Purezza 98,0~101,5% della droga di perdita di peso dell'api di Orlistat CAS 96829-58-2

Orlistat
C29H53NO5 495,73
l-Leucina, N-formil-, 1-[(3-esil-4-osso-2-ossotanil)metil]dodecil estere, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-formil-l-leucina, estere con (3S,4S)-3-esil-4-[(2S)-2-idrossitridecil]-2-oxetanone [96829-58-2].
DEFINIZIONE
Orlistat contiene NLT 98,0% e NMT 101,5% di C29H53NO5, calcolato su base anidra, senza solventi.
IDENTIFICAZIONE
• A. Assorbimento infrarosso <197M>
• B. Il tempo di ritenzione del picco maggiore della soluzione campione corrisponde a quello della soluzione standard, come ottenuto nel test.
SAGGIO
• Procedura
[Nota-Evitare l'uso di matracci di plastica per la preparazione o il contenimento di qualsiasi soluzione in questa analisi.]
Fase mobile: acetonitrile, acido fosforico e acqua (860: 0,05: 140)
Soluzione standard: 0,5 mg/mL di USP Orlistat RS in fase mobile.Iniettare immediatamente dopo la preparazione o conservare a 5.
Soluzione campione: 0,5 mg/mL di Orlistat in fase mobile.Iniettare immediatamente dopo la preparazione o conservare a 5.
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia <621>, Idoneità del sistema.)
Modalità: LC
Rivelatore: UV 195
Colonna: 3,9 mm × 15 cm;Confezione da 4 µm L1
Portata: 1,0 ml/min
Dimensione dell'iniezione: 20 µ l
Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
Requisiti di idoneità
Deviazione standard relativa: NMT 2,0%
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale di orlistat (C29H53NO5) nella porzione di orlistat prelevata:
Risultato = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = risposta di picco dalla soluzione campione
rS = risposta di picco dalla soluzione standard
CS = concentrazione di USP Orlistat RS nella soluzione standard (mg/mL)
CU = concentrazione di Orlistat nella soluzione campione (mg/mL)
Criteri di accettazione: 98,0%-101,5% su base anidra, senza solventi
IMPURITÀ
Impurità inorganiche
• Residuo all'accensione <281>: NMT 0,1%
• Metalli pesanti, Metodo II <231>: 20 ppm
Impurità organiche
• Procedura 1: Limite del composto correlato all'Orlistat A
Soluzione standard: 0,1 mg/mL di USP Orlistat Related Compound A RS in acetone
Soluzione del campione: 50 mg/mL di Orlistat in acetone
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia <621>, Cromatografia su strato sottile.)
Modalità: TLC
Adsorbente: strato di 0,25 mm di miscela di gel di silice cromatografica
Volume di applicazione: 10 µl
Sistema solvente di sviluppo: toluene e acetato di etile (4:1)
Soluzione di rilevamento: trasferire 2,5 g di acido fosfomolibdico e 1 g di solfato cerico in un matraccio tarato da 100 mL, dissolvere e diluire con metanolo fino a volume.
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Rimuovere la piastra e asciugarla accuratamente all'aria.Spruzzare la piastra essiccata con la soluzione di rilevamento e posizionare la piastra in un forno a 120 per 30 min.
Criteri di accettazione: qualsiasi punto secondario della soluzione campione corrispondente al composto A correlato a orlistat non è più intenso del punto corrispondente della soluzione standard (0,2%).
• Procedura 2: Limite del composto correlato all'Orlistat B
Soluzione standard: 0,025 mg/mL di USP Orlistat Related Compound B RS in cloruro di metilene
Soluzione del campione: 50 mg/mL di Orlistat in cloruro di metilene
Soluzione campione addizionata: 50 mg/mL di Orlistat in soluzione standard
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia <621>, Idoneità del sistema.)
Modalità: GC
Rivelatore: Ionizzazione di fiamma
Colonna: silice fusa da 0,32 mm x 30 m, rivestita con una fase stazionaria G27 da 0,25 µm
Temperatura della colonna: vedere la tabella del programma di temperatura riportata di seguito.
Temperatura iniziale () Rampa di temperatura (/min) Temperatura finale () Tempo di mantenimento alla temperatura finale (min)
50 4 170 -
170 30 300 30
Temperatura
Iniettore: 270
Rivelatore: 280
Gas di trasporto: elio
Portata: 30 ml/min
Rapporto di divisione: 10:1
Dimensione dell'iniezione: 2 µ l
Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
Requisiti di idoneità
Deviazione standard relativa: NMT 10,0%
Analisi
Campioni: soluzione campione e soluzione campione addizionata
Calcolare la percentuale di composto B correlato a orlistat nella porzione di Orlistat presa:
Risultato = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = risposta di picco del composto B correlato all'orlistat dalla soluzione campione
rSP = risposta di picco del composto B correlato all'orlistat dalla soluzione del campione arricchito
CS = concentrazione di USP Orlistat Related Compound B RS nella soluzione standard (mg/mL)
CT = concentrazione di Orlistat nella soluzione campione addizionata (mg/mL)
Criteri di accettazione: si trova NMT 0,05% del composto B correlato a orlistat.
