L-4-nitrofenilalanīna metilesteris HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl tests >98,5% (HPLC) rūpnīca

L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) analīzes metode (CAS: 17193-40-7)
Apraksts: Ievietojiet apmēram 2 g parauga tīrā un sausā Petri trauciņā un novērojiet parauga izskatu.Ziņošana: ziņojiet par novērojumu
Identifikācija: salīdziniet testa preparāta hromatogrammas galvenās pīķa aiztures laiku ar galvenās pīķa aiztures laiku sistēmas piemērotības pārbaudes hromatogrammā, kas iegūta ar HPLC hromatogrāfijas tīrību.
Zudumi žāvēšanas laikā: 30 minūtes žāvē seklo svēršanas pudeli ar stikla aizbāzni 105±2℃.Ļauj tai eksikatorā atdzist līdz istabas temperatūrai.Precīzi nosveriet svēršanas pudeli ar aizbāzni un pierakstiet svaru (W1).Sverglāzē pārnes aptuveni 1 līdz 2 g precīzi nosvērtu testa vielas daudzumu.Viegli kratot sāniski, sadaliet analizējamo paraugu pēc iespējas vienmērīgi apmēram 5 mm dziļumā.Nosver piekrauto svēršanas pudeli un pieraksta svaru (W2).Piekrauto pudeli ievieto žāvēšanas krāsnī, noņemot aizbāzni un atstājot arī to kamerā.Žāvējiet testa paraugu 105 ± 2 ℃ 3 stundas.Atverot kameru, nekavējoties aizveriet pudeli un ļaujiet tai eksikatorā sasilt līdz istabas temperatūrai.Precīzi nosveriet svēršanas pudeli ar aizbāzni un no jauna nosveriet svaru (W3).Aprēķiniet procentuālo zudumu paraugam žāvējot, izmantojot šādu formulu:
Aprēķins Žāvēšanas zudumi (% w/w) = (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Enantiomēra saturs pēc HPLC:
Ķīmiskās vielas un reaģenti:
n-heksāna AR klase
Metanola HPLC pakāpe
Izopropilspirta HPLC pakāpe
Dietilamīna AR pakāpe
Standarti: L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl standarts;L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl enantiomēra standarts
Mobilā fāze: sagatavojiet homogēnu n-heksāna, izopropilspirta, metanola un dietilamīna maisījumu (65:20:15:0,1 v/v/v/v)
Tukša sagatavošana: pārnes 2,5 ml metanola 10 ml mērkolbā, atšķaida līdz tilpumam ar kustīgo fāzi un samaisa.
Sistēmas piemērotības sagatavošana:
Precīzi nosver un pārnes apmēram 5 mg L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl standarta un L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl enantiomēra standarta 10 ml mērkolbā, izšķīdina apmēram 2,5 ml metanola, atšķaida līdz tilpumam ar mobilo ierīci. fāzi un samaisa.
Testa sagatavošana:
Precīzi nosver un pārnes apmēram 5 mg parauga 10 molu mērkolbā, izšķīdina apmēram 2,5 ml metanola, atšķaida līdz tilpumam ar kustīgo fāzi un samaisa.
Instrumentālie parametri:
Instruments: HPLC aprīkots ar inžektoru, sūkni, UV detektoru un ierakstītāju
Kolonna: ChiralPak-IC (4,6 mm x 250 mm) 5 μ vai līdzvērtīgs
Plūsmas ātrums: 1,0 ml/minūtē
Viļņa garums: 260 nm
Injekcijas tilpums: 10 μL
Kolonnas temperatūra: 25℃
Darbības laiks: 20 minūtes
Procedūra
Ievadiet šķīdumus, kā norādīts šādā secībā.Ierakstiet hromatogrammas un apstipriniet kritērijus:
Injekciju apraksts Injekciju skaita kritēriji
1. tukšais preparāts L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl vai enantiomēra aiztures laikā nedrīkst novērot traucējošu maksimumu.
