiljunni sem fæst með prófunarlausn (b) er svipaður að staðsetningu, lit og stærð og aðalbletturinn í litskiljunni sem fæst með viðmiðunarlausn (a).
C. Leysið upp um 10 mg í 1 ml af brennisteinssýru R. Bætið við 0,1 ml af formaldehýðlausn R og látið standa í 5 mín.Bætið við 5 ml af vatni R. Sviflausnin sem fæst er grænblá.
PRÓF
Sérstakur ljóssnúningur (2.2.7): + 58,0 til + 62,0 (þurrkað efni).
Leysið 0,500 g upp í vatnsfríu etanóli R og þynnt í 25,0 ml með sama leysi.
Óhreinindi C. Þunnlagsskiljun (2.2.27).
Leysiblanda: vatn R, asetón R (10:90 V/V).
Próflausn (a).Leysið upp 0,40 g af efninu sem á að skoða í leysiblöndunni og þynnt í 10 ml með leysiefnablöndunni.
Próflausn (b).Þynnið 1 mL af próflausn (a) í 10 mL með leysiblöndunni.
Viðmiðunarlausn (a).Leysið 40 mg af ursodeoxycholic acid CRS upp í leysiblöndunni og þynnið í 10 ml með leysiblöndunni.
Viðmiðunarlausn (b).Leysið upp 20 mg af litókólsýru CRS (óhreinindi C) í leysiblöndunni og þynnt í 10,0 ml með leysiblöndunni (lausn A).Þynntu 2,0 ml af þessari lausn í 100,0 ml með leysiblöndunni.
Viðmiðunarlausn (c).Í 5 mL af lausn A er bætt 10 mg af chenódeoxýkólínsýru CRS (óhreinindi A) og þynnt í 50 mL með leysiblöndunni.
Plata: TLC kísilgel plata R.
Hreyfanlegur fasi: ísediksýra R, asetón R, metýlenklóríð R (1:30:60 V/V/V).
Notkun: 5μL.
Þróun: yfir 2/3 af plötunni.
Þurrkun: við 120 ℃ í 10 mín.
Greining: úðaðu strax með 47,6 g/L lausn af fosfómólýbdínsýru R í blöndu af 1 rúmmáli af brennisteinssýru R og 20 rúmmálum af ísediksýru R og hitaðu við 120 ℃ þar til bláir blettir birtast á ljósari bakgrunni.
Kerfishæfi: viðmiðunarlausn (c):
- litskiljunin sýnir 2 greinilega aðskilda aðalbletti.
Takmörk: próflausn (a):
-óhreinindi C: hvaða blettur sem stafar af óhreinindum C er ekki sterkari en aðalbletturinn í litskiljuninni sem fæst með viðmiðunarlausn (b) (0,1 prósent).
Tengd efni.Vökvaskiljun (2.2.29).
Leysiblanda: metanól R, hreyfanlegur fasi (10:90 V/V).
Próflausn.Leysið 60 mg af efninu sem á að rannsaka í leysiblöndunni og þynnt í 20,0 ml með leysiblöndunni.
Viðmiðunarlausn (a).Leysið upp innihald hettuglass með Ursodeoxycholic Acid fyrir CRS (sem inniheldur óhreinindi A og H) í 1,0 ml af leysiblöndunni.
Viðmiðunarlausn (b).Þynntu 1,0 ml af próflausninni í 100,0 ml með leysiblöndunni.Þynntu 1,0 ml af þessari lausn í 10,0 ml með leysiblöndunni.
Dálkur:
-stærð: l = 0,25 m, Ø = 4,6 mm;
-Kyrrstöðufasi: endalokaður octadecylsilyl kísilgel fyrirlitskiljun R (5 μm);
- Hitastig: 40℃ ± 1℃.
Hreyfanlegur fasi: blandið 30 rúmmálum af asetónítríl R, 37 rúmmálum af 0,78 g/L lausn af natríum tvívetnisfosfati R stillt á pH 3 með fosfórsýru R og 40 rúmmálum af metanóli R.