• Procedura 3
[Nota-Evitare l'uso di matracci di plastica per la preparazione o il contenimento di qualsiasi soluzione in questa analisi.]
Fase mobile, soluzione standard e soluzione campione: preparare come indicato nel test.
Soluzione di idoneità del sistema: 10 µg/mL di USP Orlistat RS, 0,1 µg/mL di USP Orlistat Related Compound C RS e 0,25 µg/mL di USP Orlistat Related Compound D RS in fase mobile
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia <621>, Idoneità del sistema.)
Procedere come indicato nel dosaggio, tranne che per cromatografare la soluzione di idoneità del sistema.
Idoneità del sistema
Esempio: soluzione di idoneità del sistema
Requisiti di idoneità
Rapporto segnale-rumore: NLT 3 per i picchi del composto C correlato a orlistat e del composto D correlato a orlistat
Deviazione standard relativa: NMT 10,0% per il picco orlistat
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale di ciascuna impurità nella porzione di Orlistat prelevata:
Risultato = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = risposta di picco per ogni singola impurità dalla soluzione campione
rS = risposta di picco dell'USP Orlistat RS dalla soluzione standard
CS = concentrazione di USP Orlistat RS nella soluzione standard (mg/mL)
CU = concentrazione di Orlistat nella soluzione campione (mg/mL)
F = fattore di risposta relativo come indicato nella tabella delle impurità 1
Criteri di accettazione: vedere la tabella delle impurità 1.
Impurità Tabella 1
Nome Tempo di ritenzione relativo Fattore di risposta relativo Criteri di accettazione, NMT (%)
Formilleucina 0,10 4,0 0,2
Composto correlato all'orlistat C 0,13 33 0,05
Orlistat epimerb ad anello aperto 0,44 1,0 0,2
Composto correlato all'Orlistat D* 0,90 - Calcolato in
Procedura 4
Orlistat anello aperto amidec* 0,90 - Calcolato in
Procedura 4
Orlistat 1.00 - -
d-Leucina orlistatd 1,18 1,0 0,2
Impurità individuale non identificata - 1,0 0,1
* Coeluti in questo sistema LC, determinati utilizzando la Procedura 4.
una N-Formil-l-leucina.
Acido b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-Formilammino-4-metil-pentanoilossi]-2-esil-3-idrossi-esadecanoico.
c N-Formil-l-leucina (S)-1-[(2S,3S)-2-idrossi-3-[1-fenil-R-etilcarbomoil]nonil]-dodecil estere.
d N-Formil-d-leucina (S)-1-[[(2S,3S)-3-esil-4-osso-2-ossotanil]metil]dodecil estere o enantiomero.
• Procedura 4: Limite del composto correlato all'Orlistat D
Fase mobile: metanolo e acqua (83:17)
Soluzione di idoneità del sistema: 4 mg/mL di USP Orlistat RS e 2,4 µg/mL di USP Orlistat Related Compound D RS in acetonitrile, rispettivamente
Soluzione standard: 5,0 mg/mL di USP Orlistat RS in acetonitrile
Soluzione del campione: 5,0 mg/mL di Orlistat in acetonitrile
Sistema cromatografico
(Vedi Cromatografia 621, Idoneità del sistema.)
Modalità: LC
Rivelatore: 205 nm
Colonna: 4,0 mm × 25 cm;Confezione da 5 µm L7
Portata: 0,6 ml/min
Dimensione dell'iniezione: 20 µ l
Idoneità del sistema
Esempio: soluzione di idoneità del sistema
Requisiti di idoneità
Rapporto segnale-rumore: NLT 3 per il picco D del composto correlato a orlistat
Deviazione standard relativa: NMT 10,0% per il picco orlistat
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale di ciascuna impurità nella porzione di Orlistat prelevata:
Risultato = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = risposta di picco per ogni singola impurità dalla soluzione campione
rS = risposta di picco per USP Orlistat RS dalla soluzione standard
CS = concentrazione di USP Orlistat RS nella soluzione standard (µg/mL)
CU = concentrazione di Orlistat nella soluzione campione (µg/mL)
F = fattore di risposta relativo come ottenuto nella tabella delle impurità 2
Criteri di accettazione: vedere la tabella 2 delle impurità.
