Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 Saggio (HPLC) 97,0~102,0%

Paclitaxel
C47H51NO14853.91
Acido benzenpropanoico, -(benzoilammino)--idrossi-, 6,12b-bis(acetilossi)-12-(benzoilossi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -dodecaidro-4,11-diidrossi-4a,8,13,13-tetrametil-5-osso-7,11-metano-1H-ciclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-ile estere, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecaidro-4,6, 9,11,12,12b-esaidrossi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-one 6, 12b-diacetato, 12-benzoato, 9-estere con (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilisoserina [33069-62-4].
Paclitaxel contiene non meno del 97,0% e non più del 102,0% di C47H51NO14, calcolato su base anidra, senza solventi.
[Attenzione: il paclitaxel è citotossico.Si deve prestare molta attenzione per evitare di inalare particelle di Paclitaxel ed esporre la pelle ad esso.]
Imballaggio e stoccaggio: conservare in contenitori stretti e resistenti alla luce e conservare a temperatura ambiente controllata.
Etichettatura-L'etichettatura indica il tipo di processo utilizzato per produrre il materiale e il relativo test dei composti a cui il materiale è conforme.
Standard di riferimento USP <11>-
USP Endotossina RS
USP Paclitaxel RS Fare clic per visualizzare la struttura
Composto correlato al paclitaxel USP A RS
Cefalomannine.
USP Paclitaxel Composto correlato B RS
10-deacetil-7-epipaclitaxel.
Miscela di impurezze di paclitaxel USP RS
Miscela di Paclitaxel e dei seguenti composti correlati: analogo del propile, cefalomannina, analogo del sec-butile, analogo del n-butile, analogo del benzile, baccatina VI, analogo del pentile e 7-epipaclitaxel.
Identificazione-
A: Assorbimento infrarosso <197K>.
B: Il tempo di ritenzione del picco maggiore nel cromatogramma della preparazione del test corrisponde a quello nel cromatogramma della preparazione standard, come ottenuto nel test.
Rotazione specifica 781S: tra 49,0 e 55,0 a 20, calcolata su base anidra, senza solventi.
Soluzione di prova: 10 mg per mL, in metanolo.
Test di enumerazione microbica <61> e Test per microrganismi specificati <62>- La conta microbica aerobica totale non supera 100 ufc per g.Soddisfa i requisiti dei test per l'assenza di Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, specie Salmonella ed Escherichia coli.
Endotossine batteriche 85-It contiene non più di 0,4 unità di endotossina USP per mg di paclitaxel.
Acqua, metodo Ic <921>: non più del 4,0%.
Residuo alla combustione <281>: non più dello 0,2%.
Metalli pesanti, metodo II <231>: 0,002%.
Composti correlati-
test 1 (per materiale etichettato come isolato da fonti naturali)-Se il materiale è conforme a questo test, l'etichettatura indica che soddisfa USP Related compound Test 1.
Preparare il diluente come indicato nel saggio.
Soluzione A-Preparare l'acetonitrile filtrato e degassato.
Soluzione B-Preparare acqua filtrata e degassata.
Fase mobile: utilizzare miscele variabili di soluzione A e soluzione B come indicato per il sistema cromatografico.Apportare le modifiche necessarie (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia 621).
Soluzione di idoneità del sistema: sciogliere quantità accuratamente pesate di USP Paclitaxel Related Compound A RS e USP Paclitaxel Related Compound B RS in metanolo per ottenere una soluzione con concentrazioni note di circa 10 µg di ciascuno per mL.Trasferire 5,0 mL di questa soluzione in un matraccio tarato da 50 mL, diluire con Diluent fino a volume e miscelare.
Soluzione standard- Sciogliere, con l'ausilio della sonicazione, una quantità accuratamente pesata di USP Paclitaxel RS in Diluente, e diluire quantitativamente, e se necessario gradualmente, con Diluente per ottenere una soluzione a concentrazione nota di circa 5 µg per mL.
Soluzione di prova: utilizzare la preparazione del test.
Sistema cromatografico (vedere Cromatografia <621>)-Il cromatografo liquido è dotato di un rivelatore da 227 nm e di una colonna da 4,6 mm × 25 cm che contiene un impaccamento L43 da 5 µm.La portata è di circa 2,6 ml al minuto.La temperatura della colonna è mantenuta a 30. Il cromatografo è programmato come segue.
