Paclitaxel (Taxol) CAS 33069-62-4 분석법 (HPLC) 97.0~102.0%

파클리탁셀
C47H51NO14 853.91
벤젠프로판산, -(벤조일아미노)--히드록시-, 6,12b-비스(아세틸옥시)-12-(벤조일옥시)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b -도데카하이드로-4,11-디하이드록시-4a,8,13,13-테트라메틸-5-옥소-7,11-메타노-1H-사이클로데카[3,4]벤즈[1,2-b]옥세트-9-일 에스테르, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-도데카하이드로-4,6, 9,11,12,12b-헥사하이드록시-4a,8,13,13-테트라메틸-7,11-메타노-5H-사이클로데카[3,4]-벤즈[1,2-b]옥세트-5-온 6, 12b-디아세테이트, 12-벤조에이트, (2R,3S)-N-벤조일-3-페닐이소세린과의 9-에스테르 [33069-62-4].
파클리탁셀은 C47H51NO14를 97.0% 이상 102.0% 이하(무수, 무용매 기준으로 계산) 함유합니다.
[주의-파클리탁셀은 세포 독성이 있습니다.파클리탁셀의 입자를 흡입하여 피부에 노출되지 않도록 각별히 주의해야 합니다.]
포장 및 보관 - 단단하고 차광된 용기에 보관하고 조절된 실온에서 보관하십시오.
라벨링 - 라벨링은 재료를 생산하는 데 사용되는 프로세스 유형과 재료가 준수하는 관련 화합물 테스트를 나타냅니다.
USP 참조 표준 <11>-
USP 내독소 RS
USP Paclitaxel RS 클릭하여 구조 보기
USP 파클리탁셀 관련 화합물 A RS
세팔로만닌.
USP 파클리탁셀 관련 화합물 B RS
10-데아세틸-7-에피파클리탁셀.
USP 파클리탁셀 불순물 혼합물 RS
파클리탁셀과 다음 관련 화합물의 혼합물: 프로필 유사체, 세팔로만닌, sec-부틸 유사체, n-부틸 유사체, 벤질 유사체, 바카틴 VI, 펜틸 유사체 및 7-에피파클리탁셀.
신분증-
A: 적외선 흡수 <197K>.
B: 정량액 크로마토그램의 주피크 유지시간은 정량액 크로마토그램의 주피크 체류시간과 일치한다.
비회전도 781S: 20에서 49.0과 55.0 사이, 무수 용매 기준으로 계산됨.
시험 용액: 메탄올 중 mL당 10mg.
미생물 계수 시험 <61> 및 특정 미생물에 대한 시험 <62> - 총 호기성 미생물 수는 g당 100 cfu를 초과하지 않습니다.황색포도상구균, 슈도모나스 녹농균, 살모넬라 종 및 대장균의 부재에 대한 테스트 요구 사항을 충족합니다.
세균 내독소 85-파클리탁셀 mg당 0.4 USP 내독소 단위 이하를 함유합니다.
물, 방법 Ic <921>: 4.0% 이하.
강열 잔류물 <281>: 0.2% 이하.
중금속, 방법 II <231>: 0.002%.
관련 화합물-
테스트 1(천연 자원에서 분리된 것으로 표시된 재료의 경우) - 재료가 이 테스트를 준수하는 경우 라벨에 USP 관련 화합물 테스트 1을 충족한다고 표시됩니다.
희석제 - 검정의 지시에 따라 준비합니다.
용액 A-여과 및 탈기된 아세토니트릴을 준비합니다.
용액 B - 여과 및 탈기된 물을 준비합니다.
이동상 - 크로마토그래피 시스템에 대한 지침에 따라 용액 A와 용액 B의 가변 혼합물을 사용합니다.필요한 경우 조정합니다(크로마토그래피 621의 시스템 적합성 참조).
