L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl ಅಸ್ಸೇ >98.5% (HPLC) ಕಾರ್ಖಾನೆ

L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ವಿಧಾನ (CAS: 17193-40-7)
ವಿವರಣೆ: ಸುಮಾರು 2 ಗ್ರಾಂ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಶುದ್ಧ ಮತ್ತು ಒಣ ಪೆಟ್ರಿ-ಡಿಶ್‌ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯ ನೋಟವನ್ನು ಗಮನಿಸಿ.ವರದಿ ಮಾಡುವಿಕೆ: ವೀಕ್ಷಣೆಯನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿ
ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ: HPLC ಯಿಂದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಶುದ್ಧತೆಯಲ್ಲಿ ಪಡೆದಂತೆ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಸೂಕ್ತತೆಯ ಪ್ರಪಾರೇಶನ್‌ನ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ನಲ್ಲಿನ ಪ್ರಮುಖ ಪೀಕ್‌ನ ಧಾರಣ ಸಮಯದೊಂದಿಗೆ ಪರೀಕ್ಷಾ ತಯಾರಿಕೆಯ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ನಲ್ಲಿನ ಪ್ರಮುಖ ಪೀಕ್‌ನ ಧಾರಣ ಸಮಯವನ್ನು ಹೋಲಿಕೆ ಮಾಡಿ.
ಒಣಗಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ನಷ್ಟ: ಗಾಜಿನಿಂದ ನಿಲ್ಲಿಸಿದ, ಆಳವಿಲ್ಲದ ಬಾಟಲ್ ಅನ್ನು 105±2℃ ನಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಒಣಗಿಸಿ.ಡಿಸಿಕೇಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ ತಣ್ಣಗಾಗಲು ಅನುಮತಿಸಿ.ಸ್ಟಾಪರ್ನೊಂದಿಗೆ ತೂಕದ ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ತೂಕವನ್ನು ರೆಕಾರ್ಡ್ ಮಾಡಿ (W1).ಸುಮಾರು 1 ರಿಂದ 2 ಗ್ರಾಂ ನಿಖರವಾದ ತೂಕದ ಪರೀಕ್ಷಾ ವಸ್ತುವನ್ನು ತೂಕದ ಬಾಟಲಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ.ಮೃದುವಾದ, ಪಕ್ಕಕ್ಕೆ ಅಲುಗಾಡುವ ಮೂಲಕ, ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕವಾಗಿ ಸುಮಾರು 5 ಮಿಮೀ ಆಳಕ್ಕೆ ಸಮವಾಗಿ ವಿತರಿಸಿ.ಲೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ತೂಕದ ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ತೂಕವನ್ನು (W2) ರೆಕಾರ್ಡ್ ಮಾಡಿ.ಲೋಡ್ ಮಾಡಿದ ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ಒಣಗಿಸುವ ಒಲೆಯಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ, ಸ್ಟಾಪರ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಚೇಂಬರ್ನಲ್ಲಿ ಬಿಡಿ.ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಯನ್ನು 105±2℃ ನಲ್ಲಿ 3 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಒಣಗಿಸಿ.ಚೇಂಬರ್ ಅನ್ನು ತೆರೆದ ನಂತರ, ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ತಕ್ಷಣವೇ ಮುಚ್ಚಿ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಡೆಸಿಕೇಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ ಬರಲು ಅನುಮತಿಸಿ.ಸ್ಟಾಪರ್ನೊಂದಿಗೆ ತೂಕದ ಬಾಟಲಿಯನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ತೂಕವನ್ನು (W3) ಮರುಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.ಕೆಳಗಿನ ಸೂತ್ರವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಮಾದರಿಯ ಒಣಗಿಸುವಿಕೆಯ ಶೇಕಡಾವಾರು ನಷ್ಟವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಿ:
ಒಣಗಿಸುವಿಕೆಯ ಮೇಲಿನ ಲೆಕ್ಕಾಚಾರದ ನಷ್ಟ (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
ಎಚ್‌ಪಿಎಲ್‌ಸಿಯಿಂದ ಎನಾಂಟಿಯೋಮರ್ ವಿಷಯ:
ರಾಸಾಯನಿಕ ಮತ್ತು ಕಾರಕಗಳು:
n-ಹೆಕ್ಸಾನ್ AR ದರ್ಜೆ
ಮೆಥನಾಲ್ HPLC ಗ್ರೇಡ್
ಐಸೊಪ್ರೊಪಿಲ್ ಆಲ್ಕೋಹಾಲ್ HPLC ಗ್ರೇಡ್