Impurità Tabella 2
Nome Tempo di ritenzione relativo Fattore di risposta relativo Criteri di accettazione, NMT (%)
Composto correlato all'Orlistat D 0,94 1,0 0,2
Orlistat 1.00 - -
Orlistat ad anello aperto amidea 1,25 4,3 0,1
un N-Formil-l-leucina (S)-1-[(2S,3S)-2-idrossi-3-[1-fenil-R-etilcarbomoil]nonil]-dodecil estere.
• Procedura 5: Limite del composto correlato all'Orlistat E
Tampone: soluzione di borato 0,4 N, regolata a un pH di 10,2
Agente derivatizzante: soluzione di o-ftaldeide (OPA).[Nota: se non è possibile ottenere commercialmente, l'agente derivatizzante può essere preparato come 1% ciascuno di acido 3-mercaptopropionico e o-ftaldialdeide in soluzione tampone borato 0,4 M.]
Soluzione A: trasferire 4,1 g di sodio acetato triidrato e 40 mg di acido etilendiamminotetraacetico (EDTA) in un matraccio tarato da 1 litro.Sciogliere in 950 mL di acqua e regolare con idrossido di sodio 0,1 N a un pH di 7,2.Diluire con acqua fino a volume, aggiungere 2,5 mL di tetraidrofurano e mescolare.Filtrare e degasare.
Soluzione B: trasferire 2,7 g di sodio acetato triidrato e 40 mg di EDTA in un matraccio tarato da 1 litro.Sciogliere in 200 mL di acqua e regolare con idrossido di sodio 0,1 N a un pH di 7,2.Aggiungere 800 mL di acetonitrile, filtrare e degasare.
Fase mobile: vedere la tabella dei gradienti di seguito.
Tempo (min) Soluzione A (%) Soluzione B (%)
0 96,7 3,3
20 60 40
24 0 100
380100
38 96,7 3,3
45 96,7 3,3
Soluzione standard: trasferire una quantità pesata di circa 0,2 mg di USP Orlistat Related compound E RS in una fiala con spazio di testa da 20 mL.Aggiungere 10 mL di idrossido di sodio 4 N e chiudere la fiala.Riscaldare la fiala a 100 per 1 h, quindi lasciare raffreddare a temperatura ambiente.Trasferire 2 mL della soluzione risultante in un matraccio tarato da 50 mL e diluire con acqua fino a volume.A 0,5 ml di questa soluzione aggiungere 2,0 ml di tampone e 0,5 ml di agente derivatizzante.
Soluzione campione: procedere come indicato per la soluzione standard, ma utilizzare invece 25 mg di Orlistat per sostituire 0,2 mg di USP Orlistat Related Compound E RS.
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia <621>, Idoneità del sistema.)
Modalità: LC
Rivelatore: Fluorescenza 340 nm (eccitazione);450 nm (emissione)
Colonne
Protezione: 2,1 mm × 2 cm;Confezione da 50 µm L1
Analitica: 2,1 mm × 20 cm;imballaggio L1
Portata: 0,5 ml/min
Dimensione dell'iniezione: 20 µ l
Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
Requisiti di idoneità
Deviazione standard relativa: NMT 6,0% per il picco E del composto correlato a orlistat
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcola la percentuale di questa impurità nella porzione di Orlistat presa:
Risultato = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = risposta di picco per il composto E correlato a orlistat nella soluzione campione
rS = risposta di picco per USP Orlistat Related Compound E RS nella soluzione standard
CS = concentrazione di USP Orlistat Related Compound E RS nella soluzione standard (mg/mL)
CU = concentrazione di Orlistat nella soluzione campione (mg/mL)
Criteri di accettazione
Impurità individuale: si trova NMT 0,2% del composto E correlato a orlistat.
Impurezze totali: NMT 1,0% delle impurezze totali viene trovato, i risultati per le procedure 1, 2, 3, 4 e 5 vengono aggiunti.
PROVE SPECIFICHE
• Rotazione ottica, rotazione specifica <781>
Soluzione del campione: 30 mg/mL in alcool disidratato
Criteri di accettazione: tra -48,0 e -51,0, a 20
• Determinazione dell'acqua, metodo Ic <921>: NMT 0,2%
REQUISITI ADDIZIONALI
• Confezionamento e Conservazione: Conservare in contenitori ben chiusi tra 2 e 8℃.
• Standard di riferimento USP <11>
USP Orlistat RS
Composto correlato all'USP Orlistat A RS
Composto correlato all'USP Orlistat B RS
Composto correlato all'USP Orlistat C RS
Composto correlato all'USP Orlistat D RS
Composto correlato all'USP Orlistat E RS
USP35