Rennsli: 0,8 ml/mín.
Greining: ljósbrotsmælir við 35 ± 1 ℃.
Inndæling: 150 μL.
Keyrslutími: 4 sinnum varðveislutími Ursodeoxycholic Acid.
Auðkenning óhreininda: notaðu litskiljuna sem fylgir með ursodeoxycholic sýru fyrir CRS kerfishæfni og litskiljuna sem fæst með viðmiðunarlausn (a) til að bera kennsl á toppa vegna óhreininda A og H.
Hlutfallsleg varðveisla með vísan til ursodeoxycholic sýru (viðhaldstími = um 14 mín): óhreinindi H = um 0,9;óhreinindi A = um 2,8.
Kerfishæfi: viðmiðunarlausn (a):
-upplausn: lágmark 1,5 á milli toppa vegna óhreininda H og ursodeoxycholic sýru.
Takmörk:
- óhreinindi A: ekki meira en 10 sinnum flatarmál aðaltoppsins í litskiljuninni sem fæst með viðmiðunarlausn (b) (1,0 prósent);
-ótilgreind óhreinindi: fyrir hvert óhreinindi, ekki meira en flatarmál aðaltoppsins í litskiljuninni sem fæst með viðmiðunarlausn (b) (0,10 prósent);
- samtals: ekki meira en 15 sinnum flatarmál aðaltoppsins í litskiljuninni sem fæst með viðmiðunarlausn (b) (1,5 prósent);
- Hunsa mörk: 0,5 sinnum flatarmál aðaltoppsins í litskiljuninni sem fæst með viðmiðunarlausn (b) (0,05 prósent).
Þungmálmar (2.4.8): hámark 20 ppm.
1,0 g er í samræmi við próf C. Undirbúið viðmiðunarlausnina með því að nota 2 ml af blý staðallausn (10 ppm Pb) R.
Tap við þurrkun (2.2.32): hámark 1,0 prósent, ákvarðað á 1.000 g með þurrkun í ofni við 105 ℃.
Súlfataska (2.4.14): hámark 0,1 prósent, ákvarðað á 1,0 g.
RANNSÓKN
Leysið 0,350 g upp í 50 ml af etanóli (96 prósent) R, áður hlutlaust í 0,2 ml af fenólftaleínlausn R. Bætið við 50 ml af vatni R og títrið með 0,1 M natríumhýdroxíði þar til bleikur litur fæst.
1 ml af 0,1 M natríumhýdroxíði jafngildir 39,26 mg af C24H40O4.
Óhreinindi
Tilgreind óhreinindi: A, C.
Önnur greinanleg óhreinindi (eftirfarandi efni myndu, ef þau eru til staðar í nægilegu magni, greinast með einni eða annarri af prófunum í einfræðiritinu. Þau eru takmörkuð af almennu samþykkisviðmiðinu fyrir önnur/ótilgreind óhreinindi og/eða af almennu eintakinu Efni til lyfjanotkunar (2034). Það er því ekki nauðsynlegt að bera kennsl á þessi óhreinindi til að sýna fram á samræmi. Sjá einnig 5.10.
Eftirlit með óhreinindum í efnum til lyfjanotkunar): B, D, E, F, G, H, I.
A. 3α,7α-díhýdroxý-5β-kólan-24-ósýru (chenódeoxýkólínsýra),
B. 3α,7α,12α-tríhýdroxý-5β-kólan-24-ósýra (kólínsýra),
C. 3α-hýdroxý-5β-kólan-24-ósýra (litókólsýra),
D. 3α,7β,12α-tríhýdroxý-5β-kólan-24-ósýru (úrsókólsýra),
E. 3α,12α-díhýdroxý-5β-kólan-24-ósýru (deoxýkólínsýra),
F. 3α-hýdroxý-7-oxó-5β-kólan-24-ósýru,
G. metýl 3α,7β-díhýdroxý-5β-kólan-24-óat,
H. 3β,7β-díhýdroxý-5β-kólan-24-ósýru,
I. 5β-kólan-3α,7β,24-tríól.