L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe・HCl アッセイ >98.5% (HPLC) 工場

L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe・HCl) の分析方法 (CAS: 17193-40-7)
説明: 清潔で乾燥したペトリ皿に約 2 g のサンプルを置き、サンプルの外観を観察します。報告: 観察を報告する
同定: 試験調製物のクロマトグラムの主要ピークの保持時間を、HPLC によるクロマトグラフィー純度で得られるシステム適合性調製物のクロマトグラムの主要ピークの保持時間と比較します。
乾燥減量：ガラス栓付き浅型計量瓶を105±2℃で30分間乾燥させます。デシケーター内で室温まで冷却します。栓付き計量瓶の重さを正確に量り、重量（W1）を記録します。正確に秤量した約 1 ～ 2g の被験物質を秤量瓶に移します。穏やかに横に振って、試験片を可能な限り均等に約 5 mm の深さまで広げます。投入した秤量瓶の重さを量り、その重量（W2）を記録します。充填されたボトルを乾燥オーブンに置き、ストッパーを取り外してチャンバー内に残します。試験サンプルを105±2℃で3時間乾燥させます。チャンバーを開けたらすぐにボトルを閉め、デシケーター内で室温に戻してください。栓付き計量瓶の重さを正確に量り、重量を再記録します（W3）。次の式を使用して、サンプルの乾燥による損失の割合を計算します。
計算 乾燥減量(%w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
HPLCによるエナンチオマー含有量:
化学薬品と試薬:
n-ヘキサンARグレード
メタノール HPLC グレード
イソプロピルアルコール HPLCグレード
ジエチルアミン AR グレード
標準: L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl 標準。L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl エナンチオマー標準
移動相: n-ヘキサン、イソプロピルアルコール、メタノール、ジエチルアミンの均一混合物 (65:20:15:0.1 v/v/v/v) を調製します。
ブランクの準備: 2.5 ml のメタノールを 10 ml メスフラスコに移し、移動相で所定の容量まで希釈して混合します。
システム適合性の準備:
正確に秤量し、L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl 標準品および L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl エナンチオマー標準品のそれぞれ約 5 mg を 10 ml メスフラスコに移し、約 2.5 ml のメタノールに溶解し、携帯電話で所定の容量まで希釈します。フェーズして混合します。
試験の準備:
正確に秤量し、約 5 mg のサンプルを 10 mol メスフラスコに移し、約 2.5 ml のメタノールに溶解し、移動相で所定の容量まで希釈して混合します。
楽器のパラメーター:
装置: インジェクター、ポンプ、UV 検出器、レコーダーを備えた HPLC
カラム：ChiralPak-IC（4.6mm×250mm）5μ相当
流量：1.0ml/分
波長: 260nm
注入量：10μL
カラムオーブン温度：25℃
実行時間: 20 分
手順
次の順序で説明されているように、溶液を注入します。クロマトグラムを記録し、基準を確認します。
注射の説明 注射回数の基準
ブランク調製 1 L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl またはエナンチオマーの保持時間に干渉ピークは観察されません。
システム適合性の準備 1 L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl とエナンチオマー ピーク間の分離度は 2.0 以上である必要があります。
試験の準備 1 試験クロマトグラムを使用して、サンプル中のエナンチオマー含有量を決定します。
相対保持時間:
L-4-ニトロフェニルアラニン メチルエステル HCl 1.0
エナンチオマー 約1.11
L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl の保持時間は約 9.8 分です。
計算: 試験準備から得られたクロマトグラムで、L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl およびエナンチオマーを除くすべてのピークを無視します。面積正規化法によりサンプル中のエナンチオマー含有量を報告します。
HPLCによるクロマトグラフィー純度および不純物:
化学薬品と試薬:
リン酸二アンモニウムARグレード
リン酸ARグレード
メタノール HPLC グレード
精製水
規格
L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl 標準
4-ニトロ-L-フェニルアラニン一水和物標準品
移動相-A
リン酸二アンモニウム6.6gを精製水1000mlに溶かします。この溶液のpHをリン酸で6.0に調整します。濾過して脱気します。溶液の pH を測定する前に、標準緩衝液 pH 4.01 および 7.00 を使用して pH メーターを校正します。
移動相-B
メタノール HPLC グレード
システム適合性の準備
正確に秤量し、L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl 標準液および 4-ニトロ-L-フェニルアラニン一水和物標準液のそれぞれ約 25 mg を 50 ml メスフラスコに移し、メタノールに溶解して定容まで希釈し、混合します。
テストの準備:
正確に秤量し、約 25 mg のサンプルを 50 ml メスフラスコに移し、メタノールに溶解して所定の容量まで希釈し、混合します。
楽器のパラメーター:
装置: インジェクター、ポンプ、UV 検出器、レコーダーを備えた HPLC
カラム：XTerra RP-18（4.6mm×150mm）5μ相当
流量：1.0ml/分
波長: 265nm
注入量：20μL
カラムオーブン温度：25℃
実行時間: 45 分
勾配プログラム
時間 (分) 移動相 A % 移動相 B %
0.01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
手順：
次の順序で説明されているように、溶液を注入します。クロマトグラムを記録し、基準を確認します。
ブランク調製 1 L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl の保持時間に干渉ピークは観察されません。
システム適合性の準備 1 L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl ピークのテーリング係数は 2.0 以上である必要があります。
試験の準備 1 試験クロマトグラムを使用して、クロマトグラフィーの純度および不純物を決定します。
相対保持時間:
L-4-ニトロフェニルアラニン メチル エステル HCl 1.0 (保持時間 約 11.4 分)
4-ニトロ-L-フェニルアラニン 約0.4
トルエン 約2.3
計算:
試験準備で得られたクロマトグラムでは、ブランク補正後、トルエンによるピークを無視します。面積正規化法により、サンプル中のクロマトグラフィー純度、4-ニトロ-L-フェニルアラニン含有量、および総不純物を報告します。