Tempo (minuti) Soluzione A (%) Soluzione B (%) Eluizione
0–35 35 65 isocratico
35–60 35®80 65®20 gradiente lineare
60–70 80®35 20®65 gradiente lineare
70–80 35 65 isocraticCromatografare la soluzione di idoneità del sistema e registrare le risposte di picco come indicato per la procedura: i tempi di ritenzione relativi sono circa 0,78 per il composto A correlato a paclitaxel e 0,86 per il composto B correlato a paclitaxel (rispetto al tempo di ritenzione per paclitaxel ottenuto da la soluzione Test);e la risoluzione, R, tra il composto A correlato al paclitaxel e il composto B correlato al paclitaxel non è inferiore a 1,0.Cromatografare la soluzione standard e registrare le risposte di picco come indicato per la procedura: la deviazione standard relativa per le iniezioni ripetute non è superiore al 2,0%.
Procedura-Iniettare un volume (circa 15 µL) della soluzione di prova nel cromatografo, registrare il cromatogramma e misurare le aree per i picchi maggiori.Calcolare la percentuale di ciascuna impurità nella porzione di Paclitaxel presa dalla formula:
100(Ven / rU)
in cui F è il fattore di risposta relativo per ogni picco di impurità (vedi Tabella 1 per i valori);ri è l'area del picco per ogni singola impurità;e rU è l'area del picco per il paclitaxel.
Tabella 1
Tempo di ritenzione relativo Fattore di risposta relativo (F) Nome Limite (%)
0,24 1,29 baccatina III 0,2
0,53 1,00 10-deacetilpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-xilosilpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomannina (composto A correlato al paclitaxel) a11
0,78 1,26 2'',3''-Diidrocefalomannina a21
0,86 1,00 10-deacetil-7-epipaclitaxel (composto B correlato al paclitaxel) 0,5
1.10 1.00 Analogo benzilico3 b12
1,10 1,00 3'',4''-deidropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-epicefalomannino 0,3
1,85 1,00 7-epipaclitaxel 0,5
1 La risoluzione può essere incompleta per questi picchi, a seconda dei relativi importi presenti;la somma di a1 e a2 non è superiore allo 0,5%.
2 La risoluzione può essere incompleta per questi picchi, a seconda degli importi relativi presenti;la somma di b1 e b2 non è superiore allo 0,5%.
3 Il seguente nome chimico è assegnato al composto correlato, analogo del benzile:Baccatina III 13-estere con acido (2R,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(2-fenilacetilammino)propanoico.
Oltre a non superare i limiti per le impurità correlate al paclitaxel nella Tabella 1, non si trova più dello 0,1% di qualsiasi altra singola impurità;e non si trova più del 2,0% delle impurità totali.
test 2 (per materiale etichettato come prodotto da un processo semisintetico)— Se il materiale è conforme a questo test, l'etichettatura indica che soddisfa il Test 2 dei composti correlati USP.
Diluente: utilizzare acetonitrile.
Soluzione A-Utilizzare una miscela filtrata e degasata di acqua e acetonitrile (3:2).
Soluzione B-Utilizzare acetonitrile filtrato e degassato.
Fase mobile: utilizzare miscele variabili di soluzione A e soluzione B come indicato per il sistema cromatografico.Apportare le modifiche necessarie (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia 621).
Soluzione di idoneità del sistema: sciogliere quantità accuratamente pesate di USP Paclitaxel RS e USP Paclitaxel Related Compound B RS nel diluente, agitando e sonicando se necessario, per ottenere una soluzione con concentrazioni note di circa 0,96 mg e 0,008 mg per mL, rispettivamente.
Soluzione test-Trasferire circa 10 mg di Paclitaxel, accuratamente pesati, in un matraccio tarato da 10 mL, sciogliere e diluire con Diluente fino a volume, agitando e sonicando se necessario, e mescolare.
Sistema cromatografico (vedere Cromatografia 621): il cromatografo liquido è dotato di un rivelatore da 227 nm e di una colonna da 4,6 mm × 15 cm che contiene un impaccamento L1 da 3 µm.La portata è di circa 1,2 ml al minuto.La temperatura della colonna è mantenuta a 35. Il cromatografo è programmato come segue.
Tempo (minuti) Soluzione A (%) Soluzione B (%) Eluizione
0-20 100 0 isocratico
20-60 100®10 0®90 gradiente lineare
60-62 10®100 90®0 gradiente lineare
62-70 100 0 isocraticChromatografare la soluzione di idoneità del sistema e registrare le risposte di picco come indicato per la procedura: i tempi di ritenzione relativi sono circa 0,94 per il composto B correlato al paclitaxel e 1,0 per il paclitaxel;la risoluzione, R, tra il composto B correlato al paclitaxel e il paclitaxel non è inferiore a 1,2;e la deviazione standard relativa per le iniezioni ripetute non è superiore al 2,0%.