ಡೈಥೈಲಮೈನ್ ಎಆರ್ ದರ್ಜೆ
ಮಾನದಂಡಗಳು: L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್;L-4-ನೈಟ್ರೊಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl enantiomer ಪ್ರಮಾಣಕ
ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ: n-ಹೆಕ್ಸೇನ್, ಐಸೊಪ್ರೊಪಿಲ್ ಆಲ್ಕೋಹಾಲ್, ಮೆಥನಾಲ್ ಮತ್ತು ಡೈಥೈಲಮೈನ್ (65:20:15:0.1 v/v/v/v) ನ ಏಕರೂಪದ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ
ಖಾಲಿ ತಯಾರಿ: 10-ml ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ನಲ್ಲಿ 2.5ml ಮೆಥನಾಲ್ ಅನ್ನು ವರ್ಗಾಯಿಸಿ, ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದೊಂದಿಗೆ ಪರಿಮಾಣಕ್ಕೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ ಮತ್ತು ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.
ಸಿಸ್ಟಮ್ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ತಯಾರಿ:
ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 10-ml ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ನಲ್ಲಿ L-4-ನೈಟ್ರೊಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಮತ್ತು L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಎನ್‌ಆಂಟಿಯೋಮರ್ ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿ 5 mg ಅನ್ನು ವರ್ಗಾಯಿಸಿ, ಸುಮಾರು 2.5ml ಮೆಥನಾಲ್‌ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಿ, ಮೊಬೈಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪರಿಮಾಣಕ್ಕೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ ಹಂತ ಮತ್ತು ಮಿಶ್ರಣ.
ಪರೀಕ್ಷಾ ತಯಾರಿ:
ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 10-mol ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ನಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 5 mg ಮಾದರಿಯನ್ನು ವರ್ಗಾಯಿಸಿ, ಸುಮಾರು 2.5ml ಮೆಥನಾಲ್ನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಿ, ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದೊಂದಿಗೆ ಪರಿಮಾಣಕ್ಕೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ ಮತ್ತು ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.
ವಾದ್ಯಗಳ ನಿಯತಾಂಕಗಳು:
ಉಪಕರಣ: HPLC ಇಂಜೆಕ್ಟರ್, ಪಂಪ್, UV ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ ಮತ್ತು ರೆಕಾರ್ಡರ್ ಹೊಂದಿದ
ಕಾಲಮ್: ChiralPak-IC (4.6mm x 250mm) 5 μ ಅಥವಾ ಸಮಾನ
ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ: 1.0 ಮಿಲಿ/ನಿಮಿಷ
ತರಂಗಾಂತರ: 260nm
ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಪ್ರಮಾಣ: 10 μL
ಕಾಲಮ್ ಕೋವನ್ ತಾಪಮಾನ: 25℃
ರನ್ ಸಮಯ: 20 ನಿಮಿಷಗಳು
ವಿಧಾನ
ಕೆಳಗಿನ ಅನುಕ್ರಮದಲ್ಲಿ ತಿಳಿಸಿದಂತೆ ಪರಿಹಾರಗಳನ್ನು ಚುಚ್ಚುಮದ್ದು ಮಾಡಿ.ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ಗಳನ್ನು ರೆಕಾರ್ಡ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸಿ:
ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ವಿವರಣೆ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ಮಾನದಂಡಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ
ಖಾಲಿ ತಯಾರಿ 1 L-4-ನೈಟ್ರೊಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಅಥವಾ enantiomer ಧಾರಣ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುವ ಗರಿಷ್ಠವನ್ನು ಗಮನಿಸಬಾರದು.
