Fmoc-Ser(tBu)-OH CAS 71989-33-8 Fmoc-O-tert-Butyl-L-Serine ಪ್ಯೂರಿಟಿ >98.5% (HPLC)

ತಪಾಸಣೆ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು
1. ಗೋಚರತೆ
-- ದೃಶ್ಯ ತಪಾಸಣೆ
2. ಶುದ್ಧತೆ (HPLC)
2.1 ಉಪಕರಣ
ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ, ಪಿಡಿಎ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್.
ಎಲೆಕ್ಟ್ರಾನಿಕ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣಾತ್ಮಕ ಸಮತೋಲನ
2.2 ಕಾರಕ
ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರೈಲ್ (ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಗ್ರೇಡ್), ಟ್ರೈಫ್ಲೋರೋಅಸೆಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ (ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಗ್ರೇಡ್)
2.3 ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
2.3.1 ಕಾಲಮ್: YMC-ODS-AM, 5 μl, 250x4.6 mm
2.3.2 ಪತ್ತೆ ತರಂಗಾಂತರ: INC220nm
ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ: 1.0mL/min
ಮಾದರಿ ಗಾತ್ರ:10 μl (ಉಲ್ಲೇಖ)
ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವ: ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್
ಡೇಟಾ ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಸಮಯ: 25.00 ನಿಮಿಷ
2.4 ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ತಯಾರಿ
ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ A (0.1% ಟ್ರೈಫ್ಲೋರೋಅಸೆಟಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ನೀರು): ನಿಖರವಾದ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ 2. Oml ಟ್ರೈಫ್ಲೋರೋಅಸೆಟಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ನೀರಿನಿಂದ 2000m1 ಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ, ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಡೀಗ್ಯಾಸಿಂಗ್;
ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ B (0.1% ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್ ಟ್ರೈಫ್ಲೋರೋಅಸೆಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ): ನಿಖರವಾದ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ 2.0ml ಟ್ರೈಫ್ಲೋರೋಅಸೆಟಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು 2000m1 ಗೆ ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್, ಮಿಶ್ರ ಮತ್ತು ಡೀಗ್ಯಾಸಿಂಗ್‌ನೊಂದಿಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು;
2.5 ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ
ಸಮಯ (ನಿಮಿಷ) A% B%
0.00 90 10
13.00 10 90
18.00 10 90
18.01 90 10
23.00 90 10
2.6 ಮಾದರಿ ಪರಿಹಾರದ ತಯಾರಿಕೆ
ಅಸಿಟೋನೈಟ್ರೈಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ 0.1 ಗ್ರಾಂ ಮಾದರಿಯನ್ನು ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಕರಗಿಸಿ ಮತ್ತು 100 ಮಿಲಿಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ, ಬಳಕೆಗಾಗಿ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ ಅಥವಾ ಅದೇ ಸಾಂದ್ರತೆ.ಸಮಾನಾಂತರವಾಗಿ ಎರಡು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ.
2.7 ಮಾದರಿ ನಿರ್ಣಯ
ಕೆಳಗಿನ ಮಾದರಿ ವಿಧಾನದ ಪ್ರಕಾರ ಮಾದರಿಯನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿ:
ಖಾಲಿ ಪರಿಹಾರದ 1 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಇಂಜೆಕ್ಷನ್
1 ಹೊಲಿಗೆ ಮಾದರಿ ಪರಿಹಾರ 1#
1 ಹೊಲಿಗೆ ಮಾದರಿ ಪರಿಹಾರ 2#
2.8 ಫಲಿತಾಂಶದ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ
2.8.1 ಖಾಲಿ ಜಾಗವನ್ನು ಕಳೆಯುವುದರ ಮೂಲಕ HPLC ಶುದ್ಧತೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ ಮಾಡಲು ಗರಿಷ್ಠ ಪ್ರದೇಶದ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಣ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿದೆ.
2.8.2 ಎರಡು ಸೂಜಿಗಳ ಶುದ್ಧತೆಯ ಸಾಪೇಕ್ಷ ಸರಾಸರಿ ವಿಚಲನವು 1% ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿರಬಾರದು
2.8.3 ಎರಡೂ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದುಗಳ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಸ್ವೀಕಾರ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ಪೂರೈಸಿದರೆ, ಸರಾಸರಿ ಶುದ್ಧತೆಯನ್ನು ಅಂತಿಮ ಫಲಿತಾಂಶವಾಗಿ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ.