Procedura-Iniettare separatamente volumi uguali (circa 15 µL) del diluente e della soluzione di prova nel cromatografo, registrare i cromatogrammi e misurare le aree per tutti i picchi.Ignorare eventuali picchi dovuti al diluente.Calcolare la percentuale di ciascuna impurità nella porzione di Paclitaxel presa dalla formula:
100 (ven / rs)
in cui F è il fattore di risposta relativo per ogni impurità (vedi Tabella 2 per i valori);ri è l'area del picco per ciascuna impurità ottenuta dalla soluzione Test;e rs è la somma delle aree di tutti i picchi ottenuti dalla soluzione Test.
Tavolo 2
Tempo di ritenzione relativo Fattore di risposta relativo (F) Nome Limite (%)
0,11 1,24 10-deacetilbaccatina III 0,1
0,20 1,29 Baccatina III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradante2 0,1
0,47 1,00 10-deacetilpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-debenzoilpaclitaxel-2-pentenoato 0,7
0.921 1.00 Anello ossetano aperto, acetile e benzoile migrati2 x1
0,921 1,00 10-acetoacetilpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-deacetil-7-epipaclitaxel (composto B correlato al paclitaxel) x3
1,37 1,00 7-epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-acetilpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatina III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 La risoluzione può essere incompleta per questi picchi, a seconda dei relativi importi presenti;la somma di x1, x2 e x3 non è superiore allo 0,4%.
2 I seguenti nomi chimici sono assegnati ai relativi composti Fotodegradante;Anello ossetano aperto, acetile e benzoile migrati;e 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradante
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetilossi-5,13-diidrossi-4,16,17,17-tetrametil-8-ossa- 3-osso-12-fenilcarbonilossipentaciclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]eptadec-15-ile
(2R,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(fenilcarbonilammino)propanoato
Anello ossetano aperto, acetile e benzoile migrati
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetilossi-1,2,4,7-tetraidrossi-8,12,15,15-tetrametil-9-osso- 4-(fenilcarbonilossimetil)triciclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-ile
(2R,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(fenilcarbonilammino)propanoato
Paclitaxel a catena 10,13-Bisside
Baccatin III 13-estere con acido (2R,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(fenilcarbonilammino)propanoico, 10-estere con (2S,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(fenilcarbonilammino )acido propanoico
Oltre a non superare i limiti per le impurità correlate al paclitaxel nella Tabella 2, non si trova più dello 0,1% di qualsiasi altra singola impurità;e non si trova più del 2,0% delle impurità totali.
test 3 (per materiale etichettato come prodotto da un processo di fermentazione di cellule vegetali)— Se il materiale è conforme a questo test, l'etichettatura indica che soddisfa il Test 3 dei composti correlati USP.
Soluzione A-Preparare una miscela filtrata e degassata di acqua e acetonitrile (3:2).
Soluzione B-Preparare l'acetonitrile filtrato e degassato.
Fase mobile: utilizzare miscele variabili di soluzione A e soluzione B come indicato per il sistema cromatografico.Apportare le modifiche necessarie (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia 621).
Soluzione di idoneità del sistema: sciogliere la miscela di impurità USP Paclitaxel RS in acetonitrile, sonicando se necessario, per ottenere una soluzione con una concentrazione nota di circa 1 mg per mL.
Soluzione standard-Sciogliere una quantità accuratamente pesata di USP Paclitaxel RS in acetonitrile, sonicando se necessario, per ottenere una soluzione con una concentrazione nota di circa 1 mg per mL.
Soluzione test-Trasferire circa 10 mg di Paclitaxel, accuratamente pesati, in un matraccio tarato da 10 ml.Sciogliere e diluire con acetonitrile a volume, sonicando se necessario, e mescolare.
Sistema cromatografico (vedere Cromatografia 621): il cromatografo liquido è dotato di un rivelatore da 227 nm e di una colonna da 4,6 mm × 15 cm che contiene un impaccamento L1 da 3 µm.La portata è di circa 1,2 ml al minuto.Il cromatografo è programmato come segue.
