Orlistat CAS 96829-58-2 API svorio netekimo vaisto grynumas 98,0–101,5 %

Orlistatas
C29H53NO5 495,73
l-leucinas, N-formil-, 1-[(3-heksil-4-okso-2-oksetanil)metil]dodecilo esteris, [2S-[2(R*), 3]]-;
N-formil-l-leucinas, esteris su (3S,4S)-3-heksil-4-[(2S)-2-hidroksitridecil]-2-oksetanonu [96829-58-2].
APIBRĖŽIMAS
Orlistato sudėtyje yra 98,0 % NLT ir 101,5 % NMT C29H53NO5, skaičiuojant bevandenei, be tirpiklių.
IDENTIFIKAVIMAS
• A. Infraraudonųjų spindulių sugertis <197M>
• B. Mėginio tirpalo pagrindinės smailės sulaikymo laikas atitinka standartinio tirpalo sulaikymo trukmę, gautą atliekant tyrimą.
TYRIMAS
• Procedūra
[Pastaba. Šioje analizėje nenaudokite plastikinių kolbų bet kokiam tirpalui ruošti arba laikyti.]
Judanti fazė: acetonitrilas, fosforo rūgštis ir vanduo (860:0,05:140)
Standartinis tirpalas: 0,5 mg/mL USP Orlistat RS mobiliojoje fazėje.Sušvirkškite iš karto po paruošimo arba laikykite 5.
Mėginio tirpalas: 0,5 mg/mL orlistato mobiliojoje fazėje.Sušvirkškite iš karto po paruošimo arba laikykite 5.
Chromatografinė sistema
(Žr. Chromatografija <621>, Sistemos tinkamumas.)
Režimas: LC
Detektorius: UV 195
Stulpelis: 3,9 mm × 15 cm;4-µm įpakavimas L1
Srauto greitis: 1,0 ml/min
Įpurškimo dydis: 20 µL
Sistemos tinkamumas
Pavyzdys: standartinis tirpalas
Tinkamumo reikalavimai
Santykinis standartinis nuokrypis: NMT 2,0 %
Analizė
Mėginiai: standartinis tirpalas ir mėginio tirpalas
Apskaičiuokite orlistato (C29H53NO5) procentinę dalį paimtoje orlistato porcijoje:
Rezultatas = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = didžiausias atsakas iš mėginio tirpalo
rS = didžiausias atsakas iš standartinio tirpalo
CS = USP Orlistat RS koncentracija standartiniame tirpale (mg/mL)
CU = orlistato koncentracija mėginio tirpale (mg/mL)
Priėmimo kriterijai: 98,0–101,5 % bevandenei, be tirpiklių
PRIĖMOS
Neorganinės priemaišos
• Uždegimo likutis <281>: NMT 0,1 %
• Sunkieji metalai, II metodas <231>: 20 ppm
Organinės priemaišos
• 1 procedūra: su orlistatu susijusio junginio A riba
Standartinis tirpalas: 0,1 mg/mL su USP orlistatu susijusio junginio A RS acetone
Mėginio tirpalas: 50 mg/mL orlistato acetone
Chromatografinė sistema
(Žr. Chromatografija <621>, plonasluoksnė chromatografija.)
Režimas: TLC
Adsorbentas: 0,25 mm chromatografinio silikagelio mišinio sluoksnis
Naudojimo tūris: 10 µL
Kūrimo tirpiklių sistema: toluenas ir etilo acetatas (4:1)
Aptikimo tirpalas: 2,5 g fosfomolibdo rūgšties ir 1 g cerric sulfato įpilkite į 100 ml matavimo kolbą, ištirpinkite ir praskieskite metanoliu iki žymės.
Analizė
Mėginiai: standartinis tirpalas ir mėginio tirpalas
Nuimkite plokštę ir gerai išdžiovinkite ore.Išdžiovintą plokštelę apipurkškite Detection tirpalu ir 30 min padėkite į 120 laipsnių orkaitę.
Priėmimo kriterijai: bet kokia antrinė dėmelė iš mėginio tirpalo, atitinkanti su orlistatu susijusį junginį A, nėra intensyvesnė už atitinkamą dėmę iš standartinio tirpalo (0,2 %).