3, ಕರಗುವ ಬಿಂದು -- RY-1 ಕರಗುವ ಬಿಂದು ಉಪಕರಣ
4. ಒಣಗಿಸುವ ಪತ್ತೆ ವಿಧಾನದ ಮೇಲೆ ನಷ್ಟ
4.1 ಉಪಕರಣಗಳು:
ಎಲೆಕ್ಟ್ರಿಕ್ ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟಿಕ್ ಒಣಗಿಸುವ ಓವನ್, ಹತ್ತು ಸಾವಿರ ಸಮತೋಲನದಲ್ಲಿ ಒಂದು.
4.2 ಕಾರ್ಯವಿಧಾನ:
ಸ್ಥಿರವಾದ ತೂಕ ಮತ್ತು ಅತಿಯಾದ ಒಣಗಿಸುವಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ನೆಲದ ಬಾಯಿಯ ಹೊದಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಫ್ಲಾಟ್ ತೂಕದ ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ, 1 ಗ್ರಾಂ ಮಾದರಿಯ ತೂಕವನ್ನು (0.0001 ಗ್ರಾಂಗೆ ನಿಖರವಾಗಿದೆ).ಮಾದರಿಯನ್ನು ತೂಕದ ಬಾಟಲಿಯ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ 10 ಮಿಮೀಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ದಪ್ಪದಲ್ಲಿ ಸಮವಾಗಿ ಹರಡಬೇಕು, ಸ್ಥಿರ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ವಿದ್ಯುತ್ ಒಣಗಿಸುವ ಒಲೆಯಲ್ಲಿ ಹಾಕಿ, 105-110 ಡಿಗ್ರಿ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಒಣಗಿಸಿ, ತದನಂತರ ಒಣಗಿಸುವ ಕೋಣೆಗೆ ಸರಿಸಿ, ತಣ್ಣಗಾಗಿಸಿ. ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ ಮತ್ತು ತೂಕಕ್ಕೆ.
ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ: ಒಣ ತೂಕ ನಷ್ಟ %= (M1-M2) ÷M×100
ಎಲ್ಲಿ: M1: ಒಣಗಿಸುವ ಮೊದಲು ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ತೂಕದ ಬಾಟಲಿಯ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ, g
M2: ಒಣಗಿದ ನಂತರ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ತೂಕದ ಬಾಟಲಿಯ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ, g
ಎಂ: ಮಾದರಿ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿ, ಗ್ರಾಂ
5. ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತಿರುಗುವಿಕೆ
-- ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತಿರುಗುವಿಕೆಯನ್ನು GB/T613-1988 ಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ
ಮಾದರಿ ತಯಾರಿಕೆ: 0.5000 ಗ್ರಾಂ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಗಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 20ml ಇಥೈಲ್ ಅಸಿಟೇಟ್ನೊಂದಿಗೆ ಶುದ್ಧ ಮತ್ತು ಶುಷ್ಕ 50ml ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಬಾಟಲಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು.ಈಥೈಲ್ ಅಸಿಟೇಟ್ ಅನ್ನು ಕರಗಿಸಲು ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ಕಾರ್ಕ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಅಲ್ಲಾಡಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಪರೀಕ್ಷೆ: ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಮೊದಲು ಗೈರೊಸ್ಕೋಪ್‌ನ ಶೂನ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿಸಿ, ನಂತರ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ಮಾದರಿ ಪರಿಹಾರದೊಂದಿಗೆ ತುಂಬಿಸಿ, ತಿರುಗುವಿಕೆಯ ವಿಚಲನ ಕೋನವನ್ನು ರೆಕಾರ್ಡ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಕೆಳಗಿನ ಸೂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಮಾದರಿಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತಿರುಗುವಿಕೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ ಮಾಡಿ.
