L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl CAS 17193-40-7 H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl Assay >98.5% (HPLC) Үйлдвэр

L-4-Нитрофенилаланин метил эфир HCl (H-Phe(4-NO2)-OMe·HCl)-ийн шинжилгээний арга (CAS: 17193-40-7)
Тодорхойлолт: 2 г орчим дээжийг цэвэр, хуурай петрит саванд хийж, дээжийн харагдах байдлыг ажиглана.Тайлагнах: Ажиглалтын талаар мэдээлэх
Тодорхойлолт: Туршилтын бэлдмэлийн хроматограмм дахь гол оргилын хадгалагдах хугацааг HPLC-ээр хроматографийн цэвэр байдалд олж авсан системийн тохиромжтой байдлын хроматограмм дахь гол оргилын хадгалалтын хугацаатай харьцуулна уу.
Хатаах үеийн алдагдал: Шилэн таглаатай, гүехэн жинтэй савыг 105±2℃ хэмд 30 минутын турш хатаана.Өрөөний температурт хөргөгчинд хөргөнө.Жинлүүрийн савыг таглаатай нягт жигнэж, жинг (W1) тэмдэглэнэ.Ойролцоогоор 1-2 г нарийвчлалтай жинлэсэн туршилтын бодисыг жинлэх саванд хийнэ.Зөөлөн, хажуу тийш сэгсрэх замаар туршилтын дээжийг 5 мм орчим гүнд аль болох жигд тараана.Ачаалагдсан жингийн савыг жигнэж, жинг (W2) тэмдэглэнэ.Ачаалагдсан лонхыг хатаах зууханд хийж, таглааг нь авч, мөн тасалгаанд үлдээнэ.Туршилтын дээжийг 105±2℃ температурт 3 цагийн турш хатаана.Тасалгааг онгойлгосны дараа лонхыг нэн даруй хааж, хатаагчаар тасалгааны температурт хүргэхийг зөвшөөрнө.Жинлүүрийн савыг таглаатай сайтар жинлэж, жинг дахин хэмжинэ (W3).Дээжийг хатаах алдагдлын хувийг дараахь томъёогоор тооцоолно уу.
Хатаах үеийн тооцооны алдагдал (% w/w)= (W2-W3) ÷ (W2-W1) x 100
HPLC-ийн энантиомерын агуулга:
Химийн бодис ба урвалжууд:
n-Hexane AR зэрэглэл
Метанол HPLC зэрэг
Изопропилийн спирт HPLC зэрэг
Диэтиламин AR зэрэг
Стандартууд: L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl стандарт;L-4-Нитрофенилаланин метил эфир HCl энантиомер стандарт
Хөдөлгөөнт үе шат: n-гексан, изопропилийн спирт, метанол, диэтиламин (65:20:15:0.1 v/v/v/v) -ийн нэгэн төрлийн хольц бэлтгэх.
Хоосон бэлтгэх: 2.5 мл метанолыг 10 мл хэмжээст колбонд хийж, хөдөлгөөнт фазаар хэмжээс хүртэл шингэлж, холино.
Системийн тохиромжтой байдлын бэлтгэл:
Нарийвчлалтай жигнэж, L-4-Нитрофенилаланин метил эфир HCl стандарт ба L-4-Нитрофенилаланин метил эфир HCl стандартыг тус бүрээс 5 мг орчим 10 мл-ийн колбонд хийж, 2.5 мл метанолд уусгаж, зөөврийн хэрэгслээр хэмжээс хүртэл шингэлнэ. үе шат ба холино.
Туршилтын бэлтгэл:
Нарийвчлалтай жигнэж, 5 мг орчим дээжийг 10 моль хэмжээст колбонд хийж, 2.5 мл метанолд уусгаж, хөдөлгөөнт фазаар эзэлхүүн хүртэл шингэлж, холино.
Багажны параметрүүд:
Багаж: HPLC нь форсунк, насос, хэт ягаан туяаны мэдрэгч, бичигчээр тоноглогдсон
Багана: ChiralPak-IC (4.6мм x 250мм) 5 μ буюу түүнтэй тэнцэх
Урсгалын хурд: 1.0 мл/минут
Долгионы урт: 260нм
Тарилгын хэмжээ: 10 мкл
Баганын температур: 25℃
Ажиллах хугацаа: 20 минут
Процедур
Дараах дарааллаар дурдсан уусмалуудыг тарина.Хроматограммыг тэмдэглэж, шалгуурыг баталгаажуулна уу:
Тарилгын тодорхойлолт Тарилгын тоо Шалгуур
Хоосон бэлтгэл 1 L-4-Нитрофенилаланин метил эфир HCl эсвэл энантиомерыг хадгалах үед саад болох оргил үе ажиглагдахгүй.