ಸಿಸ್ಟಮ್ ಸೂಕ್ತತೆ ತಯಾರಿ 1 L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಮತ್ತು enantiomer ಪೀಕ್ ನಡುವಿನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ 2.0 ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿರಬಾರದು
ಪರೀಕ್ಷಾ ತಯಾರಿ 1 ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಎನ್‌ಆಂಟಿಯೋಮರ್ ವಿಷಯವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಪರೀಕ್ಷಾ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿ.
ಸಂಬಂಧಿತ ಧಾರಣ ಸಮಯಗಳು:
L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl 1.0
ಎನಾಂಟಿಯೋಮರ್ ಸುಮಾರು 1.11
L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಧಾರಣ ಸಮಯ ಸುಮಾರು 9.8 ನಿಮಿಷಗಳು.
ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ: ಪರೀಕ್ಷೆಯ ತಯಾರಿಕೆಯಿಂದ ಪಡೆದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ನಲ್ಲಿ, ಎಲ್-4-ನೈಟ್ರೊಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ ಎಚ್‌ಸಿಎಲ್ ಮತ್ತು ಎನಾಂಟಿಯೋಮರ್‌ಗಳನ್ನು ನಿರೀಕ್ಷಿಸುವ ಎಲ್ಲಾ ಶಿಖರಗಳನ್ನು ನಿರ್ಲಕ್ಷಿಸಿ.ಪ್ರದೇಶದ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಣ ವಿಧಾನದ ಮೂಲಕ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಎನ್‌ಆಂಟಿಯೋಮರ್ ವಿಷಯವನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿ.
HPLC ಯಿಂದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಫಿಕ್ ಶುದ್ಧತೆ ಮತ್ತು ಕಲ್ಮಶಗಳು:
ರಾಸಾಯನಿಕ ಮತ್ತು ಕಾರಕಗಳು:
ಡೈಅಮೋನಿಯಮ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಎಆರ್ ಗ್ರೇಡ್
ಫಾಸ್ಪರಿಕ್ ಆಮ್ಲ AR ದರ್ಜೆ
ಮೆಥನಾಲ್ HPLC ಗ್ರೇಡ್
ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ನೀರು
ಮಾನದಂಡಗಳು
L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್
4-ನೈಟ್ರೋ-ಎಲ್-ಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೊನೊಹೈಡ್ರೇಟ್ ಪ್ರಮಾಣಕ
ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ-ಎ
6.6 ಗ್ರಾಂ ಡೈಅಮೋನಿಯಮ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಅನ್ನು 1000 ಮಿಲಿ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಕರಗಿಸಿ.ಫಾಸ್ಪರಿಕ್ ಆಮ್ಲದೊಂದಿಗೆ ಈ ದ್ರಾವಣದ pH ಅನ್ನು 6.0 ಗೆ ಹೊಂದಿಸಿ.ಫಿಲ್ಟರ್ ಮತ್ತು ಡಿಗ್ಯಾಸ್.ದ್ರಾವಣದ pH ಅನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಮೊದಲು, pH ಮೀಟರ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಮಾಣಿತ ಬಫರ್ ಪರಿಹಾರ pH 4.01 ಮತ್ತು 7.00 ನೊಂದಿಗೆ ಮಾಪನಾಂಕ ಮಾಡಿ.
ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ-ಬಿ
ಮೆಥನಾಲ್ HPLC ಗ್ರೇಡ್
ಸಿಸ್ಟಮ್ ಸೂಕ್ತತೆ ತಯಾರಿ
50 ಮಿಲಿ ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ನಲ್ಲಿ L-4-ನೈಟ್ರೊಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಮತ್ತು 4-Nitro-L-ಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೊನೊಹೈಡ್ರೇಟ್ ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಅನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ 25 mg ಅನ್ನು ವರ್ಗಾಯಿಸಿ, ಕರಗಿಸಿ ಮತ್ತು ಮೆಥನಾಲ್ ಮತ್ತು ಮಿಶ್ರಣದೊಂದಿಗೆ ಪರಿಮಾಣಕ್ಕೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ.