[α]20/D= (r×50) ÷(L×W)
ಎಲ್ಲಿ:
[α]20/D: 25℃ ನಲ್ಲಿ ಮಾದರಿ ಪರಿಹಾರದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತಿರುಗುವಿಕೆ
r: ಮಾದರಿ ಪರಿಹಾರಕ್ಕಾಗಿ 25℃ ನಲ್ಲಿ ತಿರುಗುವಿಕೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ
50: ಮಾದರಿ ಪರಿಹಾರ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ (ಮಿಲಿ)
w: ಮಾದರಿ ತೂಕ (g)
ಎಲ್: ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಟ್ಯೂಬ್ ಉದ್ದ (dm)
6. TCL ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ
ಮಾದರಿ ತಯಾರಿಕೆ: 0.5000 ಗ್ರಾಂ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಗಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಶುದ್ಧ ಮತ್ತು ಶುಷ್ಕ 50ml ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಬಾಟಲಿಗೆ ಸರಿಸಲಾಗಿದೆ, 40ml EtoH ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು, ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ಮುಚ್ಚಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಕರಗಿಸಲು ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ, ನಂತರ EtoH ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು.
ನಿಯಂತ್ರಣ ಮಾದರಿಯ ತಯಾರಿಕೆ: 0.5000 ಗ್ರಾಂ ಮಾದರಿಯನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಕ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧ ಮತ್ತು ಒಣ 50ml ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಬಾಟಲಿಗೆ ಸರಿಸಲಾಗಿದೆ, 40ml ನೀರು ಮತ್ತು 6N ಹೈಡ್ರೋಕ್ಲೋರಿಕ್ ಆಮ್ಲದ 2 ಹನಿಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು, ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ಮುಚ್ಚಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಕರಗಿಸಲು ಅಲ್ಲಾಡಿಸಿ, ನಂತರ ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ನೀರು.ನಂತರ ಮೇಲಿನ ದ್ರವದ 0.5 ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಂಡು ಅದನ್ನು 100ml ವಾಲ್ಯೂಮ್ ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ 1.0% ಅಮೈನೋ ಆಸಿಡ್ ರೆಸಿಡ್ಯೂ ಸ್ಕೇಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಉಲ್ಲೇಖ ಮಾದರಿಗೆ ಎಥೆನಾಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ.
ಮೈಕ್ರೋಸಾಂಪ್ಲಿಂಗ್ ಸಿರಿಂಜ್‌ನೊಂದಿಗೆ 10 ಮೈಕ್ರೋಲೀಟರ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಗಳನ್ನು GF254 ಸಿಲಿಕೋನ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗಿದೆ.ಹೋಲಿಕೆ ಬಿಂದುಗಳಿಗಾಗಿ ಕ್ರಮವಾಗಿ 5 ಮೈಕ್ರೋಲೀಟರ್, 10 ಮೈಕ್ರೋಲೀಟರ್ ಮತ್ತು 15 ಮೈಕ್ರೋಲೀಟರ್ ಪಾಯಿಂಟ್ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ.
ಡೆವಲಪಿಂಗ್ ಏಜೆಂಟ್: n-ಬ್ಯುಟಾನಾಲ್: ಗ್ಲೇಶಿಯಲ್ ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ: ನೀರು =4:1:1.
ಬಣ್ಣ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ ಏಜೆಂಟ್: 5% ನಿನ್ಹೈಡ್ರಿನ್ ಮೆಥನಾಲ್ ದ್ರಾವಣ.
ಬಣ್ಣ ಅಭಿವೃದ್ಧಿ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆ: ಮೊದಲು, ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದ ಸಿಲಿಕಾ ಜೆಲ್ ಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಒಣಗಿಸಲು ಹೇರ್ ಡ್ರೈಯರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿ, ನಂತರ ಅದನ್ನು 5% ನಿನ್ಹೈಡ್ರಿನ್ ಮೆಥನಾಲ್ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಅದ್ದಿ, ನಂತರ ಬ್ಲೋ ಡ್ರೈ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಬಣ್ಣ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಗಾಗಿ ವಿದ್ಯುತ್ ಕುಲುಮೆಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಿ.
ತೀರ್ಪು: ಉತ್ಪನ್ನದ ಬಣ್ಣ ಸಮಯ, ಸ್ಪಾಟ್ ಗಾತ್ರ, ಬಣ್ಣ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣ ಉತ್ಪನ್ನದೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಕೆ ನೋಡಿ, ಅದು ಆ ಶ್ರೇಣಿಯಲ್ಲಿದೆ ಎಂದು ನಿರ್ಣಯಿಸಿ.