L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Assay >98,5% (HPLC) Factory

L-4-нитрофенилаланин метил эфирин анализдөө ыкмасы HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Сүрөттөмө: болжол менен 2 г үлгүнү таза жана кургак петри идишке салып, үлгүнүн көрүнүшүн байкаңыз.Кабарлоо: Байкоо жөнүндө кабарлоо
Идентификациялоо: HPLC аркылуу хроматографиялык тазалыкта алынган системанын ылайыктуулугун даярдоонун хроматограммасындагы негизги чокунун кармалып калуу убактысы менен тесттик препараттын хроматограммасында негизги чокунун кармалуу убактысын салыштырыңыз.
Кургатуудагы жоготуу: Айнек жабылган, тайыз таразалуу бөтөлкөнү 105±2℃ температурада 30 мүнөт кургатыңыз.Аны эксикатордо бөлмө температурасына чейин муздатыңыз.Тараза бөтөлкөсүн тыгыны менен так таразага тартып, салмагын жазып алыңыз (W1).Болжол менен 1ден 2гга чейинки так өлчөнгөн тесттик затты тараза бөтөлкөсүнө куюңуз.Сыноо үлгүсүн жумшак, капталдан чайкап, 5 ммдей тереңдикке мүмкүн болушунча бирдей таратыңыз.Жүктөлгөн тараза бөтөлкөсүн таразага тартып, салмагын жазыңыз (W2).Жүктөлгөн бөтөлкөнү кургаткыч мешке салып, тыгынды алып, аны камерада да калтырыңыз.Сыноо үлгүсүн 105±2℃ температурада 3 саат кургатыңыз.Камераны ачкандан кийин, бөтөлкөнү дароо жаап, эксикатордо бөлмө температурасына чейин жеткириңиз.Тараза бөтөлкөсүн тыгыны менен так таразага тартып, салмагын кайра коюңуз (W3).Үлгүнү кургатуудагы жоготууларды төмөнкү формула менен эсептеңиз:
Кургатуудагы жоготууларды эсептөө (% ж/ж)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
HPLC тарабынан энантиомердин мазмуну:
Химиялык жана реагенттер:
n-Hexane AR классы
Метанол HPLC классы
Изопропил спирти HPLC классы
Диэтиламин AR классы
Стандарттар: L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl стандарты;L-4-Nitrophenylalanine Метил Эстер HCl энантиомер стандарты
Мобилдик фаза: n-гександын, изопропил спиртинин, метанолдун жана диэтиламиндин бир тектүү аралашмасын даярдаңыз (65:20:15:0,1 v/v/v/v)
Бош даярдоо: 2,5 мл метанолду 10 мл өлчөмдүү колбага куюп, мобилдик фаза менен көлөмгө чейин суюлтуңуз жана аралаштырыңыз.
Системанын ылайыктуулугун даярдоо:
Так таразалап, L-4-нитрофенилаланин метил эфиринин HCl стандартынын жана L-4-нитрофенилаланин метил эфиринин HCl стандартынын 5 мг-га жакынын 10 мл өлчөмдүү колбага өткөрүп, 2,5 мл метанолдо эритип, мобилдик аппарат менен көлөмгө чейин суюлтуңуз. фаза жана аралаштыруу.
Сынакка даярдоо:
Так таразалап, 5 мгга жакын үлгүнү 10 моль өлчөмдүү колбага салып, болжол менен 2,5 мл метанолдо эритип, кыймылдуу фаза менен көлөмгө чейин суюлтуңуз жана аралаштырыңыз.
Инструменталдык параметрлер:
Инструмент: HPLC инжектор, насос, UV детектору жана жазгыч менен жабдылган
Мамыча: ChiralPak-IC (4,6 мм x 250 мм) 5 μ же эквиваленти
Агым ылдамдыгы: 1,0 мл/мүнөт
Толкун узундугу: 260нм
Инъекциянын көлөмү: 10 мкл
Мамычанын температурасы: 25℃
Иштөө убактысы: 20 мүнөт
Процедура
Төмөнкү ырааттуулукта айтылгандай эритмелерди сайыңыз.Хроматограммаларды жазыңыз жана критерийлерди ырастаңыз:
Инъекциялардын сүрөттөлүшү Инъекциялардын саны Критерийлер
Бланк даярдоо 1 L-4-Нитрофенилаланин метил эфири HCl же энантиомерди кармап туруу убагында эч кандай тоскоолдуктун чокусу байкалбашы керек.