시스템 적합성 솔루션 - USP 파클리탁셀 관련 화합물 A RS 및 USP 파클리탁셀 관련 화합물 B RS의 정확한 계량량을 메탄올에 용해하여 알려진 농도가 각각 mL당 약 10µg인 용액을 얻습니다.이 용액 5.0 mL를 50 mL 메스플라스크에 옮기고 희석액으로 표선까지 희석한 후 혼합한다.
표준액-USP 파클리탁셀표준품을 정확히 달아 희석액에 초음파처리하여 녹이고 필요하면 희석액으로 단계적으로 희석하여 약 5 µg/mL의 용액을 얻는다.
테스트 솔루션 - 분석 준비를 사용합니다.
크로마토그래피 시스템(크로마토그래피 <621> 참조) - 액체 크로마토그래피에는 227nm 검출기와 5µm 패킹 L43이 포함된 4.6mm × 25cm 컬럼이 장착되어 있습니다.유속은 분당 약 2.6mL입니다.컬럼 온도는 30으로 유지됩니다. 크로마토그래프는 다음과 같이 프로그래밍됩니다.
시간(분) 용액 A(%) 용액 B(%) 용출
0–35 35 65 등용매
35–60 35®80 65®20 선형 기울기
60–70 80®35 20®65 선형 기울기
70–80 35 65 등용매 시스템 적합성 용액을 크로마토그래피하고 절차에 따라 피크 반응을 기록합니다. 상대 머무름 시간은 파클리탁셀 관련 화합물 A의 경우 약 0.78이고 파클리탁셀 관련 화합물 B의 경우 0.86입니다( 시험 용액);파클리탁셀 관련 화합물 A와 파클리탁셀 관련 화합물 B 사이의 분해능 R은 1.0 이상이다.표준액을 크로마토그래피하고 절차에 따라 피크 반응을 기록한다. 반복 주입에 대한 상대표준편차는 2.0% 이하이다.
절차 - 시험용액 약 15μL를 크로마토그래프에 주입하고 크로마토그램을 기록하고 주요 피크의 면적을 측정한다.다음 공식에 따라 파클리탁셀 부분에서 각 불순물의 백분율을 계산합니다.
100(금 / rU)
여기서 F는 각 불순물 피크에 대한 상대 반응 계수(값은 표 1 참조)입니다.ri는 각각의 개별 불순물에 대한 피크 면적이고;rU는 파클리탁셀의 피크 면적입니다.
1 번 테이블
상대적 보유 시간 상대적 반응 계수(F) 이름 한계(%)
0.24 1.29 바카틴Ⅲ 0.2
0.53 1.00 10-데아세틸파클리탁셀 0.5
0.57 1.00 7-자일로실파클리탁셀 0.2
0.78 1.26 Cephalomannine(파클리탁셀 관련 화합물 A) a11
0.78 1.26 2'',3''-디하이드로세팔로만닌 a21
0.86 1.00 10-데아세틸-7-에피파클리탁셀(파클리탁셀 관련 화합물 B) 0.5
1.10 1.00 벤질 아날로그3 b12
1.10 1.00 3'',4''-데하이드로파클리탁셀 C b22
1.40 1.00 7-에피세팔로만닌 0.3
1.85 1.00 7-에피파클리탁셀 0.5
1 존재하는 상대적인 양에 따라 이러한 피크에 대한 분해능이 불완전할 수 있습니다.a1과 a2의 합은 0.5% 이하입니다.
2 존재하는 상대적인 양에 따라 이러한 피크에 대한 분해능이 불완전할 수 있습니다.b1과 b2의 합은 0.5% 이하입니다.
3 다음 화학명은 관련 화합물, 벤질 유사체에 할당됩니다: (2R,3S)-2-하이드록시-3-페닐-3-(2-페닐아세틸아미노)프로판산을 갖는 Baccatin III 13-에스테르.
표 1의 파클리탁셀 관련 불순물에 대한 한도를 초과하지 않는 것 외에도 다른 단일 불순물이 0.1% 이하로 발견됩니다.총 불순물의 2.0% 이하가 발견됩니다.
