Ursodeoxycholic Acid (UDCA) CAS 128-13-2 Assay 99.0~101.0%

חומצה URSODEOXYCHOLIC
C24H40O4 מר 392.6[128-13-2]
הַגדָרָה
חומצה 3α,7β-Dihydroxy-5β-cholan-24-oic.
תוכן: 99.0 אחוז עד 101.0 אחוז (חומר מיובש).
דמויות
מראה: אבקה לבנה או כמעט לבנה.
מסיסות: כמעט בלתי מסיס במים, מסיס בחופשיות באתנול (96 אחוז), מסיס מעט באצטון, כמעט בלתי מסיס במתילן כלוריד.
mp: בערך 202℃.
זיהוי
זיהוי ראשון: א.
זיהוי שני: ב, ג.
א. ספקטרופוטומטריית בליעת אינפרא אדום (2.2.24).
השוואה: Ursodeoxycholic Acid CRS.
ב.בדוק את הכרומטוגרמות שהתקבלו בבדיקת טומאה ג.
תוצאות: הכתם העיקרי בכרומטוגרמה המתקבל עם תמיסה (ב) דומה במיקום, צבע וגודל לכתם העיקרי בכרומטוגרמה המתקבלת עם תמיסת ייחוס (א).
ג. ממיסים כ-10 מ"ג ב-1 מ"ל חומצה גופרתית R. מוסיפים 0.1 מ"ל תמיסת פורמלדהיד R ומניחים לעמוד למשך 5 דקות.הוסף 5 מ"ל מים R. התרחיף המתקבל הוא ירקרק-כחול.
בדיקות
סיבוב אופטי ספציפי (2.2.7): + 58.0 עד + 62.0 (חומר מיובש).
ממיסים 0.500 גרם באתנול נטול מים R ומדלל ל-25.0 מ"ל עם אותו ממס.
טומאה ג כרומטוגרפיה בשכבה דקה (2.2.27).
תערובת ממס: מים R, אצטון R (10:90 V/V).
פתרון בדיקה (א).ממיסים 0.40 גר' מהחומר לבדיקה בתערובת הממס ומדלל ל-10 מ"ל עם תערובת הממס.
פתרון בדיקה (ב).יש לדלל 1 מ"ל של תמיסת בדיקה (א) ל-10 מ"ל עם תערובת הממס.
פתרון התייחסות (א).ממיסים 40 מ"ג של חומצה ursodeoxycholic CRS בתערובת הממס ומדללים ל-10 מ"ל עם תערובת הממס.
פתרון התייחסות (ב).ממיסים 20 מ"ג של חומצה lithocholic CRS (טומאה C) בתערובת הממס ומדלל ל-10.0 מ"ל עם תערובת הממס (פתרון A).דלל 2.0 מ"ל מתמיסה זו ל-100.0 מ"ל עם תערובת הממס.
פתרון התייחסות (ג).ל-5 מ"ל של תמיסה A הוסף 10 מ"ג של חומצה chenodeoxycholic CRS (טומאה A) ודלל ל-50 מ"ל עם תערובת הממס.
צלחת: צלחת סיליקה ג'ל TLC R.
שלב נייד: חומצה קרחונית R, אצטון R, מתילןכלוריד R (1:30:60 V/V/V).
יישום: 5μL.
פיתוח: מעל 2/3 מהצלחת.
ייבוש: בטמפרטורה של 120℃ למשך 10 דקות.
זיהוי: יש לרסס מיד בתמיסה של 47.6 גרם/ליטר של חומצה פוספומוליבדית R בתערובת של נפח 1 של חומצה גופרתית R ו-20 נפחים של חומצה קרחונית R ולחמם ב-120℃ עד להופעת כתמים כחולים על רקע בהיר יותר.
התאמה למערכת: פתרון התייחסות (ג):
- הכרומטוגרמה מציגה 2 כתמים עיקריים מופרדים בבירור.
מגבלה: פתרון בדיקה (א):
-טומאה C: כל נקודה הנובעת מטומאה C אינה חזקה יותר מהנקודה העיקרית בכרומטוגרמה המתקבלת עם תמיסת ייחוס (ב) (0.1 אחוז).
חומרים קשורים.כרומטוגרפיית נוזלים (2.2.29).
תערובת ממס: מתנול R, פאזה ניידת (10:90 V/V).
פתרון מבחן.ממיסים 60 מ"ג מהחומר לבדיקה בתערובת הממס ומדלל ל-20.0 מ"ל עם תערובת הממס.
פתרון התייחסות (א).ממיסים את התוכן של בקבוקון של Ursodeoxycholic Acid עבור התאמת המערכת CRS (המכיל זיהומים A ו-H) ב-1.0 מ"ל מתערובת הממס.
