L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Анализа >98,5% (HPLC) Фабрика

Метод на анализа на L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl) (CAS: 17193-40-7)
Опис: Ставете околу 2 g од мострата во чиста и сува петри-сад и набљудувајте го изгледот на мострата.Известување: Пријавете го набљудувањето
Идентификација: Споредете го времето на задржување на главниот врв во хроматограмот на подготовката за тестирање со времето на задржување на главниот врв во хроматограмот за подготовка на соодветноста на системот како што е добиено во хроматографска чистота со HPLC.
Загуба при сушење: Исушете го плиткото шише со стаклена затвора на 105±2℃ 30 минути.Оставете го да се излади на собна температура во десцикатор.Прецизно измерете го шишето за мерење со затворач и запишете ја тежината (W1).Префрлете околу 1 до 2 g точно измерена количина на супстанција за испитување во шишето за мерење.Со нежно, странично протресување, распределете го тестниот примерок колку што е можно рамномерно до длабочина од околу 5 mm.Измерете го наполнетото шише за мерење и запишете ја тежината (W2).Ставете го наполнетото шише во рерната за сушење, извадете го затворачот и оставете го исто така во комората.Исушете го тест примерокот на 105±2℃ 3 часа.Откако ќе ја отворите комората, веднаш затворете го шишето и оставете го да дојде до собна температура во сушелка.Прецизно измерете го шишето за мерење со затворач и измерете ја тежината (W3).Пресметајте ја процентуалната загуба при сушењето на примерокот со користење на следната формула:
Пресметка Загуба при сушење (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
Содржина на енантиомер од HPLC:
Хемиски и реагенси:
n-Хексан AR одделение
Метанол HPLC одделение
Изопропил алкохол HPLC одделение
Диетиламин AR одделение
Стандарди: L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl стандард;L-4-Нитрофенилаланин Метил естер HCl енантиомер стандард
Мобилна фаза: Подгответе хомогена мешавина од n-хексан, изопропил алкохол, метанол и диетиламин (65:20:15:0.1 v/v/v/v)
Бланк Подготовка: Префрлете 2,5 ml метанол во волуметриска колба од 10 ml, разредете до волумен со мобилна фаза и измешајте.
Подготовка за соодветност на системот:
Измерете прецизно и префрлете ги по околу 5 mg од L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl стандард и L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl енантиомер во волуметриска колба од 10 ml, растворете во околу 2,5 ml метанол, разредете до волумен со мобилен фаза и се меша.
Подготовка за тест:
Измерете точно и префрлете околу 5 mg од мострата во волуметриска колба од 10 mol, растворете во околу 2,5 ml метанол, разредете до волумен со мобилна фаза и измешајте.
Инструментални параметри:
Инструмент: HPLC опремен со инјектор, пумпа, УВ детектор и рекордер
Колона: ChiralPak-IC (4,6mm x 250mm) 5 μ или еквивалентно
Брзина на проток: 1,0 ml/минута
Бранова должина: 260 nm
Волумен на инјектирање: 10 μL
Температура на заоблената колона: 25℃
Време на траење: 20 минути
Постапка
Инјектирајте ги растворите како што е споменато во следната низа.Запишете ги хроматограмите и потврдете ги критериумите:
Опис на инјекции Број на инјекции Критериуми
Бланк Подготовка 1 Не треба да се забележува интерференцијален врв во времето на задржување на L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl или енантиомер.
Подготовка за соодветност на системот 1 Резолуцијата помеѓу L-4-Нитрофенилаланин Метил естер HCl и врвот на енантиомерот треба да биде не помала од 2,0
Подготовка на тестот 1 Користете тест хроматограм за да ја одредите содржината на енантиомер во примерокот.
Релативни времиња на задржување:
L-4-Нитрофенилаланин Метил естер HCl 1.0
Енантиомер Околу 1.11
Времето на задржување на L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl е околу 9,8 минути.
Пресметка: Во хроматограмот добиен од подготовката на тестот, занемарете ги сите врвови што се очекуваат L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl и енантиомер.Пријавете ја содржината на енантиомерот во примерокот по метод на нормализација на површината.
Хроматографска чистота и нечистотии со HPLC:
Хемиски и реагенси:
Дијамониум фосфат AR одделение
AR степен на фосфорна киселина
Метанол HPLC одделение
Прочистена вода
Стандарди
L-4-Нитрофенилаланин Метил естер HCl стандард
Стандард на 4-Нитро-L-фенилаланин монохидрат
Мобилна фаза-А
Растворете 6,6 g дијамониум фосфат во 1000 ml прочистена вода.Прилагодете ја pH вредноста на овој раствор на 6,0 со фосфорна киселина.Филтрирајте и дегазирајте.Пред мерење на pH на растворот, калибрирајте го pH-метарот со стандарден пуферски раствор pH 4,01 И 7,00.
Мобилна фаза-Б
Метанол HPLC одделение
Подготовка за соодветноста на системот
Измерете прецизно и префрлете околу 25 mg секој од стандардот L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl и стандардот 4-нитро-L-фенилаланин монохидрат во волуметриска колба од 50 ml, растворете и разредете до волумен со метанол и измешајте.
Подготовка за тест:
Измерете точно и префрлете го примерокот од околу 25 mg во волуметриска колба од 50 ml, растворете и разредете до волумен со метанол и измешајте.
Инструментални параметри:
Инструмент: HPLC опремен со инјектор, пумпа, УВ детектор и рекордер
Колона: XTerra RP-18 (4,6mm x 150mm) 5 μ или еквивалентно
Брзина на проток: 1,0 ml/минута
Бранова должина: 265 nm
Волумен на инјектирање: 20 μL
Температура на заоблената колона: 25℃
Времетраење: 45 минути
Градиент програма
Време (мин) Мобилна фаза-А % Мобилна фаза-Б %
0,01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Постапка:
Инјектирајте ги растворите како што е споменато во следната низа.Запишете ги хроматограмите и потврдете ги критериумите:
Празен препарат 1 Не треба да се забележува пречки на врвот во времето на задржување на L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl.
Подготовка за соодветност на системот 1 Факторот на опашка за L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl пикот не треба да биде помал од 2,0
Подготовка на тестот 1 Користете тест хроматограм за да ја одредите хроматографската чистота и нечистотиите.
Релативни времиња на задржување:
L-4-нитрофенилаланин метил естер HCl 1,0 (време на задржување околу 11,4 минути)
4-Нитро-L-фенилаланин Околу 0,4
Толуен Околу 2,3
Пресметки:
Во хроматограмот добиен од подготовката на тестот, по корекција на празно, занемарете го врвот поради толуенот.Пријавете ја хроматографската чистота, содржината на 4-Нитро-L-фенилаланин и вкупните нечистотии во мострата по метод на нормализација на површината.