테스트 2(반합성 공정으로 생산된 것으로 표시된 재료의 경우) - 재료가 이 테스트를 준수하는 경우 라벨에 USP 관련 화합물 테스트 2를 충족한다고 표시됩니다.
희석제-아세토니트릴 사용.
용액 A - 물과 아세토니트릴(3:2)의 여과 및 탈기 혼합물을 사용합니다.
용액 B - 여과 및 탈기된 아세토니트릴을 사용합니다.
이동상 - 크로마토그래피 시스템에 대한 지침에 따라 용액 A와 용액 B의 가변 혼합물을 사용합니다.필요한 경우 조정합니다(크로마토그래피 621의 시스템 적합성 참조).
시스템 적합성 솔루션 - USP Paclitaxel RS 및 USP Paclitaxel 관련 화합물 B RS의 정확한 계량량을 희석액에 녹이고 필요한 경우 진탕하고 초음파 처리하여 각각 약 0.96 mg 및 0.008 mg/mL의 알려진 농도를 갖는 용액을 얻습니다.
검액-파클리탁셀 약 10mg을 정확히 달아 10mL 메스플라스크에 넣고 희석액으로 적당량을 녹이고 필요하면 흔들어 섞은 후 혼합한다.
크로마토그래피 시스템(크로마토그래피 621 참조) - 액체 크로마토그래프에는 227nm 검출기와 3µm 패킹 L1이 포함된 4.6mm × 15cm 컬럼이 장착되어 있습니다.유속은 분당 약 1.2mL입니다.컬럼 온도는 35로 유지됩니다. 크로마토그래프는 다음과 같이 프로그래밍됩니다.
시간(분) 용액 A(%) 용액 B(%) 용출
0-20 100 0 등용매
20-60 100®10 0®90 선형 기울기
60-62 10®100 90®0 선형 기울기
62-70 100 0 시스템 적합성 용액을 등용매 크로마토그래피하고 절차에 따라 피크 반응을 기록합니다. 상대 머무름 시간은 파클리탁셀 관련 화합물 B의 경우 약 0.94이고 파클리탁셀의 경우 1.0입니다.파클리탁셀 관련 화합물 B와 파클리탁셀 사이의 분해능 R은 1.2 이상이고;반복 주입에 대한 상대 표준 편차는 2.0% 이하입니다.
조작-희석액과 검액을 각각 동량(약 15μL)을 크로마토그래프에 각각 주입하여 크로마토그램을 기록하고 모든 피크의 면적을 측정한다.희석액으로 인한 피크는 무시하십시오.다음 공식에 따라 파클리탁셀 부분에서 각 불순물의 백분율을 계산합니다.
100(금/금)
여기서 F는 각 불순물에 대한 상대 반응 계수(값은 표 2 참조)입니다.ri : 검액에서 얻은 각 불순물의 피크면적rs는 검액에서 얻은 모든 피크의 면적의 합이다.
표 2
상대적 보유 시간 상대적 반응 계수(F) 이름 한계(%)
0.11 1.24 10-데아세틸바카틴 III 0.1
0.20 1.29 바카틴Ⅲ 0.2
0.42 1.39 광분해제2 0.1
0.47 1.00 10-데아세틸파클리탁셀 0.5
0.80 1.00 2-데벤조일파클리탁셀-2-펜테노에이트 0.7
0.921 1.00 옥세탄 고리 열림, 아세틸 및 벤조일 이동2 x1
0.921 1.00 10-아세토아세틸파클리탁셀 x2
0.941 1.00 10-데아세틸-7-에피파클리탁셀(파클리탁셀 관련 화합물 B) x3
1.37 1.00 7-에피파클리탁셀 0.4
1.45 1.00 10,13-비스사이드체인파클리탁셀2 0.5
1.54 1.00 7-아세틸파클리탁셀 0.6
1.80 1.75 13-테스-바카틴 III 0.1
2.14 1.00 7-테스-파클리탁셀 0.3
1 존재하는 상대적인 양에 따라 이러한 피크에 대한 분해능이 불완전할 수 있습니다.x1, x2 및 x3의 합은 0.4% 이하입니다.
2 관련 화합물인 광분해제에는 다음 화학명이 지정됩니다.옥세탄 고리 열림, 아세틸 및 벤조일 이동;및 10,13-비사이드체인파클리탁셀:
광분해제
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-디아세틸옥시-5,13-디히드록시-4,16,17,17-테트라메틸-8-옥사- 3-옥소-12-페닐카르보닐옥시펜타시클로[11.3.1.01,11.04,11.07,10]헵타덱-15-일
(2R,3S)-2-히드록시-3-페닐-3-(페닐카르보닐아미노)프로파노에이트
옥세탄 고리 열림, 아세틸 및 벤조일 이동
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-디아세틸옥시-1,2,4,7-테트라히드록시-8,12,15,15-테트라메틸-9-옥소- 4-(페닐카르보닐옥시메틸)트리시클로[9.3.1.03,8]펜타덱-11-엔-13-일
(2R,3S)-2-히드록시-3-페닐-3-(페닐카르보닐아미노)프로파노에이트
10,13-비스사이드체인파클리탁셀
Baccatin III 13-ester with (2R,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino)propanoic acid, 10-에스테르 with (2S,3S)-2-hydroxy-3-phenyl-3-(phenylcarbonylamino) )프로판산
표 2의 파클리탁셀 관련 불순물에 대한 한도를 초과하지 않는 것 외에도 다른 단일 불순물이 0.1% 이하로 발견됩니다.총 불순물의 2.0% 이하가 발견됩니다.
테스트 3(식물 세포 발효 공정에 의해 생산된 것으로 표시된 물질의 경우) - 물질이 이 테스트를 준수하는 경우 라벨에 USP 관련 화합물 테스트 3을 충족한다고 표시됩니다.
솔루션 A - 물과 아세토니트릴(3:2)의 여과 및 탈기 혼합물을 준비합니다.
솔루션 B - 여과 및 탈기된 아세토니트릴을 준비합니다.
이동상 - 크로마토그래피 시스템에 대한 지침에 따라 용액 A와 용액 B의 가변 혼합물을 사용합니다.필요한 경우 조정합니다(크로마토그래피 621의 시스템 적합성 참조).
시스템 적합성 용액 - 필요한 경우 초음파 처리하여 아세토니트릴에 USP Paclitaxel Impurity Mixture RS를 용해하여 알려진 농도가 mL당 약 1mg인 용액을 얻습니다.
표준용액 - USP Paclitaxel RS를 정확히 달아 아세토니트릴에 녹이고 필요하면 초음파 처리하여 농도가 약 1 mg/mL인 용액을 얻는다.
검액-파클리탁셀 약 10mg을 정확히 달아 10mL 메스플라스크에 옮긴다.필요한 경우 아세토니트릴을 사용하여 용해 및 희석하고, 초음파 처리하고 혼합합니다.
크로마토그래피 시스템(크로마토그래피 621 참조) - 액체 크로마토그래프에는 227nm 검출기와 3µm 패킹 L1이 포함된 4.6mm × 15cm 컬럼이 장착되어 있습니다.유속은 분당 약 1.2mL입니다.크로마토그래프는 다음과 같이 프로그래밍됩니다.
시간(분) 용액 A(%) 용액 B(%) 용출
0-28 100 0 등용매
28-33 100®98 0®2 선형 기울기
33–58 98®10 2®90 선형 기울기
58-60 10 90 등용매
60-63 10®100 90®0 선형 기울기
63-70 100 0 시스템 적합성 용액을 등용매 크로마토그래피하고 절차에 따라 피크 반응을 기록합니다. 파클리탁셀과 벤질 유사체 사이의 분해능 R은 1.8 이상입니다.표준액을 크로마토그래피하고 절차에 따라 피크 반응을 기록한다. 반복 주입에 대한 상대표준편차는 2.0% 이하이다.[주 - 피크 식별을 위해 대략적인 상대적 머무름 시간이 표 3에 나와 있습니다. 상대적인 머무름 시간은 Paclitaxel에 대해 측정됩니다.]