Системийн тохиромжтой байдлын бэлтгэл 1 L-4-Нитрофенилаланин метил эфир HCl ба энантиомерын оргил хоорондын нягтрал 2.0-оос багагүй байх ёстой.
Туршилтын бэлтгэл 1 Дээж дэх энантиомерын агууламжийг тодорхойлохын тулд туршилтын хроматограммыг ашиглана.
Харьцангуй хадгалах хугацаа:
L-4-Нитрофенилаланин Метил эфир HCl 1.0
Энантиомер 1.11-ийн тухай
L-4-нитрофенилаланин метил эфир HCl-ийг хадгалах хугацаа 9.8 минут орчим байна.
Тооцоолол: Туршилтын бэлтгэлээс олж авсан хроматограммд L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl болон Enantiomer-ийн хүлээгдэж буй бүх оргилуудыг үл тоомсорло.Дээж дэх энантиомерын агууламжийг талбайг хэвийн болгох аргаар мэдээлнэ.
HPLC-ийн хроматогратын цэвэршилт ба хольцууд:
Химийн бодис ба урвалжууд:
Диаммонийн фосфатын AR зэрэглэл
Фосфорын хүчил AR зэрэглэл
Метанол HPLC зэрэг
Цэвэршүүлсэн ус
Стандартууд
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl стандарт
4-Nitro-L-Phenylalanine monohydrate стандарт
Гар утасны үе шат-А
6.6 г диаммонийн фосфатыг 1000 мл цэвэршүүлсэн усанд уусгана.Энэ уусмалын рН-ийг фосфорын хүчлээр 6.0 болгож тохируулна.Шүүлтүүр ба хий тайлах.Уусмалын рН-ийг хэмжихийн өмнө рН хэмжигчийг стандарт буфер уусмал рН 4.01 ба 7.00-аар тохируулна.
Гар утасны үе шат-B
Метанол HPLC зэрэг
Системийн тохиромжтой байдлын бэлтгэл
Нарийвчлалтай жигнэж, 25 мг орчим L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl стандарт ба 4-Nitro-L-Phenylalanine моногидрат стандартыг 50 мл-ийн колбонд хийж уусган метанолоор хэмжээс хүртэл шингэлж холино.
Туршилтын бэлтгэл:
Нарийвчлалтай жигнэж, 25 мг орчим дээжийг 50 мл-ийн колбонд хийж уусгаж, метанолоор хэмжээс хүртэл шингэлж холино.
Багажны параметрүүд:
Багаж: HPLC нь форсунк, насос, хэт ягаан туяаны мэдрэгч, бичигчээр тоноглогдсон
Багана: XTerra RP-18 (4.6мм x 150мм) 5 μ буюу түүнтэй тэнцэх
Урсгалын хурд: 1.0 мл/минут
Долгионы урт: 265 нм
Тарилгын хэмжээ: 20 мкл
Баганын температур: 25℃
Ажиллах хугацаа: 45 минут
Градиент програм
Хугацаа (мин) Хөдөлгөөнт үе шат-A % Хөдөлгөөнт үе шат-B %
0.01 90 10
15 60 40
35 40 60
40 35 65
41 90 10
45 90 10
Процедур:
Дараах дарааллаар дурдсан уусмалуудыг тарина.Хроматограммыг тэмдэглэж, шалгуурыг баталгаажуулна уу:
Хоосон бэлтгэл 1 L-4-Нитрофенилаланин метил эфир HCl-ийг хадгалах үед саад болох оргил үе ажиглагдахгүй.
Системийн тохиромжтой байдлын бэлтгэл 1 L-4-Нитрофенилаланин метил эфирийн HCl оргилын хаягдлын хүчин зүйл 2.0-оос багагүй байх ёстой.
Туршилтын бэлтгэл 1 Хроматографийн цэвэр байдал, хольцыг тодорхойлохын тулд туршилтын хроматограммыг ашиглана.
Харьцангуй хадгалах хугацаа:
L-4-Nitrophenylalanine Methyl Ester HCl 1.0 (хадгалах хугацаа 11.4 минут орчим)
4-Нитро-Л-фенилаланин 0.4 орчим
Толуол 2.3 орчим
Тооцоолол:
Туршилтын бэлтгэлээс олж авсан хроматограммд хоосон залруулга хийсний дараа толуолаас үүдэлтэй оргилыг үл тоомсорлодог.Дээжин дэх хроматографийн цэвэршилт, 4-Нитро-Л-фенилаланины агууламж, нийт хольцыг талбайн нормчиллын аргаар мэдээлнэ.