Sistēmas piemērotības sagatavošana 1. Izšķirtspēja starp L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl un enantiomēra maksimumu nedrīkst būt mazāka par 2,0
Testa sagatavošana 1. Izmantojiet testa hromatogrammu, lai noteiktu enantiomēru saturu paraugā.
Relatīvais saglabāšanas laiks:
L-4-nitrofenilalanīna metilesteris HCl 1.0
Enantiomērs Aptuveni 1.11
L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl aiztures laiks ir aptuveni 9,8 minūtes.
Aprēķins: hromatogrammā, kas iegūta, sagatavojot testu, neņem vērā visus sagaidāmos L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl un enantiomēra maksimumus.Norādiet enantiomēru saturu paraugā pēc laukuma normalizācijas metodes.
Hromatogrāfiskā tīrība un piemaisījumi pēc HPLC:
Ķīmiskās vielas un reaģenti:
Diamonija fosfāta AR pakāpe
Fosforskābes AR pakāpe
Metanola HPLC pakāpe
Attīrīts ūdens
Standarti
L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl standarts
4-nitro-L-fenilalanīna monohidrāta standarts
Mobilā fāze-A
Izšķīdiniet 6,6 g diamonija fosfāta 1000 ml attīrīta ūdens.Noregulējiet šī šķīduma pH līdz 6,0 ar fosforskābi.Filtrs un gāze.Pirms šķīduma pH mērīšanas kalibrējiet pH metru ar standarta buferšķīdumu pH 4,01 UN 7,00.
Mobilā fāze-B
Metanola HPLC pakāpe
Sistēmas piemērotības sagatavošana
Precīzi nosver un pārnes apmēram 25 mg L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl standarta un 4-nitro-L-fenilalanīna monohidrāta standarta 50 ml mērkolbā, izšķīdina un atšķaida līdz tilpumam ar metanolu un samaisa.
Testa sagatavošana:
Precīzi nosver un pārnes apmēram 25 mg parauga 50 ml mērkolbā, izšķīdina un atšķaida līdz tilpumam ar metanolu un samaisa.
Instrumentālie parametri:
Instruments: HPLC aprīkots ar inžektoru, sūkni, UV detektoru un ierakstītāju
Kolonna: XTerra RP-18 (4,6 mm x 150 mm) 5 μ vai līdzvērtīgs
Plūsmas ātrums: 1,0 ml/minūtē
Viļņa garums: 265 nm
Injekcijas tilpums: 20 μL
Kolonnas temperatūra: 25℃
Darbības laiks: 45 minūtes
Gradienta programma
Laiks (min) mobilā fāze-A % mobilā fāze-B %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Procedūra:
Ievadiet šķīdumus, kā norādīts šādā secībā.Ierakstiet hromatogrammas un apstipriniet kritērijus:
1. tukšais preparāts L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl aiztures laikā nedrīkst novērot traucējošu maksimumu.
Sistēmas piemērotības sagatavošana 1. L-4-nitrofenilalanīna metilestera HCl pīķa atliekuma koeficientam jābūt ne mazākam par 2,0
Testa sagatavošana 1. Izmantojiet testa hromatogrammu, lai noteiktu hromatogrāfisko tīrību un piemaisījumus.
Relatīvais saglabāšanas laiks:
L-4-nitrofenilalanīna metilesteris HCl 1,0 (aiztures laiks aptuveni 11,4 minūtes)
4-nitro-L-fenilalanīns Apmēram 0,4
Toluols Apmēram 2.3
Aprēķini:
Hromatogrammā, kas iegūta no testa sagatavošanas, pēc tukšā parauga korekcijas neņem vērā toluola radīto maksimumu.Norāda hromatogrāfisko tīrību, 4-nitro-L-fenilalanīna saturu un kopējos piemaisījumus paraugā, izmantojot laukuma normalizēšanas metodi.