• 2 procedūra: su orlistatu susijusio junginio B riba
Standartinis tirpalas: 0,025 mg/mL su USP orlistatu susijusio junginio B RS metileno chloride
Mėginio tirpalas: 50 mg/mL orlistato metileno chloride
Mėginio tirpalas: 50 mg/mL orlistato standartiniame tirpale
Chromatografinė sistema
(Žr. Chromatografija <621>, Sistemos tinkamumas.)
Režimas: GC
Detektorius: liepsnos jonizacija
Kolonėlė: 0,32 mm x 30 m lydytas silicio dioksidas, padengtas 0,25 µm G27 stacionaria faze
Kolonėlės temperatūra: žr. toliau pateiktą temperatūros programos lentelę.
Pradinė temperatūra () Temperatūros rampa (/min.) Galutinė temperatūra () Laikymo laikas galutinėje temperatūroje (min.)
50 4 170 -
170 30 300 30
Temperatūra
Purkštukas: 270
Detektorius: 280
Nešančiosios dujos: helis
Srauto greitis: 30 ml/min
Padalijimo santykis: 10:1
Įpurškimo dydis: 2 µL
Sistemos tinkamumas
Pavyzdys: standartinis tirpalas
Tinkamumo reikalavimai
Santykinis standartinis nuokrypis: NMT 10,0 %
Analizė
Mėginiai: Mėginio tirpalas ir Spiked mėginio tirpalas
Apskaičiuokite su orlistatu susijusio junginio B procentinę dalį paimtoje orlistato dalyje:
Rezultatas = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = didžiausias su orlistatu susijusio junginio B atsakas iš mėginio tirpalo
rSP = su orlistatu susijusio junginio B didžiausias atsakas iš Spiked mėginio tirpalo
CS = su USP orlistatu susijusio junginio B RS koncentracija standartiniame tirpale (mg/mL)
CT = orlistato koncentracija spygliuotame mėginio tirpale (mg/mL)
Priėmimo kriterijai: NMT randama 0,05 % su orlistatu susijusio junginio B.
• 3 procedūra
[Pastaba. Šioje analizėje nenaudokite plastikinių kolbų bet kokiam tirpalui ruošti arba laikyti.]
Judanti fazė, standartinis tirpalas ir mėginio tirpalas: Paruoškite, kaip nurodyta tyrime.
Sistemos tinkamumo tirpalas: 10 µg/mL USP Orlistat RS, 0,1 µg/mL su USP Orlistatu susijusio junginio C RS ir 0,25 µg/mL su USP Orlistatu susijusio junginio D RS judrioje fazėje
Chromatografinė sistema
(Žr. Chromatografija <621>, Sistemos tinkamumas.)
Tęskite taip, kaip nurodyta tyrime, išskyrus sistemos tinkamumo tirpalo chromatografiją.
Sistemos tinkamumas
Pavyzdys: sistemos tinkamumo sprendimas
Tinkamumo reikalavimai
Signalo ir triukšmo santykis: NLT 3 su orlistatu susijusio junginio C ir su orlistatu susijusio junginio D smailėmis
Santykinis standartinis nuokrypis: NMT 10,0 % orlistato smailei
Analizė
Mėginiai: standartinis tirpalas ir mėginio tirpalas
Apskaičiuokite kiekvienos priemaišos procentinę dalį paimtoje Orlistato porcijoje:
Rezultatas = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = didžiausias atsakas kiekvienai priemaišai iš mėginio tirpalo
rS = didžiausias USP Orlistat RS atsakas iš standartinio tirpalo
CS = USP Orlistat RS koncentracija standartiniame tirpale (mg/mL)
CU = orlistato koncentracija mėginio tirpale (mg/mL)
F = santykinis atsako koeficientas, kaip nurodyta 1 priemaišų lentelėje
Priėmimo kriterijai: žr. 1 priemaišų lentelę.