ಪರೀಕ್ಷಾ ತಯಾರಿ:
ನಿಖರವಾಗಿ ತೂಕ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಸುಮಾರು 25 ಮಿಗ್ರಾಂ ಮಾದರಿಯನ್ನು 50 ಮಿಲಿ ವಾಲ್ಯೂಮೆಟ್ರಿಕ್ ಫ್ಲಾಸ್ಕ್‌ನಲ್ಲಿ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ, ಕರಗಿಸಿ ಮತ್ತು ಮೆಥನಾಲ್ ಮತ್ತು ಮಿಶ್ರಣದೊಂದಿಗೆ ಪರಿಮಾಣಕ್ಕೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ.
ವಾದ್ಯಗಳ ನಿಯತಾಂಕಗಳು:
ಉಪಕರಣ: HPLC ಇಂಜೆಕ್ಟರ್, ಪಂಪ್, UV ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ ಮತ್ತು ರೆಕಾರ್ಡರ್ ಹೊಂದಿದ
ಕಾಲಮ್: XTerra RP-18 (4.6mm x 150mm) 5 μ ಅಥವಾ ಸಮಾನ
ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ: 1.0 ಮಿಲಿ/ನಿಮಿಷ
ತರಂಗಾಂತರ: 265nm
ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಪ್ರಮಾಣ: 20 μL
ಕಾಲಮ್ ಕೋವನ್ ತಾಪಮಾನ: 25℃
ರನ್ ಸಮಯ: 45 ನಿಮಿಷಗಳು
ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ
ಸಮಯ (ನಿಮಿಷ) ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ-ಎ % ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ-ಬಿ %
0.01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
ವಿಧಾನ:
ಕೆಳಗಿನ ಅನುಕ್ರಮದಲ್ಲಿ ತಿಳಿಸಿದಂತೆ ಪರಿಹಾರಗಳನ್ನು ಚುಚ್ಚುಮದ್ದು ಮಾಡಿ.ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ಗಳನ್ನು ರೆಕಾರ್ಡ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸಿ:
ಖಾಲಿ ತಯಾರಿ 1 L-4-ನೈಟ್ರೊಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಧಾರಣ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುವ ಗರಿಷ್ಠವನ್ನು ಗಮನಿಸಬಾರದು.
ಸಿಸ್ಟಂ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ತಯಾರಿ 1 L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl ಪೀಕ್‌ಗೆ ಟೈಲಿಂಗ್ ಅಂಶವು 2.0 ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿರಬಾರದು
ಪರೀಕ್ಷೆಯ ತಯಾರಿ 1 ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಶುದ್ಧತೆ ಮತ್ತು ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಪರೀಕ್ಷಾ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿ.
ಸಂಬಂಧಿತ ಧಾರಣ ಸಮಯಗಳು:
L-4-ನೈಟ್ರೋಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಮೀಥೈಲ್ ಎಸ್ಟರ್ HCl 1.0 (ಧಾರಣ ಸಮಯ ಸುಮಾರು 11.4 ನಿಮಿಷಗಳು)
4-ನೈಟ್ರೋ-ಎಲ್-ಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ಸುಮಾರು 0.4
ಟೊಲ್ಯೂನ್ ಸುಮಾರು 2.3
ಲೆಕ್ಕಾಚಾರಗಳು:
ಪರೀಕ್ಷೆಯ ತಯಾರಿಕೆಯಿಂದ ಪಡೆದ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್‌ನಲ್ಲಿ, ಖಾಲಿ ತಿದ್ದುಪಡಿಯ ನಂತರ, ಟೊಲುಯೆನ್‌ನಿಂದಾಗಿ ಗರಿಷ್ಠವನ್ನು ನಿರ್ಲಕ್ಷಿಸಿ.ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೊಗ್ರಾಫಿಕ್ ಶುದ್ಧತೆ, 4-ನೈಟ್ರೋ-ಎಲ್-ಫೆನೈಲಾಲನೈನ್ ವಿಷಯ ಮತ್ತು ಪ್ರದೇಶದ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಣ ವಿಧಾನದ ಮೂಲಕ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿನ ಒಟ್ಟು ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿ.