L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl ანალიზი >98.5% (HPLC) Factory

L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) ანალიზის მეთოდი (CAS: 17193-40-7)
აღწერა: მოათავსეთ დაახლოებით 2 გ ნიმუში სუფთა და მშრალ პეტრი-ჭურჭელში და დააკვირდით ნიმუშის გარეგნობას.მოხსენება: შეატყობინეთ დაკვირვებას
იდენტიფიკაცია: შეადარეთ ტესტის მომზადების ქრომატოგრამაში ძირითადი პიკის შეკავების დრო სისტემის ვარგისიანობის ქრომატოგრამაში მთავარი პიკის შეკავების დროს, როგორც ეს მიღებულია ქრომატოგრაფიული სისუფთავეში HPLC-ით.
დაკარგვა გაშრობისას: გააშრეთ შუშით დახურული, ზედაპირული მასის ბოთლი 105±2℃ ტემპერატურაზე 30 წუთის განმავლობაში.აცადეთ გაცივდეს ოთახის ტემპერატურამდე დესიკატორში.ზუსტად აწონეთ ასაწონი ბოთლი საცობით და ჩაწერეთ წონა (W1).გადაიტანეთ დაახლოებით 1-დან 2 გ-მდე ზუსტად აწონილი საცდელი ნივთიერების რაოდენობა ასაწონ ბოთლში.ნაზი, გვერდით შერყევის გზით, გადაანაწილეთ საცდელი ნიმუში რაც შეიძლება თანაბრად, დაახლოებით 5 მმ სიღრმეზე.აწონეთ დატვირთული ასაწონი ბოთლი და ჩაწერეთ წონა (W2).დატენილი ბოთლი მოათავსეთ საშრობი ღუმელში, ამოიღეთ საცობი და ასევე დატოვეთ კამერაში.ტესტის ნიმუში გააშრეთ 105±2℃ ტემპერატურაზე 3 საათის განმავლობაში.კამერის გახსნის შემდეგ, დახურეთ ბოთლი დაუყოვნებლივ და დაუშვით ოთახის ტემპერატურამდე საშრობში.ზუსტად აწონეთ ასაწონი ბოთლი საცობით და აღწერეთ წონა (W3).გამოთვალეთ პროცენტული დანაკარგი ნიმუშის გაშრობისას შემდეგი ფორმულის გამოყენებით:
გაანგარიშება დანაკარგი გაშრობისას (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
ენანტიომერის შემცველობა HPLC-ით:
ქიმიური და რეაგენტები:
n-ჰექსანი AR კლასი
მეთანოლი HPLC ხარისხი
იზოპროპილ ალკოჰოლი HPLC კლასის
დიეთილამინი AR კლასის
სტანდარტები: L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl სტანდარტი;L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl ენაანტიომერის სტანდარტი
მობილური ფაზა: მოამზადეთ n-ჰექსანის, იზოპროპილის ალკოჰოლის, მეთანოლისა და დიეთილამინის ერთგვაროვანი ნარევი (65:20:15:0.1 ვ/ვ/ვ/ვ)
ბლანკის მომზადება: გადაიტანეთ 2,5 მლ მეთანოლი 10 მლ მოცულობით კოლბაში, განზავეთ მოცულობითი ფაზაში და აურიეთ.
სისტემის ვარგისიანობის მომზადება:
ზუსტად აწონეთ და გადაიტანეთ დაახლოებით 5 მგ L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl სტანდარტი და L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl ენაანტიომერის სტანდარტი 10 მლ მოცულობით კოლბაში, იხსნება დაახლოებით 2,5 მლ მეთანოლში, განზავებულია მოცულობით მობილურზე. ფაზა და აურიეთ.
ტესტის მომზადება:
აწონეთ ზუსტად და გადაიტანეთ დაახლოებით 5 მგ ნიმუში 10-მოლ მოცულობით კოლბაში, იხსნება დაახლოებით 2,5 მლ მეთანოლში, განზავებულია მოცულობით მოძრავ ფაზაში და აურიეთ.
ინსტრუმენტული პარამეტრები:
ინსტრუმენტი: HPLC აღჭურვილია ინჟექტორით, ტუმბოთი, UV დეტექტორით და ჩამწერით
სვეტი: ChiralPak-IC (4,6 მმ x 250 მმ) 5 μ ან ექვივალენტი
ნაკადის სიჩქარე: 1,0 მლ/წთ
ტალღის სიგრძე: 260 ნმ
ინექციის მოცულობა: 10 μL
სვეტის დახურვის ტემპერატურა: 25℃
გაშვების დრო: 20 წუთი
Პროცედურა
შეიყვანეთ ხსნარები, როგორც ეს მითითებულია შემდეგ თანმიმდევრობით.ჩაწერეთ ქრომატოგრამები და დაადასტურეთ კრიტერიუმები:
ინექციების აღწერა ინექციების რაოდენობა კრიტერიუმები
ბლანკი პრეპარატი 1 L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl-ის ან ენაანტიომერის შეკავების დროს არ უნდა დაფიქსირდეს ჩარევის პიკი.