Системанын ылайыктуулугун даярдоо 1 L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl менен энантиомер чокусунун ортосундагы резолюция 2.0 кем эмес болушу керек.
Сыноого даярдоо 1 Үлгүдөгү энантиомерлердин мазмунун аныктоо үчүн сыноо хроматограммасын колдонуңуз.
Салыштырмалуу сактоо убакыттары:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0
Энантиомер 1.11 жөнүндө
L-4-Nitrophenylalanine Метил Эстер HCl кармоо убактысы болжол менен 9,8 мүнөт.
Эсептөө: Сыноого даярдоодон алынган хроматограммада L-4-Нитрофенилаланин метил эфири HCl жана энантиомерди күткөн бардык чокуларды эске албоо керек.Аймакты нормалдаштыруу ыкмасы боюнча үлгүдөгү энантиомердин мазмунун кабарлаңыз.
HPLC боюнча хроматографиялык тазалык жана аралашмалар:
Химиялык жана реагенттер:
Диаммоний фосфат AR класс
Фосфор кислотасы AR классы
Метанол HPLC классы
Тазаланган суу
Стандарттар
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl стандарты
4-Nitro-L-Phenylalanine моногидрат стандарты
Мобилдик фаза-А
6,6 г диаммоний фосфатын 1000 мл тазаланган сууга эритүү.Бул эритменин рНын Phosphoric кислотасы менен 6,0ге тууралаңыз.Чыпкалоо жана газсыздандыруу.Эритменин рНын өлчөөдөн мурун рН метрди стандарттык буфердик эритме pH 4.01 ЖАНА 7.00 менен калибрлеңиз.
Мобилдик фаза-B
Метанол HPLC классы
Системанын ылайыктуулугун даярдоо
Так таразалап, L-4-Нитрофенилаланин метил эфиринин HCl стандартынын жана 4-Нитро-Л-фенилаланин моногидратынын стандартынын ар бирин 25 мг га жакынын 50 мл өлчөмдүү колбага салып, эритип, метанол менен көлөмгө чейин суюлтуңуз жана аралаштырыңыз.
Сынакка даярдоо:
Так өлчөп, болжол менен 25 мг үлгүнү 50 мл өлчөөчү колбага салып, эритип, метанол менен көлөмгө чейин суюлтуңуз жана аралаштырыңыз.
Инструменталдык параметрлер:
Инструмент: HPLC инжектор, насос, UV детектору жана жазгыч менен жабдылган
Мамыча: XTerra RP-18 (4,6 мм x 150 мм) 5 μ же эквиваленти
Агым ылдамдыгы: 1,0 мл/мүнөт
Толкун узундугу: 265нм
Инъекциянын көлөмү: 20 мкл
Мамычанын температурасы: 25℃
Убакыт: 45 мүнөт
Градиент программасы
Убакыт (мүнөт) Мобилдик фаза-А % Мобилдик фаза-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Процедура:
Төмөнкү ырааттуулукта айтылгандай эритмелерди сайыңыз.Хроматограммаларды жазыңыз жана критерийлерди ырастаңыз:
Бланк даярдоо 1 L-4-нитрофенилаланин метил эфири HCl кармалып турган убакта эч кандай тоскоолдуктун чокусу байкалбашы керек.
Системанын ылайыктуулугун даярдоо 1 L-4-Нитрофенилаланин метил эфири HCl чокусу үчүн калдык фактору 2,0 кем эмес болушу керек.
Сыноого даярдоо 1 Хроматографиялык тазалыкты жана аралашмаларды аныктоо үчүн сыноо хроматограммасын колдонуңуз.
Салыштырмалуу сактоо убакыттары:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1,0 (сактоо убактысы болжол менен 11,4 мүнөт)
4-Nitro-L-Phenylalanine 0,4 жөнүндө
Толуол жөнүндө 2.3
Эсептөөлөр:
Сыноо даярдоодон алынган хроматограммада, бош коррекциялангандан кийин толуолдон улам чокуга көңүл бурбаңыз.Хроматографиялык тазалык, 4-Nitro-L-Phenylalanine мазмуну жана үлгүдөгү жалпы аралашмаларды аймакты нормалдаштыруу ыкмасы менен билдириңиз.