1 priemaišų lentelė
Pavadinimas Santykinis saugojimo laikas Santykinio atsako faktoriaus priėmimo kriterijai, NMT (%)
Formylleucinea 0,10 4,0 0,2
Su orlistatu susijęs junginys C 0,13 33 0,05
Orlistatas atviro žiedo epimerbas 0,44 1,0 0,2
Su orlistatu susijęs junginys D* 0,90 – Apskaičiuota
4 procedūra
Orlistato atviro žiedo amidekas* 0,90 – Skaičiuojama in
4 procedūra
Orlistatas 1,00 - -
d-leucino orlistatas 1,18 1,0 0,2
Atskira neidentifikuota priemaiša - 1,0 0,1
* Koeliutai šioje LC sistemoje, nustatyti taikant 4 procedūrą.
N-formil-l-leucinas.
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-formilamino-4-metil-pentanoiloksi]-2-heksil-3-hidroksi-heksadekano rūgštis.
c N-formil-l-leucino (S)-1-[(2S,3S)-2-hidroksi-3-[1-fenil-R-etilkarbomoil]nonil]-dodecilo esteris.
d N-formil-d-leucino (S)-1-[[(2S,3S)-3-heksil-4-okso-2-oksetanil]metil]dodecilo esteris arba enantiomeras.
• 4 procedūra: su orlistatu susijusio junginio D riba
Judanti fazė: metanolis ir vanduo (83:17)
Sistemos tinkamumo tirpalas: atitinkamai 4 mg/mL USP Orlistat RS ir 2,4 µg/mL su USP Orlistatu susijusio junginio D RS acetonitrile.
Standartinis tirpalas: 5,0 mg/mL USP Orlistat RS acetonitrile
Mėginio tirpalas: 5,0 mg/mL orlistato acetonitrile
Chromatografinė sistema
(Žr. Chromatography 621, System Suitability.)
Režimas: LC
Detektorius: 205 nm
Stulpelis: 4,0 mm × 25 cm;5-µm įpakavimas L7
Srauto greitis: 0,6 ml/min
Įpurškimo dydis: 20 µL
Sistemos tinkamumas
Pavyzdys: sistemos tinkamumo sprendimas
Tinkamumo reikalavimai
Signalo ir triukšmo santykis: NLT 3 su orlistatu susijusio junginio D smailei
Santykinis standartinis nuokrypis: NMT 10,0 % orlistato smailei
Analizė
Mėginiai: standartinis tirpalas ir mėginio tirpalas
Apskaičiuokite kiekvienos priemaišos procentinę dalį paimtoje Orlistato porcijoje:
Rezultatas = (rU/rS) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = didžiausias atsakas kiekvienai priemaišai iš mėginio tirpalo
rS = didžiausias USP Orlistat RS atsakas iš standartinio tirpalo
CS = USP Orlistat RS koncentracija standartiniame tirpale (µg/mL)
CU = orlistato koncentracija mėginio tirpale (µg/mL)
F = santykinis atsako koeficientas, gautas 2 priemaišų lentelėje
Priėmimo kriterijai: žr. 2 priemaišų lentelę.
2 priemaišų lentelė
Pavadinimas Santykinis saugojimo laikas Santykinio atsako faktoriaus priėmimo kriterijai, NMT (%)
Su orlistatu susijęs junginys D 0,94 1,0 0,2
Orlistatas 1,00 - -
Orlistatas atviro žiedo amidas 1,25 4,3 0,1
N-formil-l-leucino (S)-1-[(2S,3S)-2-hidroksi-3-[1-fenil-R-etilkarbomoil]nonil]-dodecilo esteris.
• 5 procedūra: su orlistatu susijusio junginio E riba
Buferis: 0,4 N borato tirpalas, sureguliuotas iki 10,2 pH
Derivitizuojanti medžiaga: o-ftaldehido (OPA) tirpalas.[Pastaba. Jei negalima gauti komerciškai, derivitizuojantį agentą galima paruošti 1% 3-merkaptopropiono rūgšties ir o-ftaldialdehido 0,4 M borato buferiniame tirpale.]