פתרון התייחסות (ב).דלל 1.0 מ"ל מתמיסת הבדיקה ל-100.0 מ"ל עם תערובת הממס.דלל 1.0 מ"ל מתמיסה זו ל-10.0 מ"ל עם תערובת הממס.
טור:
-גודל: l = 0.25 מ', Ø = 4.6 מ"מ;
-פאזה נייח: ג'ל סיליקה אוקטדצילסיליל עם קצה קצה עבורכרומטוגרפיה R (5 מיקרומטר);
- טמפרטורה: 40℃ ± 1℃.
שלב נייד: ערבבו 30 נפחים של אצטוטריל R, 37 נפחים של תמיסה של 0.78 גרם/ליטר של נתרן דימימן פוספט R מותאם ל-pH 3 עם חומצה זרחתית R, ו-40 נפחים של מתנול R.
קצב זרימה: 0.8 מ"ל/דקה.
זיהוי: רפרקטומטר ב-35 ± 1℃.
הזרקה: 150 μL.
זמן ריצה: פי 4 מזמן השמירה של Ursodeoxycholic Acid.
זיהוי זיהומים: השתמש בכרומטוגרמה המסופקת עם חומצה ursodeoxycholic עבור התאמת מערכת CRS ובכרומטוגרמה המתקבלת עם תמיסת ייחוס (א) כדי לזהות את הפסגות הנובעות מזיהומים A ו-H.
שמירה יחסית בהתייחס לחומצה ursodeoxycholic (זמן שמירה = כ-14 דקות): טומאה H = כ-0.9;טומאה A = בערך 2.8.
התאמה למערכת: פתרון התייחסות (א):
-רזולוציה: מינימום 1.5 בין הפסגות עקב טומאה H וחומצה ursodeoxycholic.
מגבלות:
- טומאה A: לא יותר מפי 10 משטח השיא העיקרי בכרומטוגרמה המתקבלת בתמיסת ייחוס (ב) (1.0 אחוז);
זיהומים לא מוגדרים: עבור כל טומאה, לא יותר משטח השיא העיקרי בכרומטוגרמה המתקבלת עם תמיסת ייחוס (ב) (0.10 אחוז);
- סך הכל: לא יותר מפי 15 משטח השיא העיקרי בכרומטוגרמה המתקבלת בתמיסת ייחוס (ב) (1.5 אחוזים);
מגבלת התעלמות: פי 0.5 משטח השיא העיקרי בכרומטוגרמה המתקבלת עם תמיסת ייחוס (ב) (0.05 אחוז).
מתכות כבדות (2.4.8): מקסימום 20 עמודים לדקה.
1.0 גרם תואם לבדיקה C. הכן את תמיסת הייחוס באמצעות 2 מ"ל תמיסת עופרת סטנדרטית (10 ppm Pb) R.
הפסד בייבוש (2.2.32): מקסימום 1.0 אחוז, נקבע על 1,000 גרם על ידי ייבוש בתנור ב-105℃.
אפר סולפטי (2.4.14): מקסימום 0.1 אחוז, נקבע על 1.0 גרם.
מבחן
ממיסים 0.350 גרם ב-50 מ"ל אתנול (96 אחוז) R, שנוטרלו קודם לכן ל-0.2 מ"ל תמיסת פנולפטלין R. הוסף 50 מ"ל מים R וטיטר עם 0.1 מ' נתרן הידרוקסיד עד לקבלת צבע ורוד.
1 מ"ל של 0.1 M נתרן הידרוקסיד שווה ערך ל-39.26 מ"ג של C24H40O4.
זיהומים
זיהומים שצוינו: A, C.
זיהומים אחרים הניתנים לזיהוי (החומרים הבאים יתגלו, אם הם נמצאים ברמה מספקת, באחת או אחרת מהבדיקות במונוגרפיה. הם מוגבלים על ידי קריטריון הקבלה הכללי של זיהומים אחרים/לא מוגדרים ו/או על ידי המונוגרפיה הכללית חומרים לשימוש תרופתי (2034). לפיכך אין צורך לזהות זיהומים אלו לצורך הוכחת תאימות. ראה גם 5.10.
בקרת זיהומים בחומרים לשימוש פרמצבטי): B,D,E,F,G,H,I.
א. 3α,7α-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (חומצה צ'נודיאוקסיכולית),
ב. 3α,7α,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (חומצה כולית),
C. 3α-hydroxy-5β-cholan-24-oic acid (חומצה ליתוכולית),
D. 3α,7β,12α-trihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (חומצה אורסוכולית),
E. 3α,12α-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid (חומצה דאוקסיכולית),
F. 3α-hydroxy-7-oxo-5β-cholan-24-oic acid,
G. מתיל 3α,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oate,
H. 3β,7β-dihydroxy-5β-cholan-24-oic acid,
I. 5β-cholane-3α,7β,24-triol.