표 3
이름 상대적 보유 기간(%)
프로필 아날로그1 0.54 0.2
Cephalomannine (Paclitaxel 관련 화합물 A) 0.76 0.5
sec-부틸 아날로그2 0.81 0.2
n-부틸 아날로그3 0.89 0.1
벤질 아날로그 1.10 0.4
바카틴 VI 1.23 0.2
펜틸 아날로그4 1.31 0.2
7-에피파클리탁셀 1.51 0.4
1 다음 화학명은 관련 화합물인 프로필 유사체에 할당됩니다.
2 관련 화합물 sec-부틸 유사체에 다음 화학명이 지정됩니다.
3 관련 화합물 n-부틸 유사체에 다음 화학명이 지정됩니다.
4 다음 화학명은 관련 화합물 펜틸 유사체에 지정됩니다: Baccatin III 13-ester with (2R,3S)-3-(hexanoylamino)-2-hydroxy-3-phenylpropanoic acid.
조작-크로마토그래프에 시험용액 약 12μL를 주입하고 크로마토그램을 기록하여 모든 피크의 면적을 측정한다.다음 공식에 따라 파클리탁셀 부분에서 각 불순물의 백분율을 계산합니다.
100(ri / rU)
여기서 ri는 각 개별 불순물의 반응이고;rU는 검액에서 얻은 모든 피크의 면적의 합이다.표 3의 파클리탁셀 관련 불순물에 대한 한도를 초과하지 않는 것 외에도 다른 단일 불순물이 0.1% 이하로 발견됩니다.총 불순물의 2.0% 이하가 발견됩니다.
시험-
희석제 - 메탄올과 아세트산의 혼합물(200:1)을 준비합니다.
이동상 - 물과 아세토니트릴(11:9)의 여과 및 탈기 혼합물을 준비합니다.필요한 경우 조정합니다(크로마토그래피 621의 시스템 적합성 참조).
표준품 - USP Paclitaxel RS를 필요하면 초음파 처리를 이용하여 희석액에 정확히 달아 녹이고 필요한 경우 희석액을 사용하여 단계적으로 희석하여 농도가 약 1 mg/mL인 용액을 얻는다.
분석 준비 - 약 10mg의 Paclitaxel을 정확하게 달아서 10mL 부피 플라스크에 옮깁니다.필요한 경우 초음파 처리를 사용하여 희석액에 용해하고 희석액으로 부피를 희석하고 혼합합니다.
크로마토그래피 시스템(크로마토그래피 <621> 참조) - 액체 크로마토그래피에는 227nm 검출기와 5µm 패킹 L43이 포함된 4.6mm × 25cm 컬럼이 장착되어 있습니다.유속은 분당 약 1.5mL입니다.표준품을 크로마토그래피하고 절차에 따라 피크 반응을 기록합니다. 테일링 인자는 0.7과 1.3 사이입니다.반복 주사에 대한 상대 표준 편차는 1.5% 이하입니다.
절차 - 표준품과 검정용액을 같은 양(약 10μL)씩 크로마토그래프에 각각 주입하고 크로마토그램을 기록하고 주요 피크의 면적을 측정합니다.다음 공식에 따라 파클리탁셀 부분에서 C47H51NO14의 양(mg)을 계산하십시오.
10C(rU / rS)
여기서 C는 표준품의 USP Paclitaxel RS의 농도(mg/mL)입니다.rU 및 rS는 각각 Assay 준비 및 표준 준비에서 얻은 paclitaxel에 대한 피크 응답입니다.