A tirpalas: 4,1 g natrio acetato trihidrato ir 40 mg etilendiaminotetraacto rūgšties (EDTA) supilkite į 1 l matavimo kolbą.Ištirpinkite 950 ml vandens ir sureguliuokite 0,1 N natrio hidroksido pH iki 7,2.Praskieskite vandeniu iki žymės, įpilkite 2,5 ml tetrahidrofurano ir sumaišykite.Filtras ir degazavimas.
B tirpalas: 2,7 g natrio acetato trihidrato ir 40 mg EDTA įpilkite į 1 l matavimo kolbą.Ištirpinkite 200 ml vandens ir sureguliuokite 0,1 N natrio hidroksido pH iki 7,2.Įpilkite 800 ml acetonitrilo, filtruokite ir išdujinkite.
Judanti fazė: žr. toliau pateiktą gradiento lentelę.
Laikas (min.) A tirpalas (%) tirpalas B (%)
0 96,7 3.3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96,7 3.3
45 96,7 3.3
Standartinis tirpalas: perkelkite pasvertą apie 0,2 mg USP Orlistatu susieto junginio E RS kiekį į 20 ml talpos buteliuką.Įpilkite 10 ml 4 N natrio hidroksido ir uždarykite buteliuką.Buteliuką kaitinkite iki 100 laipsnių 1 valandą, tada leiskite atvėsti iki kambario temperatūros.Įpilkite 2 ml gauto tirpalo į 50 ml matavimo kolbą ir praskieskite vandeniu iki žymės.Į 0,5 ml šio tirpalo įpilkite 2,0 ml buferio ir 0,5 ml darinio agento.
Tirpalo mėginys: Tęskite, kaip nurodyta standartiniam tirpalui, bet vietoj to naudokite 25 mg orlistato, kad pakeistumėte 0,2 mg USP Orlistatu susijusį junginį E RS.
Chromatografinė sistema
(Žr. Chromatografija <621>, Sistemos tinkamumas.)
Režimas: LC
Detektorius: Fluorescencija 340 nm (sužadinimas);450 nm (emisija)
Stulpeliai
Apsauga: 2,1 mm × 2 cm;50 µm įpakavimas L1
Analitinis: 2,1 mm × 20 cm;pakuotė L1
Srauto greitis: 0,5 ml/min
Įpurškimo dydis: 20 µL
Sistemos tinkamumas
Pavyzdys: standartinis tirpalas
Tinkamumo reikalavimai
Santykinis standartinis nuokrypis: NMT 6,0 % su orlistatu susijusio junginio E smailės
Analizė
Mėginiai: standartinis tirpalas ir mėginio tirpalas
Apskaičiuokite šios priemaišos procentinę dalį paimtoje Orlistato porcijoje:
Rezultatas = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = didžiausias atsakas su orlistatu susijusiam junginiui E mėginio tirpale
rS = didžiausias atsakas su USP orlistatu susijusiam junginiui E RS standartiniame tirpale
CS = su USP orlistatu susijusio junginio E RS koncentracija standartiniame tirpale (mg/mL)
CU = orlistato koncentracija mėginio tirpale (mg/mL)
Priėmimo kriterijai
Individuali priemaiša: NMT randama 0,2% orlistato giminingo junginio E.
Bendros priemaišos: NMT randama 1,0 % visų priemaišų, pridedami 1, 2, 3, 4 ir 5 procedūrų rezultatai.
SPECIALIEJI BANDYMAI
• Optinis sukimas, savitasis sukimas <781>
Mėginio tirpalas: 30 mg/mL dehidratuotame alkoholyje
Priėmimo kriterijai: nuo -48,0 iki -51,0, 20 val
• Vandens nustatymas, Ic metodas <921>: NMT 0,2 %
PAPILDOMI REIKALAVIMAI
• Pakavimas ir laikymas: Laikyti gerai uždarytose talpyklose nuo 2 iki 8 ℃.
• USP atskaitos standartai <11>
USP Orlistat RS
USP su orlistatu susijęs junginys A RS
USP su orlistatu susijęs junginys B RS
USP su orlistatu susijęs junginys C RS
USP su orlistatu susijęs junginys D RS
USP su orlistatu susijęs junginys E RS
USP35