Tempo (minuti) Soluzione A (%) Soluzione B (%) Eluizione
0-28 100 0 isocratico
28-33 100®98 0®2 gradiente lineare
33–58 98®10 2®90 gradiente lineare
58-60 10 90 isocratico
60-63 10®100 90®0 gradiente lineare
63-70 100 0 isocraticChromatograph la soluzione di idoneità del sistema e registrare le risposte di picco come indicato per Procedura: la risoluzione, R, tra paclitaxel e analogo benzilico non è inferiore a 1,8.Cromatografare la soluzione standard e registrare le risposte di picco come indicato per la procedura: la deviazione standard relativa per le iniezioni ripetute non è superiore al 2,0%.[nota: ai fini dell'identificazione del picco, i tempi di ritenzione relativi approssimativi sono riportati nella Tabella 3. I tempi di ritenzione relativi sono misurati rispetto al Paclitaxel.]
Tabella 3
Limite di tempo di conservazione relativo del nome (%)
Analogo del propile1 0,54 0,2
Cefalomannina (composto A correlato al paclitaxel) 0,76 0,5
Analogo sec-butile2 0,81 0,2
Analogo n-butile3 0,89 0,1
Analogo benzilico 1,10 0,4
Baccatina VI 1,23 0,2
Analogo pentilico4 1,31 0,2
7-epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Il seguente nome chimico è assegnato al composto correlato Analogo del propile:Baccatina III 13-estere con acido (2R,3S)-3-butanoilammino-2-idrossi-3-fenilpropanoico.
2 Il seguente nome chimico è assegnato al relativo composto sec-Butyl analog:Baccatin III 13-ester with (2R,3S)-2-hydroxy-3-(2-methylbutanoylamino)-3-phenylpropanoic acid.
3 Il seguente nome chimico è assegnato al relativo composto n-Butyl analog:Baccatin III 13-ester with (2S,3S)-2-hydroxy-3-(pentanoylamino)-3-phenylpropanoic acid.
4 Il seguente nome chimico è assegnato al relativo composto Pentyl analog:Baccatin III 13-ester with (2R,3S)-3-(hexanoylamino)-2-hydroxy-3-phenylpropanoic acid.
Procedura-Iniettare un volume (circa 12 µL) della soluzione di prova nel cromatografo, registrare il cromatogramma e misurare le aree per tutti i picchi.Calcolare la percentuale di ciascuna impurità nella porzione di Paclitaxel presa dalla formula:
100(ri / rU)
in cui ri è la risposta di ogni singola impurità;e rU è la somma delle aree di tutti i picchi ottenuti dalla soluzione Test.Oltre a non superare i limiti per le impurità correlate al paclitaxel nella Tabella 3, non si trova più dello 0,1% di qualsiasi altra singola impurità;e non si trova più del 2,0% delle impurità totali.
Saggio-
Diluente: preparare una miscela di metanolo e acido acetico (200:1).
Fase mobile: preparare una miscela filtrata e degasata di acqua e acetonitrile (11:9).Apportare le modifiche necessarie (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia 621).
Preparazione standard- Sciogliere, utilizzando la sonicazione se necessario, una quantità accuratamente pesata di USP Paclitaxel RS in Diluent e diluire quantitativamente e gradualmente se necessario, con Diluent per ottenere una soluzione con una concentrazione nota di circa 1 mg per mL.
Preparazione del saggio-Trasferire circa 10 mg di Paclitaxel, accuratamente pesati, in un matraccio tarato da 10 ml.Sciogliere in Diluent, utilizzando la sonicazione se necessario, diluire con Diluent a volume e mescolare.
Sistema cromatografico (vedere Cromatografia <621>)-Il cromatografo liquido è dotato di un rivelatore da 227 nm e di una colonna da 4,6 mm × 25 cm che contiene un impaccamento L43 da 5 µm.La portata è di circa 1,5 ml al minuto.Cromatografare la preparazione dello standard e registrare le risposte di picco come indicato per la procedura: il fattore di scodamento è compreso tra 0,7 e 1,3;e la deviazione standard relativa per le iniezioni ripetute non è superiore all'1,5%.
Procedura-Iniettare separatamente volumi uguali (circa 10 µL) della preparazione standard e della preparazione del test nel cromatografo, registrare i cromatogrammi e misurare le aree per i picchi principali.Calcolare la quantità, in mg, di C47H51NO14 nella porzione di Paclitaxel presa dalla formula:
10C(rU / rS)
in cui C è la concentrazione, in mg per mL, di USP Paclitaxel RS nella preparazione Standard;e rU e rS sono le risposte di picco per il paclitaxel ottenute rispettivamente dalla preparazione del test e dalla preparazione standard.