L-4-니트로페닐알라닌 메틸 에스테르 HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl 분석 >98.5% (HPLC) 공장

L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl(H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl)의 분석 방법(CAS: 17193-40-7)
설명: 약 2g의 샘플을 깨끗하고 건조한 페트리 접시에 놓고 샘플의 외관을 관찰합니다.보고: 관찰 보고
확인: HPLC에 의한 크로마토그래피 순도에서 얻은 시스템 적합성 분석의 크로마토그램에서 주요 피크의 유지 시간과 테스트 준비의 크로마토그램에서 주요 피크의 유지 시간을 비교합니다.
건조감량 : 유리마개가 있는 얕은 칭량병을 105±2℃에서 30분간 건조시킨다.데시케이터에서 실온으로 식히십시오.마개가 있는 계량병의 무게를 정확하게 측정하고 무게(W1)를 기록합니다.약 1~2g을 정확히 칭량한 시험물질을 칭량병에 옮긴다.부드럽게 옆으로 흔들어 시험편을 약 5mm 깊이까지 가능한 한 고르게 분배합니다.적재된 계량 병의 무게를 측정하고 무게를 기록합니다(W2).로드된 병을 건조 오븐에 놓고 마개를 제거하고 챔버에도 그대로 둡니다.테스트 샘플을 105±2℃에서 3시간 동안 건조시킨다.챔버를 열면 즉시 병을 닫고 데시케이터에서 실온이 되도록 한다.계량병의 마개를 정확히 달아 무게(W3)를 재기합니다.다음 공식을 사용하여 샘플의 건조 손실률을 계산합니다.
건조 감량 계산(% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
HPLC에 의한 거울상 이성질체 함량:
화학물질 및 시약:
n-헥산 AR 등급
메탄올 HPLC 등급
이소프로필 알코올 HPLC 등급
디에틸아민 AR 등급
표준: L-4-니트로페닐알라닌 메틸 에스테르 HCl 표준;L-4-니트로페닐알라닌 메틸 에스테르 HCl 거울상 이성질체 표준
이동상: n-헥산, 이소프로필 알코올, 메탄올 및 디에틸아민(65:20:15:0.1 v/v/v/v)의 균질 혼합물을 준비합니다.
블랭크 준비: 10ml 부피 플라스크에 2.5ml의 메탄올을 옮기고 이동상으로 부피까지 희석하고 혼합합니다.
시스템 적합성 준비:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 표준품과 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 거울상 이성질체 표준품 각각 약 5 mg을 정확하게 달아 10 ml 메스플라스크에 넣고 메탄올 약 2.5 ml에 녹인 후 이동기로 묽힌다. 단계와 혼합.
시험 준비:
시료 약 5 mg을 정확하게 달아 10 mol 부피 플라스크에 옮기고 약 2.5 ml의 메탄올에 녹이고 이동상으로 희석하여 혼합합니다.
기기 매개변수:
기기: 인젝터, 펌프, UV 검출기 및 레코더가 장착된 HPLC
컬럼: ChiralPak-IC(4.6mm x 250mm) 5μ 또는 등가물
유속: 1.0ml/분
파장: 260nm
주입량: 10μL
컬럼 코벤 온도: 25℃
실행 시간: 20분
절차
다음 순서에 따라 용액을 주입합니다.크로마토그램을 기록하고 기준을 확인합니다.
주사 설명 주사 횟수 기준
블랭크 제조 1 L-4-니트로페닐알라닌 메틸 에스테르 HCl 또는 거울상 이성질체의 머무름 시간에 간섭 피크가 관찰되지 않아야 합니다.
시스템 적합성 준비 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl과 거울상 이성질체 피크 간의 분리능은 2.0 이상이어야 함
테스트 준비 1 테스트 크로마토그램을 사용하여 샘플의 거울상 이성질체 함량을 결정합니다.
상대적 보유 시간:
L-4-니트로페닐알라닌 메틸 에스테르 HCl 1.0
에난티오머 약 1.11
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl의 머무름 시간은 약 9.8분입니다.
계산: 테스트 준비에서 얻은 크로마토그램에서 L-4-니트로페닐알라닌 메틸 에스테르 HCl 및 거울상 이성질체를 예상하는 모든 피크를 무시합니다.영역 정규화 방법으로 샘플의 거울상 이성질체 함량을 보고합니다.
HPLC에 의한 크로마토그래피 순도 및 불순물:
화학물질 및 시약:
인산이암모늄 AR 등급
인산 AR 등급
메탄올 HPLC 등급
정제수
표준
L-4-니트로페닐알라닌 메틸 에스테르 HCl 표준
4-니트로-L-페닐알라닌 일수화물 표준
이동상-A
정제수 1000ml에 인산이암모늄 6.6g을 녹인다.인산으로 이 용액의 pH를 6.0으로 조정합니다.필터 및 가스 제거.용액의 pH를 측정하기 전에 표준 버퍼 용액 pH 4.01 AND 7.00으로 pH 측정기를 보정합니다.
이동상-B
메탄올 HPLC 등급
시스템 적합성 준비
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl standard와 4-Nitro-L-Phenylalanine monohydrate standard 각각 약 25 mg을 정확하게 달아 50 ml 메스플라스크에 넣고 녹이고 메탄올로 희석하여 섞는다.
시험 준비:
정확하게 칭량하고 50ml 메스 플라스크에 약 25mg 샘플을 옮기고 메탄올로 용해하고 부피로 희석하고 혼합합니다.
기기 매개변수:
기기: 인젝터, 펌프, UV 검출기 및 레코더가 장착된 HPLC
컬럼: XTerra RP-18(4.6mm x 150mm) 5μ 또는 등가물
유속: 1.0ml/분
파장: 265nm
주입량: 20μL
컬럼 코벤 온도: 25℃
상영 시간: 45분
그라데이션 프로그램
시간(분) 이동상-A % 이동상-B %
0.01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
절차:
다음 순서에 따라 용액을 주입합니다.크로마토그램을 기록하고 기준을 확인합니다.
Blank 준비 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl의 머무름 시간에 간섭 피크가 관찰되지 않아야 합니다.
시스템 적합성 준비 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 피크의 Tailing factor는 2.0 이상이어야 함
테스트 준비 1 테스트 크로마토그램을 사용하여 크로마토그래피 순도 및 불순물을 확인합니다.
상대적 보유 시간:
L-4-니트로페닐알라닌 메틸 에스테르 HCl 1.0(체류 시간 약 11.4분)
4-니트로-L-페닐알라닌 약 0.4
톨루엔 약 2.3
계산:
시험 준비에서 얻은 크로마토그램에서 바탕 보정 후 톨루엔에 의한 피크는 무시한다.크로마토그래피 순도, 4-Nitro-L-Phenylalanine 함량 및 샘플의 총 불순물을 영역 정규화 방법으로 보고합니다.