სისტემის ვარგისიანობის მომზადება 1 გარჩევადობა L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl-სა და ენაანტიომერის პიკს შორის უნდა იყოს არანაკლებ 2.0
ტესტის მომზადება 1 გამოიყენეთ ტესტის ქრომატოგრამა სინჯში ენატიომერის შემცველობის დასადგენად.
შედარებითი შეკავების დრო:
L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl 1.0
ენანტიომერი დაახლოებით 1.11
L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl-ის შეკავების დრო დაახლოებით 9,8 წუთია.
გაანგარიშება: ტესტის მომზადების შედეგად მიღებულ ქრომატოგრამაში, უგულებელყოთ ყველა პიკი, მოსალოდნელია L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl და ენაანტიომერი.მოხსენება ენანტიომერის შემცველობა ნიმუშში ფართობის ნორმალიზაციის მეთოდით.
ქრომატოგრაფიული სისუფთავე და მინარევები HPLC-ით:
ქიმიური და რეაგენტები:
დიამონიუმის ფოსფატი AR კლასის
ფოსფორის მჟავა AR კლასის
მეთანოლი HPLC ხარისხი
გაწმენდილი წყალი
სტანდარტები
L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl სტანდარტი
4-ნიტრო-ლ-ფენილალანინის მონოჰიდრატის სტანდარტი
მობილური ფაზა-A
გახსენით 6,6 გრ დიამონიუმის ფოსფატი 1000 მლ გაწმენდილ წყალში.დაარეგულირეთ ამ ხსნარის pH 6.0-მდე ფოსფორის მჟავით.ფილტრი და გაზი.ხსნარის pH-ის გაზომვამდე, pH მრიცხველის დაკალიბრება სტანდარტული ბუფერული ხსნარით pH 4.01 და 7.00.
მობილური ფაზა-B
მეთანოლი HPLC ხარისხი
სისტემის ვარგისიანობის მომზადება
აწონეთ ზუსტად და გადაიტანეთ დაახლოებით 25 მგ L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl სტანდარტისა და 4-ნიტრო-L-ფენილალანინის მონოჰიდრატის სტანდარტის 50 მლ მოცულობით კოლბაში, იხსნება და განზავდება მოცულობით მეთანოლში და აურიეთ.
ტესტის მომზადება:
აწონეთ ზუსტად და გადაიტანეთ დაახლოებით 25 მგ ნიმუში 50 მლ მოცულობით კოლბაში, იხსნება და განზავდება მოცულობით მეთანოლში და აურიეთ.
ინსტრუმენტული პარამეტრები:
ინსტრუმენტი: HPLC აღჭურვილია ინჟექტორით, ტუმბოთი, UV დეტექტორით და ჩამწერით
სვეტი: XTerra RP-18 (4,6 მმ x 150 მმ) 5 μ ან ექვივალენტი
ნაკადის სიჩქარე: 1,0 მლ/წთ
ტალღის სიგრძე: 265 ნმ
ინექციის მოცულობა: 20 μL
სვეტის დახურვის ტემპერატურა: 25℃
მოქმედების დრო: 45 წუთი
გრადიენტული პროგრამა
დრო (წთ) მობილური ფაზა-A % მობილური ფაზა-B %
0.01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Პროცედურა:
შეიყვანეთ ხსნარები, როგორც ეს მითითებულია შემდეგ თანმიმდევრობით.ჩაწერეთ ქრომატოგრამები და დაადასტურეთ კრიტერიუმები:
ბლანკი პრეპარატი 1 L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl-ის შეკავების დროს არ უნდა შეინიშნოს რაიმე შემაფერხებელი პიკი.
სისტემის ვარგისიანობის მომზადება 1 L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ეთერის HCl-ის უკიდეგანო ფაქტორი უნდა იყოს არანაკლებ 2.0
ტესტის მომზადება 1 გამოიყენეთ ტესტის ქრომატოგრამა ქრომატოგრაფიული სიწმინდისა და მინარევების დასადგენად.
შედარებითი შეკავების დრო:
L-4-ნიტროფენილალანინის მეთილის ესტერი HCl 1.0 (შეკავების დრო დაახლოებით 11.4 წუთი)
4-ნიტრო-L-ფენილალანინი დაახლოებით 0.4
ტოლუოლი დაახლოებით 2.3
გამოთვლები:
ტესტის მომზადების შედეგად მიღებულ ქრომატოგრამაში, ბლანკის კორექციის შემდეგ, უგულებელყოთ პიკი ტოლუოლის გამო.მოხსენება ქრომატოგრაფიული სისუფთავე, 4-ნიტრო-L-ფენილალანინის შემცველობა და მთლიანი მინარევები სინჯში ფართობის ნორმალიზაციის მეთოდით.